기초적인 질문이 될 수도 있지만, 분화 후의 IPS세포는 원래 증식능이 별로 없나요?   대부분의 판매되는 IPS유래 분화세포는 계대가 안된다고 적혀있는게 많은 것 같은데, 알려주시면 감사하겠습니다.

저희 실험실에선 부착형 암세포를 주로 키우고 있습니다. 그러다가 이번에 새로 HeLa cell을 좋은 곳에서 받아왔습니다. 잘 가져와서 바로 풀었는데 이틀이 지나도 cell이 잘 붙지 않습니다... media는 DMEM high glucose에 10% FBS, 1% P/S를 쓰고 있습니다. 질소에 얼려있던 것을 녹인건데 너무 많이 안 붙어서... 두개를 받아와 하나는 아예 안 붙어 다 버리고 마지막입니다ㅜㅜ 혹시 media가 안 맞는 것일까요? 다뤄보신 분의 조언이 필요합니다..

토착미생물 배양시 밥이나 감자 콩이 들어가는데 이유가 당밀이나 전분을 대신하기 위한것 맞나요  

대학원 반학기차인데 cell seeding 계산하는 게 너무 어려워용 ... 만약에 cell counting 하였을 때 5.86x10^6 이라면 586x10^4 로 바꿔서 계산 하는 게 편하다고 하는데 필요한 cell 양이 5.0x10^4 이고 well 갯수는 10 이면  한 well 당 500ul 씩 넣어야한다면 cell 포함한 media 몇이랑 dmem 몇을 넣어야 할까용 ,,, 어렵네용 도와주세용 ㅠㅠ !!

안녕하세요, Bcl-family에 대해 연구하고 있는 학생 입니다. ABT-263을 가지고 실험 중인데요 왜 Bcl-w는 사람들이 잘 연구하지 않을 까요,,? Bcl-2 and Bcl-xL은 많이 알려져 있는데 그만큼 Bcl-w는 많이 없습니다. 특이점이 있나요,,? 혹시 anti-apoptotic에 대해 연구중인 분들 답변해주시면 정말 감사하겠습니다.

안녕하세요.! 궁금한게 있어서 글 올리는데요 cell 계대하는데, 모아서 센트리 1000에 돌렸는데 pellet이 적으면 이상한건가요?? cell을 깨끗히 다 떼내질 못해서 양이 적은건가요???

안녕하세요.   미세조류가 방출하는 EPS(extracellular Polymeric Substances)를 추출하여  탄수화물(페놀-황산법), 단백질 정량하여 측정하는 실험 진행중입니다. 여기서 측정된 탄수화물과 단백질이 미세조류 몸체를 구성하는 값이 아닌 세포외 고분자물질만의 값인지 어떻게 증명하나요?   그리고 EPS가 대부분이 탄수화물,단백질로 구성되어있기때문에 이 두 항목을 측정하는 것 같은데, 이외에 꼭 측정해야하는 것이 있나요? 대부분의 논문에서는 굳이 따로 보진않아 의문점이 생겼네요...  

    transfer 후 폰슈해봤는데 사진처럼 가운데에 큰 구멍이 있어 밴드가 안보입니다. pvdf membrane을 사용하고 메탄올에 담근 후 dw, trans buffer에 적셔 gel에 올리고 기포를 완벽하게 제거해주었습니다.. running까지 잘 진행된것을 확인했고, transfer는 90v에 120분간 진행했습니다. 총 3개의 gel을 transfer 했고, tank 두개를 사용하여 tank1에서 진행한것은 오른쪽 사진결과, tank2는 왼쪽사진과 사진은 없지만 transfer가 잘된것 하나 이렇게 진행했습니다. 기포라고 하기에 너무 큰 구멍인거 같은데 왜그럴까요??ㅠㅠ 고수님들 답변 부탁드립니다...!!

안녕하세요 RT-PCR 하려고 cell키워 seeding 하고 sample처리를 했는데 알티할때는 FBS없는 배지로 sample처리를 해야한다고 알고있는데 제가 fbs있는 배지로 샘플처리하고 24시간 뒤에 trizol처리했는데....fbs 유무에 따라 실험결과 차이가 많이나나요?  

안녕하세요 인턴과정중인 학부생입니다 실험을 처음하려니 헷갈리는게 많아 질문드립니다. XL1_Blue 를 LB plate에 streaking 하여 seed 진행 하려고 하고있습니다. streaking 후 15시간 정도 incubation 하고 seed 한뒤 12~16시간 키운 후 main cultre 진행으로 알고있는데요 제가 알고있는 시간대들이 정확한지 의문이 들어 여쭤봅니다 또한 main culture를 진행하기전 XL1_blue의 stock 또한 하나 더 만들어 놓을려고하는데 같은 main culture, stock을 만들기 위한 seed culture 시간이 동일한거가요?

현재 cell culture 환경이 이루어지지 않아 24well상태로 분양받을 수 있는 곳 있다면 알려주시면 감사하겠습니다ㅠㅠ!

신경세포, 특히 축삭부분에서 '근위'라 함은 어디인가요? 신경 재생관련 글을 읽다 보니 신경절단되었을 때 축삭의 '근위' 쪽에서 신경다발이 형성된다고 나와있는데 축삭의 근위라 함은 절단된 부위에서 신경세포체 부분의 절단면을 말하는 걸까요, 아니면 축삭말단쪽 절단면을 말하는 걸까요..?

안녕하세요. 페놀 황산법으로 당정량 실험을 진행하고있습니다. 동결건조한 가루시료 10mg에 증류수 10ml을 더하여 액체시료로 만들었고, 이중 500ul을 사용해 500ul 의 페놀과 2.5ml의 황산으로 진행하였는데 여기서 y =0.0234x-+0.1057, 흡광도=2.829 위와 같은 결과가 나왔습니다. 이때, 시료의 당 함량=(2.829-0.1057)/0.0234=116.380mg/0.5ml 이며, 251.75mg/ml(=251.75g/L)로 도출되는게 맞나요? 추가로 4mg에 증류수 10ml을 더해 만든 시료로 같은 방식으로 실험했을 경우에는 위와 같이 계산한후 2.5를 곱해주면될까요? 

안녕하세요 선생님들~ 저는 PBMC 관련 시약 연구 및 제조 하는 일을 하는데, 갑자기 NK 세포에 꽂혀서.. 지난 몇달을 브릭 실험 Q&A 에 많은 질문을 했고 선생님들 덕분에 성공적으로 면역세포를 열심히 공부하고 키우고 있는  사람입니다.    뭐에 홀렸는지 Cell culture 에 필요한 수많은 물질들의 구매와.. 정신을 차려 보니깐 FACs 장비 까지 구매를 해놓고 입고를 기다리고 있네요..ㅎㅎ   장비 구매 하면서 교육팀 및 지원팀이 내려온다고 하길래 다행이다 싶었는데.. 휴가 시즌에 물려서 그런가.. 장비 입고 날이 너무 뒤로 밀렸습니다.    문제는 지금 키우고 있는 면역세포가 조금 있으면 14일이 됩니다ㅠ  PBMC 에서 NK자극제를 넣고 NK분화가 잘 되었는지 빨리 확인하고 싶은 마음에  주변 대학에 FACs 분석 의뢰를 해봤더니..   기기는 있는데 사용을 한두번 밖에 안해봐서  잘 모르겠다는 답변을 받았네요.. 핳하하핳허하하허하ㅓ헣... ㅠ (거주 지역이 수도권과 거리가 꽤 있는 아주 작은 지방 도시 입니다)   기기는 사용하게 해줄태니 직접 와서 찍고 가라고 하셔서.. 부랴부랴 논문에 구글링에  사용법과  protocol 을 보고 있는 중입니다.    각설하고..! 처음 FACs 사용 하는 초짜 가 여러 protocol 을 보면서 sheet를 짜봤는데요 이 protocol 로 진행해도 괜찮을지 의견 부탁드립니다 ㅎㅎ     1. 세포가 지닌 자체 형광 기본 수치 체크를 위해 형광 물질 처리하지 않은 샘플 준비. 2. 염색 물질 은 PE-Cy5 나 PE-Cy5.5 사용. (사용전 vortex) 3. 염색 물질 (10mM) 을 세포 처리 후 인큐베이터 30분 반응 4. 염색 물질이 포함된 배지 제거  5. DPBS(in 0.1% sodium azide) 로 washing 6. trypsin-EDTA 작업 후 원심 돌린 다음 DPBS 넣고 세포 washing 7. 다시 원심 돌린 후 tube 의 DPBS 파이펫팅 해서 제거  8. tube에 깨끗한 DPBS 적정량 넣고 FACs 분석 시작. 9. 형광 물질 처리 하지 않은 샘플로 먼저 기본 수치 체크 후 형광 처리한 샘플로 실험 시작.   protocol은 이렇게 짜 보았는데, 혹시 변경해야 할 사항이나, 추가해야할 사항이 있는지  고수님들의 의견을 부탁드립니다 ^^ 

안녕하세요. 세포 관련해서 공부하고 있는 석사생입니다.   어제 CCD986sk 세포를 풀었는데(P-15, 분양을 새로 받은 것은 아닙니다. 연구실에 stock으로 있던 애를 풀었어요) 오늘 아침에 배지 교체를 해주려고 하니까, 거의 1/4 정도만 부착되어있더라고요.. 그래서 배지 교체를 빠르게 해줘야할지, 아니면 조금 부착하는거 기다렸다가 해줘야할지 고민입니다. 원래 이 세포가 처음에 부착되는 것도 오래걸리나요?

카테고리는 잘 모르겠어서 아무거나 선택했어요 죄송합니다ㅠㅠ   바실러스 튜링겐시스를 배양할 때 LB 배지에서 배양해야한다는 것 외에 잘 모르겠습니다. 자세하게 알려주세요ㅠㅠ 온도나 배양 방법, 배양시 주의 사항, 배양 기간 등등이요!   백강균을 배양할 때는 한천배지를 이용하는 것이 좋다고 알고 있는데요. 24도에서 배양하면 좋다는거 말고는 잘 모르겠어요 마찬가지로 배양 방법이나 배양기간, 배양시 주의사항을 자세하게 알려주세요!!