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Q. HeLa 셀 분양해주실 분 찾습니다.
안녕하세요. 성남 대학교에서 석사 과정을 진행하고 있습니다. 암세포를 가지고 실험을 하고 있는데 HeLa 셀이 필요합니다. 다른 곳에서 셀을 받아왔는데 전혀 살지 않았고 그곳에서 더 세포를 받아오기는 어려운 상황입니다. 혹시 수도권에 계신 분 중에서 HeLa 세포를 조금 나눠주실 수 있는 분이 계실까요? 연락 부탁드립니다. 감사합니다. honeyjar96@naver.com 
회원작성글 차몬드  |  08.11
Q. FACS cancer cell line compensation
보통 면역세포에서 여러 개의 항체를 보려고 FACS할때 compensation을 진행하는데, cancer cell line으로 FACS를 할 경우 교수님 말씀으로 어떤 이유 때문에 compensation을 할 수가 없다고 하는데요. 이러면 compesation을 못하는 만큼 각각 따로 해줘서 FACS tube가 너무 많이 나오게 돼요ㅠㅠ.. 혹시 암세포 FACS 할때 compensation 하는 방법이나 해결책이 있을까요?
회원작성글 개똥이야  |  08.11
Q. 기기 중고 매입하는 곳 있을까요?
저온동결트랩 장비를 판매하고 싶은데 정상작동하고 상태 괜찮습니다. 잘 쳐주는 좋은 업체 있을까요?
회원작성글 모자  |  08.11
Q. transfer 문제
transfer 진행 후에 멤브레인을 확인하는데 마커가 원래는 가로로 일자로 이쁘게 나와야 하잖아요?! 근데 제 마커는 아래로 45도 정도 숙이고 있는데 이럴 경우엔 단백질도 이런 모양을 띄고 있을 가능성이 높을까요..? 혹시 저랑 같은 경험 하셨던 분들 어떠셨나요 ㅠㅠ   그리고 transfer 후에 membrane 옆쪽이 구깃구깃 하던데 얘는 열을 많이 받아서 그런걸까요? 멤브레인이 구겨진 적은 처음이라 당황스럽네요 ㅜㅜ 
회원작성글 네이버  |  08.11
Q. 세균 성장 정도 측정 방법
Day1. 마늘 가루, 생강 가루, 계피 가루 10g씩 에탄올 100ml와 함께 비커에 넣고 섞는다. (추출액을 만들기 위해서) 파라필름으로 비커를 밀봉한 후 냉장고에 하루 동안 보관한다. Day2. (1) 비커에 상층 부분을 스포이드로 거름종이로 한번 거른다. (2) 디스크를 패트릭 접시에 옮기기 전 핀셋을 화염 멸균한다. (계속) 그리고 디스크를 옮긴다. 각 패트릭 접시에 (3) 마늘 추출액을 스포이드로 디스크에 30ul 씩 떨어뜨린다. 3개의 디스크 중 하나에 항생제 30ul을 더 추가한다. 생강 추출액, 계피 추출액도 이와 같이 실행한다. (4) 항생제(페니실린)을 30ul씩 3개의 디스크에 떨어뜨린다. 에탄올도 3개의 디스크에 30ul씩 떨어뜨린다.(대조군 역할) (5) 디스크가 마르는 동안 생물 나라에서 구매한 LB Agar Plate를 하나는 4개의 구역 또 다른 하나는 5개의 구역으로 나눈다. (6) 생물 나라에서 산 대장균 배양액을 피펫으로 (안되면 일회용 스포이드로) 100ul(0.1ml) 를 배지에 접종한다. 접종한 후 스프레더를 화염멸균하고 대장균을 잘 펴 바른다. (7) 나머지 배지도 위와 같이 실행한 후 배지를 말린다. (8) 핀셋을 화염 멸균한 후 추출물, 항생제, 에탄올을 적신 디스크를 배지 위 각 구역에 옮긴다. 옮길 때 디스크가 떨어지지 않도록 핀셋으로 살짝 눌러준다. (할 때마다 핀셋 화염멸균) (9) 배지를 담고 있는 접시를 파라필름으로 밀봉한다. 배양 준비를 끝마친 배지는 뒤집어 놓는다. (10) 배지를 배양기 속에 넣고 37도로 하루 동안 배양한다. Day3. 대장균 생장 억제 정도를 비교하고 자로 재서 정확한 수치를 비교한다. 계획이 이건데 세균 성장 정도와 억제 정도를 어떻게 구분하나요? 색이 있는 건가요? 그리고 자로 어떤 식으로 측정해야 할까요
회원작성글 허브민트  |  08.11
Q. cell doubling time
cell subculture를 하는데 질문이 있어서 글 남깁니다.  Ba/F3 (suspension cell)을 처음에 1x10^5 cells 을 split해서 서브하였는데, 5일뒤에 counting 해보니 2x10^8 cells이 되었습니다.    cell doubling time이라는게 cell수가 2배가 되는데 걸리는 시간이 아닌가요?  Ex) Ba/F3 cell의 doubling time이 20hr 이라고 하면, 20hr마다 1x10^5 → 2x10^5 → 4x10^5 → 8x10^5 → 1.6x10^6 → 3.2x10^6  → ~~~을 20시간마다 간다는 뜻이 아닌가요???  무조건 저대로는 아니고 오차는 존재하겠지만 몇배도 아니고 몇백배나 차이가 나서 궁금해서 질문드립니다.   
회원작성글 궁그미새싹  |  08.11
Q. 염색체이상 시험 검체 제작 첨부파일
안녕하세요 CHL세포로 염색체 슬라이드를 만드는 실험을 하고 있는데요. 첫번째 사진은 표본이구요.. 두번째는 직접 제작한건데, 보시다시피 염색체도 잘 안보이고 세포도 뭉쳐있는데요.. 이유가 뭘까요? 두어번 해봤는데 저렇게 되서.. 원인을 모르겠습니다ㅜㅜ 조언좀 부탁드리겠습니다.
회원작성글 DaddyBear  |  08.11
Q. cell differentiation confluence
skeletal muscle cell인데요, cell이 고루게 퍼져있는건 아닌 것 같은데 이상태로 분화시키면 안되나요?
회원작성글 별헤는밥  |  08.11
Q. 웨스턴 로딩 중 스탑
웨스턴 로딩하고서 트렌스퍼 하기전에 겔을 1시간 정도 킵할 수 있는 방법이 있을 까요?
회원작성글 별헤는밥  |  08.11
Q. uncompetitive inhibition 질문입니다.
효소 저해활성 kinetic 분석 결과가 처음보는 형태여서 질문드려요. V0 구한 다음에 sigma plot의 kinetic으로 분석한 결과입니다. 라인위버버크 플롯을 보면 100 uM까지는 그래도 uncompetitive같은 방식인데 200 uM까지 보니 처음보는 형태로 나왔습니다. 보통 mixed type은 -x, +y 절편에서 교차하던데 이렇게 -x, -y에서 교차하는 타입은 어떤 형식인가요?
회원작성글 연구직렬  |  08.11
Q. Lb agar plate에서 대장균의 자란 구간 측정 방법
디스크 확산법을 이용해서 천연 항생물질의 항생효과 정도를 비교해 보려고 하는데요. 대장균을 lb agar plate에 배양하고 볼건데. 세균이 자란 구간과 억제된 구간을 어떻게 알 수 있나요? 색깔이 다른 가요? 그리고 자로 어떤 식으로 구간을 재야하는지 좀 알려주세요.. 그림 그려주시면 이해가 더 잘될 듯 해요
회원작성글 허브민트  |  08.11
Q. PCR이 잘 안돼요...
gibson assembly cloning을 하기 위해서 vector를 iPCR을 수행중인데 아무리 primer binding site를 바꿔서 진행을 해도 계속해서 multiband가 뜹니다.. 게다가 target site의 band가 너무 연하게 떠요.. primer desgin할 때 2nd structure까지 다 고려하고 snapgene 등을 활용해서 multibinding site 생성 여부까지 확인후 진행했지만 사진과 같은 결과만 나옵니다ㅠㅠ (위의 밴드가 target 하려는 region과 size가 맞는 밴드입니다.) (하필 multiband로 뜬 아래에 위치한 band의 size가 iPCR로 잘라내려는 부위가 사이즈가 비슷한것도 마음에 걸리네요) 어떻게 해야 PCR이 성공할 수 있을까요.. 클로닝 선배님을 살려주세요..ㅠㅠ
회원작성글 과지주  |  08.11
Q. Swallow rate 가 무슨 의미인가요?
외국 논문을 보는중에 추출물 관련된 논문에서 실험결과에 Swallow rate%가 있는데 이것은 어떤것을 측정한것을 의미하나요? 
회원작성글 도돌이표  |  08.11
Q. 콜로니가 없어요..
벡터에 클로닝 한뒤에.. 컴셀 키워서.. LB agar +엠피실린 100ul/ml 배지에 (일주일 전 미리 만들어놓았기 때문에.. 잘 굳어있는 상태) 500ul컴셀.. 넣고 도말했습니다.. 새 엠피실린으로 만들었어요.(엠피실린 맛 간 건 아닐것 같습니다,,) 다음날 아침에 콜로니를 관찰하려 하니 파일 첨부한것 처럼 뿌얀 무언가 덮여있고.. 콜로니가 아예 없어요..  잘 안보이는 저 콜로니같은것들은 콜로니가 아닌.. 도말하면서 밀렸던 배지 찌꺼기? 입니다.. 도와주십시요 ㅠㅠ
회원작성글 도라지우엉차  |  08.11
Q. tg마우스 만들기. B6/N 과 J가 섞여도 되나요
안녕하세요 ES cell targeting으로 tg mouse를 만드는 과정에서 질문이 있습니다. gene manipulation한 ES cell line은 background가 B6/N인데, 교배하여 colony를 만들 적에 B6/J를 사용해도 되는지요? 이미 만들었다면, 나중에 용인이 될 수준인지요? 면역학 실험에 사용할 예정입니다 (N과 J는 102개 SNP 차이가 있고, phenotype에도 영향을 미칠 '수' 있다고 알고 있습니다만.. 컨센서스가 궁금하네요) 이걸 만회할라면, 몇 번 back crossing을 해야할까요. 이게 비효율적이라면 chimera를 다시 B6/N wt과 교배시켜야할까요? 추가로.. mouse coat color gene (agouti) 도 보통 backcrossing으로 다 없애고 시작하시는지, 아니면 이정도는 그냥 black mouse와 동일하다고 보고 사용하시는지도 궁금합니다. 브리딩 한 번도 안 해보다가 처음 도입하려니 모르는게 많습니다.. 도움 부탁드립니다. 감사합니다!!
회원작성글 암세포1  |  08.11
Q. 파이펫 정확도 향상 방법 질문
마이크로 파이펫 사용시 예를들어 10ul를 딴다고 했을때, 1. 20ul 피펫 (사용범위 2-20ul) 2. 10ul 피펫 (사용범위 1-10ul) 2가지 파이펫중 어느걸 사용하는게 더 정확할까요? 사용범위안에 딱히 상관없을까요?
회원작성글 goooda  |  08.11
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