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 카테고리: 전체 > Buffer/Reagent
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질문/투표/프로토콜 등록
Q. H2O2 농도 계산 맞게 했나 확인 부탁드립니다.
H2O2로 노화세포 만드는 모델을 사용하려 하는데 미디아에 200uM정도 넣어야한다고 해서 계산 해봤는데 맞나 확인 부탁드립니다.  30% H2O2 = 9.8M 1. 1M로 희석 = DPBS 898 ul + H2O2 102 ul 2. 1M에서 24 ml의 미디아에 200 uM의 양을 넣기 = 1M = 1,000,000 uM, 1M에서 200uM의 비율 = 1,000,000 / 200 = 5,000, 24 ml = 24,000 ul, 24,000 ul / 5000 = 4.8 ul 24 ml의 미디아에 1번의 1M H2O2 4.8 ul를 넣으면 24 ml 미디아에 200 uM만큼 들어가는거 맞나요? 이게 다른 솔루션에도 적용되는 농도 계산법일까요?
회원작성글 BeckG  |  2022.12.23
Q. EDTA-Pb 정량분석을 위한 ESI-MS 사용시 용매 질문입니다
EDTA-Pb 정량분석을 위해 직접주입을 통한 ESI-MS 분석을 진행하려고 논문을 읽어보는데, 분석 직전 EDTA 용액의 증발을 용이하게 하기 위해 15% 메탄올과 0.3% 아세트산을 첨가하라고 합니다. 얼마나 첨가를 해야하는건지 잘 이해를 못하겠습니다.
회원작성글 siiiiiio  |  2022.12.22
Q. KMnO4 staining solution 관련 질문드립니다
안녕하세여 저는 대학원 도비입니다 KMnO4 발색시약 만들어서 사용하고 있는데, 가끔 시약병에 옮기면 KMnO4 용액이 색을 잃으면서 기능을 못할때가 있습니다. 시약병은 세척 후 재사용을 하고 있기때문에 제대로 세척되지않은 무언가 때문에 발색시약이 변한다고 추측하고 있습니다. 혹시 왜그런지 아시는분 계신가여?
회원작성글 YJ222222  |  2022.12.21
Q. 배지에 넣는 yeast extract는 실험실 오염이랑은 상관이 없나요?
배지에 넣는 yeast extract는 실험실 오염이랑은 상관이 없나요?   말그대로 효모 추출물인데 이 가루가 실험실을 오염시키거나 하는건 아니죠?   근데 이 시약을 재서 배지에 넣거나 할때 엄청 조심하더라구요. 일반시약 넣는것보다 .. 모든 시약을 잴때 뭐 잘 닦고 가루 안날리게 하지만 유독 얘는 마치 세균이나 곰팡이 다루듯이 하더라구요. 바로 멸균시키고..   이유가 궁금합니다.
회원작성글 압타머11  |  2022.12.21
Q. 물질 섞는거에 대한 질문 드립니다...
Reconstitute at 100 μg/mL in sterile PBS. Alternatively, reconstitute at 100-500 μg/mL in sterile 4 mM HCl. 이 말 뜻을 잘 이해를 못하겠습니다.   해석은 되는데, 제가 농도에 너무 취약해서 설명좀 부탁드리겠습니다... 일단 물질 vial에는 10ug이라고 쓰여져 있습니다. 위에 영어로 된글은 데이터시트에 있는 내용입니다.
회원작성글 medi92  |  2022.12.19
Q. 농도 계산 문제 입니다...
동결건조 상태인 물질 10ug에 PBS 100ul를 넣어서 녹여주면, 10ug/100ul = 100ng/ul 잖아요? 이게 stock 농도인데, 제가 working 하고자 하는 농도가 50, 100 ng/ml 인데요. stocking을 working 농도로 희석 시키기 위해서 제가 total volume 3ml에 희석 할 거거든요. 그럼 working/stocking x total volume 하면 stocking을 얼마나 따야 하는지 알 수 있는거잖아요? 50/100 x 3000ul = 1.5ml 이게 맞나요?...
회원작성글 medi92  |  2022.12.19
Q. 1000x solution 만들기 질문 드려요
pellet culture 할때 쓸 미디아를 만들어야하는데 pellet 컬쳐를 자주 하지는 않아서 500ml 미디아에 만들어 놓고 쓰기에는 조금 과한 것 같아서 500ml 미디아에는 anti-anti 1%만 넣어놓고 나머지 재료는 1000x농도로 농축시켜서 만들어 놓고 그때그때 만들어서 사용하려 합니다. 근데 1000x 농도로 어떻게 만들어야하는지 헷갈려서 질문드립니다.  DEXA 0.3mg / 500 ml Proline 20 mg / 500 ml Ascorbic acid 25 mg / 500 ml 이게 500 ml 미디아 통에 만들때 넣는 양인데 따로 e-tube에다 1000x로 만들어 놓으려고 하면 DEXA로 예를 들면 0.6mg/1ml 로 만들어서 e-tube에 놓으면 만약 컬쳐하는데 미디아가 총 1 ml만 필요하다고 했을때 1 ml에는 0.00006mg 의 DEXA가 들어가야 하므로 만들어놓은 1000x DEXA 1 ul를 1ml 배지에 넣으면 0.3 mg /500ml의 농도와 같아지나요?!  제가 제대로 이해한건지 궁금합니다!
회원작성글 BeckG  |  2022.12.16
Q. immunohistochemistry에서 paraffin이 잘 안 떨어집니다. 답변 미리 감사드립니다.
IHC를 안 쓰는 조직 슬라이드로 연습중인 학부생입니다. 교수님께서 직접 해보라고 안 쓰는 슬라이드를 주셨는데 일주일 째 염색이 안되고 있어 질문 드립니다... protocol대로 가다가 두번 다 chromogen에서 발색이 안됐습니다. 첫번째는 교수님께서 보시고 paraffin이 남아있어서 반응이 안됐다고 다시 해보라고 하셔서 두번째는 xylene-EtOH-DW를 2번 하고 peroxidase, protein blocking, primary Ab, secondary Ab, chromogen까지 했는데 여전히 발색이 거의 안됩니다..  지난주에 교수님께서 하실 때만 해도 잘 됐는데 뭐가 문제일까요..? xylene에 넣고 시간만 맞추는데 왜 파라핀이 남아있을까요? xylene을 다시 만들어볼까요? Ab 계속 쓰기도 그렇고 또 여쭤보긴 민망해서 여기에 먼저 여쭙습니다.. 구글링해서 troubleshooting을 찾아봐도 paraffin관련 내용은 없더라구요..
회원작성글 앞구르기  |  2022.12.15
Q. 배지에 pH buffer를 넣으면 따로 적정할 필요가 없나요?
배지를 만들때 보통 pH를 원하는 정도로 맞추고 그걸 멸균해서 식으면 pH buffer(ex; phosphate buffer)를 넣는 것이 정석이라고 알고 있는데 만약에 여기서 pH 적정하는 단계를 빼고 멸균 후 pH buffer만 넣으면 적정하고 버퍼를 넣었을때와 별 차이가 없는지 궁금합니다.
회원작성글 란란루  |  2022.12.14
Q. 농도계산
Puromycin 농도가 10mg/ml 1ul/ml 씩 희석해서 사용합니다.  DMEM total volume 은 550ml 입니다. 이 때 총 DMEM에 들어갈 Puromycin 양을 구해야 하는데 어떻게 구하면 될까요ㅠㅠ...  
회원작성글 iiiiilllll..  |  2022.12.14
Q. 헨더슨-하셀바흐식 질문
PH=Pka+log [A-]/[HA] 여기에서 로그 [약산] 분의 [짝염기] 부분에 의문이 생겨서 질문 합니다. 일반화학실험 완충용액 에서 CH3COOH/NAOH 완충 용액 제조 과정이 있는데 농도는 둘다 2.0M 이고 각각 10ml/7ml, 10ml/5ml, 10ml/2.5ml 를 혼합후 3개의 혼합 용액을 증류수로 모두100ml부피로 맞춘 뒤의 PH 계산식이 (Pka= 4.74) 로그 계산에서 pH=4.74+log(NAOH/CH3COOH) 로 계산되어진다고 하는데 CH3COOH의 짝염기는 CH3COO- 아닌가요? 저렇게 두고 풀어도 되는 이유가 궁금합니다. ( 농도 같고 전체부피 같아서 몰농도 대신 각각의 부피로 계산해도 되는건 이해 했습니다.)
회원작성글 뚱이사실핑핑이  |  2022.12.12
Q. DEAE step gradient시 buffer 몰농도에 대한 궁금증
DEAE-Sepharose column으로 protein step gradient를 하고있는데 궁금증이 생겨서 질문 드립니다!  1M의 Tris-HCl stock을 희석하여 50mM로 만들고 1M 의 NaCl 용액을 만들어 서로 섞어서 0.1~0.5M 까지 NaCl 용액을 column에 흘려주면서 elution 하고있습니다 그런데 이렇게 되면 NaCl 용액은 농도에 맞춰 희석이 되지만 50mM의 Tris buffer는 또 다시 희석되는게 아닌가요? 50mM Tris buffer 100ml + 1M NaCl 100ml을 하게되면 25mM로 희석이 되는게 아닌지요? water와 섞으면 희석이 되는 것 처럼 NaCl 수용액과 섞어도 희석이 되는게 아닌지 의문이 듭니다. 저는 working 농도가 50mM로 해야하는데 말이죠 교수님께 질문을 드렸더니 희석되는게 아니고 NaCl 용액으로 껴들어간다? 여튼 명확한  이유를 듣지 못하여서 질문을 남깁니다,, ㅜㅜ 이러한 생각이 들다보니 생각이 꼬리에 꼬리를 물어 다른 궁금증도 생겼습니다 - 1M (pH 8.0)의 Tris buffer을 20배 희석하여 50mM를 만들어 사용하는데 순수한 water는pH가 중성에 가까울텐데 섞어도 왜 크게 pH의 변화가 없나요? 그 과학적인 이유가 뭘까요? 이건 너무 간단한 질문이라 하는게 실례라고 생각이 들지만 제가 search를 잘 못하는 것인지 명확한 이유를 알 수가 없어 질문드립니다 ㅜㅜ - potassium phosphate buffer를 monobasic과 dibasic을 각 1M 농도로 1L씩 만들어서   두 용액을 섞어가며 pH 별로 1M, potassium phosphate bufferstock을 만든 적이 있습니다. 그런데 1L monobasic 수용액에 dibasic 수용액을 섞게 되면 1L가 아닌 volume에  1M 농도의 분자량만큼 potassium phosphate monobasic이 녹아있을테니 그럼 1M이  아닌 것 아닌가요? monobasic의 입장(?)에서도 마찬가지구요,, 같은 물질이라면 당연히 1M 농도의 두 용액을 섞어도 똑같이 1M 이겠지만 다른 물질을 섞으면 각 물질의 분자량이 다른데 몰농도도 달라지는게 아닐까 하는 의문이 듭니다 질문이 길어졌는데 요약하자면 1. 50mM Tris buffer와 1M의 NaCl 수용액과 섞으면 Tris buffer도 희석되는게 맞는것인가? 아니라면 그 이유는? 2. 1M의 Tris buffer stock을 water로 희석하면 물은 중성에 가까운데 왜 pH는 변하지 않는과학적인 이유? (찾아보려고 했는데 찾지 못했습니다,, ㅜㅜ) 3. potassium phosphate monobasic과 dibasic을 각각 1M 농도로 1L씩 만들어 한 용액에 다른 용액을 섞어가며 여러 pH의 1M potassium phosphate buffer를 제조하였는데 생각해보니 섞으면 1L에 1M에 해당하는 분자량만큼 녹아있는게 아니니(1L보다 많아지니까) 그럼 1M이 아닌게 아닌가? 입니다. 너무나도 기초적인 지식을 물어 죄송합니다,, 답변이 병아리에게 정말 큰 도움이 됩니다 마음껏 타일러주셔도 감사합니다  
회원작성글 하남시보안관  |  2022.12.11
Q. saturated picric acid 만드는 방법 첨부파일
안녕하세요. Tissue 고정액으로 bouin solution을 쓰기 위해 만드려고 하는데요. Bouin solution에 saturated picric acid가 필요하다고 하는데, 실험실에 picrid acid liquid form (sigma 197378) 으로 시약이 있습니다.  이 시약으로 어떻게 saturated picric acid로 만드는지 방법을 몰라서 여쭈어봅니다.   답변 부탁드리겠습니다
회원작성글 히록스  |  2022.12.08
Q. 시약 혼합 질문
고체시약과 액체시약 혼합시 잘 녹지않는 고체시약들은 밑에 깔려서 완전 녹진않던데 마그네틱바 넣고 stir하는방법외에 없나요? 팁좀 부탁드립니다.
회원작성글 매력있지  |  2022.12.07
Q. agra와 agarose
skin만드는 실험 진행중인데 재료에 agra 나와있던데 agarose로 실험수행해도 되나요? agar와 agarose 대체해서 사용할수있나요??
회원작성글 매력있지  |  2022.12.07
Q. western blot 샘플을 ELISA에 사용 가능할까요?
western blot을 하기 위해 RIPA buffer (+ phosphatase inhibitor)로 homogenization한 tissue sample을 ELISA에 사용 가능할까요?
회원작성글 DRG  |  2022.12.06
Q. 시약 구매
중학교때까지만 해도 화확에 미쳐서 열중하다 고딩 이후론 손놓은 사람입니더... 최근에 무슨 바람이 불어 욕구가 좀생겼는지 실험을 좀 해보고싶은것들이 생겨서 시약좀 알아보는데 정녕 우리나라는 개인이 구매를 못하는 겁니까?ㅜㅜ 
회원작성글 atrlun  |  2022.12.06
Q. 버퍼 기능을 알고싶습니다
안녕하세요, 학부생입니다 처음으로 Geneall Exgene Plant SV mini  dna추출과 pcr실험을 했는데 버퍼들의 기능이 궁금한데 구글링을 해도 안나와서 여쭤봅니다 ㅠ.. 실험에서 사용한 버퍼는 1.PL 버퍼 2.PD버퍼 3.BD버퍼 4.CW버퍼 5.AE버퍼 이렇게 다섯가지 입니다, 이 버퍼들이 혹시 어떤 역할을 하는지 알 수 있을까요 부탁드립니다
회원작성글 충북대전쵸비  |  2022.12.01
Q. Molecular sieve 세척 방법 문의
안녕하세요,   저희 실험실에서 사용하는 유기용매의 탈수를 위해 Molecular sieve를 사용하고자 합니다. 실험목적은 유기물 분석이기 때문에 Molecular sieve의 오염을 최소화 하고 싶은데요 사용전 Molecular sieve의 세척 방법 조언 주시면 감사하겠습니다.
회원작성글 도시돼지  |  2022.11.30
Q. 부틸아세테이트 (butyl acetate) 증류 혹은 탈수 방법 문의
안녕하세요,   저희 실험실에서 부틸아세테이트 (butyl acetate)를 용매로 사용하고자 합니다.하지만 보유한 시약이 오래되고 함습 가능성이 있어보여, 증류 혹은 탈수를 진행하여, purity 및 assay값을 향상시키고자 합니다. 혹시 해당 용매 관련하여 증류 및 탈수 방법에 관한 조언 혹은 문헌을 부탁드리겠습니다.
회원작성글 도시돼지  |  2022.11.29
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