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Q. 웨스턴 로딩 중 스탑
웨스턴 로딩하고서 트렌스퍼 하기전에 겔을 1시간 정도 킵할 수 있는 방법이 있을 까요?
회원작성글 별헤는밥  |  08.11
Q. uncompetitive inhibition 질문입니다.
효소 저해활성 kinetic 분석 결과가 처음보는 형태여서 질문드려요. V0 구한 다음에 sigma plot의 kinetic으로 분석한 결과입니다. 라인위버버크 플롯을 보면 100 uM까지는 그래도 uncompetitive같은 방식인데 200 uM까지 보니 처음보는 형태로 나왔습니다. 보통 mixed type은 -x, +y 절편에서 교차하던데 이렇게 -x, -y에서 교차하는 타입은 어떤 형식인가요?
회원작성글 연구직렬  |  08.11
Q. Lb agar plate에서 대장균의 자란 구간 측정 방법
디스크 확산법을 이용해서 천연 항생물질의 항생효과 정도를 비교해 보려고 하는데요. 대장균을 lb agar plate에 배양하고 볼건데. 세균이 자란 구간과 억제된 구간을 어떻게 알 수 있나요? 색깔이 다른 가요? 그리고 자로 어떤 식으로 구간을 재야하는지 좀 알려주세요.. 그림 그려주시면 이해가 더 잘될 듯 해요
회원작성글 허브민트  |  08.11
Q. PCR이 잘 안돼요...
gibson assembly cloning을 하기 위해서 vector를 iPCR을 수행중인데 아무리 primer binding site를 바꿔서 진행을 해도 계속해서 multiband가 뜹니다.. 게다가 target site의 band가 너무 연하게 떠요.. primer desgin할 때 2nd structure까지 다 고려하고 snapgene 등을 활용해서 multibinding site 생성 여부까지 확인후 진행했지만 사진과 같은 결과만 나옵니다ㅠㅠ (위의 밴드가 target 하려는 region과 size가 맞는 밴드입니다.) (하필 multiband로 뜬 아래에 위치한 band의 size가 iPCR로 잘라내려는 부위가 사이즈가 비슷한것도 마음에 걸리네요) 어떻게 해야 PCR이 성공할 수 있을까요.. 클로닝 선배님을 살려주세요..ㅠㅠ
회원작성글 과지주  |  08.11
Q. Swallow rate 가 무슨 의미인가요?
외국 논문을 보는중에 추출물 관련된 논문에서 실험결과에 Swallow rate%가 있는데 이것은 어떤것을 측정한것을 의미하나요? 
회원작성글 도돌이표  |  08.11
Q. 콜로니가 없어요..
벡터에 클로닝 한뒤에.. 컴셀 키워서.. LB agar +엠피실린 100ul/ml 배지에 (일주일 전 미리 만들어놓았기 때문에.. 잘 굳어있는 상태) 500ul컴셀.. 넣고 도말했습니다.. 새 엠피실린으로 만들었어요.(엠피실린 맛 간 건 아닐것 같습니다,,) 다음날 아침에 콜로니를 관찰하려 하니 파일 첨부한것 처럼 뿌얀 무언가 덮여있고.. 콜로니가 아예 없어요..  잘 안보이는 저 콜로니같은것들은 콜로니가 아닌.. 도말하면서 밀렸던 배지 찌꺼기? 입니다.. 도와주십시요 ㅠㅠ
회원작성글 도라지우엉차  |  08.11
Q. tg마우스 만들기. B6/N 과 J가 섞여도 되나요
안녕하세요 ES cell targeting으로 tg mouse를 만드는 과정에서 질문이 있습니다. gene manipulation한 ES cell line은 background가 B6/N인데, 교배하여 colony를 만들 적에 B6/J를 사용해도 되는지요? 이미 만들었다면, 나중에 용인이 될 수준인지요? 면역학 실험에 사용할 예정입니다 (N과 J는 102개 SNP 차이가 있고, phenotype에도 영향을 미칠 '수' 있다고 알고 있습니다만.. 컨센서스가 궁금하네요) 이걸 만회할라면, 몇 번 back crossing을 해야할까요. 이게 비효율적이라면 chimera를 다시 B6/N wt과 교배시켜야할까요? 추가로.. mouse coat color gene (agouti) 도 보통 backcrossing으로 다 없애고 시작하시는지, 아니면 이정도는 그냥 black mouse와 동일하다고 보고 사용하시는지도 궁금합니다. 브리딩 한 번도 안 해보다가 처음 도입하려니 모르는게 많습니다.. 도움 부탁드립니다. 감사합니다!!
회원작성글 암세포1  |  08.11
Q. 파이펫 정확도 향상 방법 질문
마이크로 파이펫 사용시 예를들어 10ul를 딴다고 했을때, 1. 20ul 피펫 (사용범위 2-20ul) 2. 10ul 피펫 (사용범위 1-10ul) 2가지 파이펫중 어느걸 사용하는게 더 정확할까요? 사용범위안에 딱히 상관없을까요?
회원작성글 goooda  |  08.11
Q. 고등학교 비스페놀 검출 실험 질문
고등학교 동아리 시간에 비스페놀 검출 실험을 하려고 하는데 염화철 수용액 1,2,3에 어떤 종류를 써야하고 농도는 어떤 것이 적당할까요...? 영수증 넣고 색변화 관찰하는 용도로 사용할 예정입니다!!                    
회원작성글 박연주  |  08.11
Q. Elution buffer로서의 RNase-free water 역할
안녕하세요 제가 QIAGEN의 RNeasy Plus Mini Kit라고 RNA prep, RNA isolation을 위한 kit를 사용중입니다. Kit 안에 포함되어있는 여러 buffer들의 원리를 찾아보고 있었는데, 최종단계에서 elution buffer로 사용되는 RNase-free water가 어떠한 원리로 Pure RNA를 얻게 도와주는지 궁금해서 질문드립니다. 감사합니다.
회원작성글 Foxcatcher  |  08.11
Q. Hoechst, DCFDA 염색 문의드립니다.
살아있는 세포에 Hoechst와 DCFDA를 염색하려고 합니다. Hoechst는 DPBS에, DCFDA는 HBSS에 녹여 사용합니다. 그러면 염색할 때 Hoechst를 먼저 하고 DCFDA를 염색해야 하나요? 아니면 두개를 한 번에 염색해도 될까요? 염색 농도가 시간은 어느 정도 되는지도 알려주시면 감사합니다. 이전 기록이 없어서 찾아보며 하고 있습니다ㅜㅜ
회원작성글 차몬드  |  08.11
Q. plaque assay 진행중 agar 오염
안녕하세요. Influenza, herpes 등..여러 바이러스로 plaque assay를 진행중입니다. 마지막 단계에서 agar overlay후에 배양하고 며칠 지나면 agar에 세균이 자랍니다ㅜㅜㅜㅜㅜ agar는 당연히 오토클레이브 돌렸구요... agar랑 같이 섞어주는 배지는 필터링 하였습니다. 고정하고 염색해보아도 agar에 난 오염으로 cell이 죽는건지.... plaque는 잘 보이지도 않습니다..ㅡㅜㅜㅜㅜㅜㅜㅜ 혹시 오염나지않게 AA를 첨가했는데 농도를 더 올리면 될런지요..
회원작성글 꼬리빗  |  08.11
Q. migration할때 FBS 첨가하나요?
migration을 하고 있는데 실험실에 protocol이 없어서 논문만 엄청 찾아보았는데 FBS를 첨가한다는 말은 전혀 없더라구요. 그래서 그대로 했는데 세포가 이동을 안했습니다. 다른 실험실 지인 FBS를 첨가해야 이동을 한다고 하여서 10%fbs를 트리트먼트하고 30분뒤에 첨가하니 정말 이동을 하더라고요. 근데 원래 migration에 fbs 첨가하는게 맞나요?  저희는 처음부터 셀 시딩을 많이 하여서 3~4시간이면 처리한 cell들은 가운데로 다 붙습니다.  논문에 안써있어서 FBS를 첨가하는게 맞는건지 10%를 넣는것이 맞는건지 궁금합니다. 도와주세요!!!
회원작성글 oneday  |  08.11
Q. 시린지 필터로 소금물 여과할 수 있나요?
시린지 필터로 소금물 여과하면 여과되나요? 농도가 달라지나요?
회원작성글 워터콩  |  08.11
Q. 유산균 향균실험 질문드립니다!
대장균을 배양하고 페이퍼디스크에 유산균을 적셔서 향균효과를 확인하는 실험에서 더 나아가 온도나 ph가 이 향균효과에 미치는 영향등을 확인해보는 실험을 기획해보고싶은데 어떻게 해보면 좋을까요? 틀이 잘 안잡혀서,,
회원작성글 미더덕  |  08.11
Q. 데이터를 단순비교하고 싶은데 normalization을 어떻게 해야 할까요??
7일 후에 얼마나 분해가 되었는 가를 보고싶은데요 qPCR 결과상으로는 0일  cotrol 1x 10x 30 17 14 30 18 15 30 17 15 7일  cotrol 1x 10x 31 21 18 30 22 17 30 22 18 이렇게 두개의 데이터를 normalization해서 0일차에 비해 7일차가 어떻다 이렇게 말하고 싶거든요.. 이런 경우에는 normalization을 어떻게 해야하는 지 모르겠어요.. 도움 부탁드립니다.>!
회원작성글 soor  |  08.10
Q. 고등학생 암세포 관련하여 질문드립니다.
안녕하세요.  저는 일반고에 재학중인 한 고등학생입니다.  평소 암과 관련해서 많은 관심을 가지고 있는 중에, 학교에서 수업시간에 암에 대해 배우고 난뒤 이와 관련된 심화 탐구활동을 계획하고 있습니다.  제가 관심있는 분야는 암의 발생과 관련된것에 관심이 있는데,  특히, 암의 발생원인 중 하나로 여겨지는 환경오염이나 담배연기와 같은 환경적인 요인으로 인한 암 발생에 관해 심화탐구를 하고 싶습니다.  친구와 머리를 맞대고 여러가지 실험방법들을 고민해보았지만, 학교안에서 실험을 진행하기에는 많은 어려움이 있는 것같아 고민입니다. 혹시, 위와 관련해서 학교안에서 진행할만한 실험이 있을까요? 아니면, 암과 관련해서 할만한 실험에 대해서도 조언해주시면 감사합니다!!
회원작성글 지나가는 행인1  |  08.10
Q. 3몰 용액을 0.2몰용액으로 바꾸기
안녕하세요 제목에서와 같이 0.2M sodium acetate buffer 2L를 만들기위해 3M sodium acetate 500ml에 증류수를 얼마나 첨가하여야 할까요?
회원작성글 applebanan..  |  08.10
Q. MTT assay protocol
안녕하세요. 물질의 보호효과를 보기위해서 pretreat 개념으로 약물 처리 후 독성을 쳐서 cell viabilty를 확인하고자 mtt assay를 진행 중에 있습니다. 여러 프로토콜을 찾아보다가 저희 실험실에서 사용되어온 프로토콜이랑 달라 여쭤봅니다. 저는 cell seeding 24hr뒤 약물 처리 시간 지난다음 독성물질 24hr을 처리한 뒤 MTT 시약을 처리하는 데요. MTT 시약 5mg/ml 을 pbs에 녹인 후 1/10 dilution(0.5mg/ml) 된 mtt 시약을 처리합니다. 대부분의 프로토콜에서는 미디어 제거 후 페놀레드가 없는 미디어 90ul+mtt시약(5mg/ml) 10ul 처리하던데 저희 방에서는 페놀레드가 없는 미디어 대신 pbs에 희석하여 처리하는데 괜찮은 걸까요? cell culture medium에 희석해서 사용해야하나요? 정리하자면 저희방에서는 0.25g/50ml (10xmTT시약)이라 칭하고 1x로 희석하여서 바로 처리하는데 그 희석 용액이 pbs인데 맞는 건가 해서요. ㅠㅠ cell culture medium을 사용해야한다면 MEM gibco 제품 사용하고있는데 혹시나 MEM phenol red 없는 제품 사용하시는 분 계시면 답변 부탁드리겠습니다.
회원작성글 힝아  |  08.10
Q. 안녕하세요 ELISA plate 관련해서 궁금한점이 있습니다!!
안녕하세요 선배님들!! 갓 1학기를 보낸 석사생입니다! 연구실 졸업한 선배가 남기고 간 ELISA 키트를 활용해보려고 합니다. 남은 키트에 비해 플레이트가 부족해서 추가구매 하려고 하는데 혹시 키트에 동봉된 플레이트가 아니어도 괜찮은지 확인할 수 있는 방법이 있는지 여쭤보려고 질문 작성합니다! 키트는 SBI사의 ExoELISA ULTRA CD63 kit 이며, 키트 제작회사에 연락해보니 플레이트는  Nunc-Immuno Microwell 96 well solid plates, Cat#M9410-1CS 를 사용한다고 합니다. 해당 제품의 경우 너무 대용량으로만 판매를 하고 가격도 비교적 비싼 것 같습니다.  대체할 수 있는 플레이트를 찾는 방법이나 혹시 대체 가능한 다른 플레이트를 아는 분이 계신다면 공유해주시면 너무너무 감사드립니다!! 불쌍한 아가석사생 한번만 살려주세요 ㅠㅠ   감사합니다!!!!!!!!!!!!
회원작성글 사자돼지  |  08.10
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