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 카테고리: 전체 > Cell Biology > Cell Culture
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Q. 토착미생물 배양시 궁금합니다.
토착미생물 배양시 밥이나 감자 콩이 들어가는데 이유가 당밀이나 전분을 대신하기 위한것 맞나요  
회원작성글 리동이  |  08.02
Q. seeding 계산하는 법 좀 도와주세용
대학원 반학기차인데 cell seeding 계산하는 게 너무 어려워용 ... 만약에 cell counting 하였을 때 5.86x10^6 이라면 586x10^4 로 바꿔서 계산 하는 게 편하다고 하는데 필요한 cell 양이 5.0x10^4 이고 well 갯수는 10 이면  한 well 당 500ul 씩 넣어야한다면 cell 포함한 media 몇이랑 dmem 몇을 넣어야 할까용 ,,, 어렵네용 도와주세용 ㅠㅠ !!
회원작성글 와라랄랄  |  08.01
Q. 계대 pellet 양
안녕하세요.! 궁금한게 있어서 글 올리는데요 cell 계대하는데, 모아서 센트리 1000에 돌렸는데 pellet이 적으면 이상한건가요?? cell을 깨끗히 다 떼내질 못해서 양이 적은건가요???
회원작성글 쵸뵤  |  08.01
Q. 세포외 고분자물질 측정시
안녕하세요.   미세조류가 방출하는 EPS(extracellular Polymeric Substances)를 추출하여  탄수화물(페놀-황산법), 단백질 정량하여 측정하는 실험 진행중입니다. 여기서 측정된 탄수화물과 단백질이 미세조류 몸체를 구성하는 값이 아닌 세포외 고분자물질만의 값인지 어떻게 증명하나요?   그리고 EPS가 대부분이 탄수화물,단백질로 구성되어있기때문에 이 두 항목을 측정하는 것 같은데, 이외에 꼭 측정해야하는 것이 있나요? 대부분의 논문에서는 굳이 따로 보진않아 의문점이 생겼네요...  
회원작성글 룰루614  |  08.01
Q. XL1_blue streaking seed culture
안녕하세요 인턴과정중인 학부생입니다 실험을 처음하려니 헷갈리는게 많아 질문드립니다. XL1_Blue 를 LB plate에 streaking 하여 seed 진행 하려고 하고있습니다. streaking 후 15시간 정도 incubation 하고 seed 한뒤 12~16시간 키운 후 main cultre 진행으로 알고있는데요 제가 알고있는 시간대들이 정확한지 의문이 들어 여쭤봅니다 또한 main culture를 진행하기전 XL1_blue의 stock 또한 하나 더 만들어 놓을려고하는데 같은 main culture, stock을 만들기 위한 seed culture 시간이 동일한거가요?
회원작성글 인턴임다  |  07.31
Q. Shsy5y cell line stock상태로 말고 24well 상태로 분양받을 수 있나요?
현재 cell culture 환경이 이루어지지 않아 24well상태로 분양받을 수 있는 곳 있다면 알려주시면 감사하겠습니다ㅠㅠ!
회원작성글 loveyourse..  |  07.31
Q. 당정량 실험시
안녕하세요. 페놀 황산법으로 당정량 실험을 진행하고있습니다. 동결건조한 가루시료 10mg에 증류수 10ml을 더하여 액체시료로 만들었고, 이중 500ul을 사용해 500ul 의 페놀과 2.5ml의 황산으로 진행하였는데 여기서 y =0.0234x-+0.1057, 흡광도=2.829 위와 같은 결과가 나왔습니다. 이때, 시료의 당 함량=(2.829-0.1057)/0.0234=116.380mg/0.5ml 이며, 251.75mg/ml(=251.75g/L)로 도출되는게 맞나요? 추가로 4mg에 증류수 10ml을 더해 만든 시료로 같은 방식으로 실험했을 경우에는 위와 같이 계산한후 2.5를 곱해주면될까요? 
회원작성글 룰루614  |  07.29
Q. FACs 완전 초보입니다. 프로토콜 지적 부탁드립니다~! :)
안녕하세요 선생님들~ 저는 PBMC 관련 시약 연구 및 제조 하는 일을 하는데, 갑자기 NK 세포에 꽂혀서.. 지난 몇달을 브릭 실험 Q&A 에 많은 질문을 했고 선생님들 덕분에 성공적으로 면역세포를 열심히 공부하고 키우고 있는  사람입니다.    뭐에 홀렸는지 Cell culture 에 필요한 수많은 물질들의 구매와.. 정신을 차려 보니깐 FACs 장비 까지 구매를 해놓고 입고를 기다리고 있네요..ㅎㅎ   장비 구매 하면서 교육팀 및 지원팀이 내려온다고 하길래 다행이다 싶었는데.. 휴가 시즌에 물려서 그런가.. 장비 입고 날이 너무 뒤로 밀렸습니다.    문제는 지금 키우고 있는 면역세포가 조금 있으면 14일이 됩니다ㅠ  PBMC 에서 NK자극제를 넣고 NK분화가 잘 되었는지 빨리 확인하고 싶은 마음에  주변 대학에 FACs 분석 의뢰를 해봤더니..   기기는 있는데 사용을 한두번 밖에 안해봐서  잘 모르겠다는 답변을 받았네요.. 핳하하핳허하하허하ㅓ헣... ㅠ (거주 지역이 수도권과 거리가 꽤 있는 아주 작은 지방 도시 입니다)   기기는 사용하게 해줄태니 직접 와서 찍고 가라고 하셔서.. 부랴부랴 논문에 구글링에  사용법과  protocol 을 보고 있는 중입니다.    각설하고..! 처음 FACs 사용 하는 초짜 가 여러 protocol 을 보면서 sheet를 짜봤는데요 이 protocol 로 진행해도 괜찮을지 의견 부탁드립니다 ㅎㅎ     1. 세포가 지닌 자체 형광 기본 수치 체크를 위해 형광 물질 처리하지 않은 샘플 준비. 2. 염색 물질 은 PE-Cy5 나 PE-Cy5.5 사용. (사용전 vortex) 3. 염색 물질 (10mM) 을 세포 처리 후 인큐베이터 30분 반응 4. 염색 물질이 포함된 배지 제거  5. DPBS(in 0.1% sodium azide) 로 washing 6. trypsin-EDTA 작업 후 원심 돌린 다음 DPBS 넣고 세포 washing 7. 다시 원심 돌린 후 tube 의 DPBS 파이펫팅 해서 제거  8. tube에 깨끗한 DPBS 적정량 넣고 FACs 분석 시작. 9. 형광 물질 처리 하지 않은 샘플로 먼저 기본 수치 체크 후 형광 처리한 샘플로 실험 시작.   protocol은 이렇게 짜 보았는데, 혹시 변경해야 할 사항이나, 추가해야할 사항이 있는지  고수님들의 의견을 부탁드립니다 ^^ 
회원작성글 Derick  |  07.29
Q. CCD 986sk 세포 thawing 후 배지 교체
안녕하세요. 세포 관련해서 공부하고 있는 석사생입니다.   어제 CCD986sk 세포를 풀었는데(P-15, 분양을 새로 받은 것은 아닙니다. 연구실에 stock으로 있던 애를 풀었어요) 오늘 아침에 배지 교체를 해주려고 하니까, 거의 1/4 정도만 부착되어있더라고요.. 그래서 배지 교체를 빠르게 해줘야할지, 아니면 조금 부착하는거 기다렸다가 해줘야할지 고민입니다. 원래 이 세포가 처음에 부착되는 것도 오래걸리나요?
회원작성글 motherscof..  |  07.29
Q. U87MG cell morphology
안녕하세요. U87MG cell과 관련하여 문의드립니다. 96well에 옮긴 후 20시간 정도 지나면 cell들이 여러군데에서 서로 뭉쳐서 자라는데 안뭉치게 할 방법이 있는지 아니면 96well에서는 원래 뭉쳐서 자라는지 궁금합니다. cell을 키우고 있는 플라스크에서는 뭉치지 않고 잘 자라고 있습니다.
회원작성글 cswone2  |  07.28
Q. 암세포 배양을 co2배양기에서만 해야하나요? 일반 향온 배양기에서는 배양이 안되나요?
co2배양기 사용이 암세포 배양에 필수인가요?
회원작성글 단치  |  07.28
Q. transformation 후 spreading
transformation 후 spreading을 진행했습니다. spreading 후 overnight 지난 후에 plate를 빼야되는걸로 아는데 22시간이 지난 후에 꺼낸 plate로 seed하여 mini prep을 진행해도 괜찮은 걸까요? 제가 알기로는 30시간 까지는 괜찮다고 알고있는데 아시는분 계실까요?
회원작성글 인턴임다  |  07.28
Q. 현미경 접안렌즈에 10x/20 이라고 쓰여졌는데, 이건 10x 배율을 뜻하는건가요?
이번에 cell culture를 시작해서 cell 사진에 배율을 적어야 하는데, 대물렌즈는 정확하게 써있는 반면, 접안렌즈는 10x/20 이렇게 써있더라고요. 좀 더 정확히 표현하자면 아래 사이트의 이미지와 같이 10x/20 옆에 안경 모양 그림도 있습니다. https://ko.aliexpress.com/i/32911915228.html 대충 인터넷 사진들이랑 세포 사이즈 사진 비교해보니 10x 배율이 맞는거 같긴 한데, 10x/20 과 같이 이런 단위들을 읽는 법에 대해 정확히 알고 싶어서 질문드립니다. 감사합니다.
회원작성글 Foxcatcher  |  07.28
Q. cell culture amp 첨가
LB 배지 이용해서 cell culture하는데요, seed culture 20mL 할 때는 항생제 (amp) 첨가를 했는데 main culture 로 1L 키우는데, 깜빡하고 amp를 넣지않은 것이 생각나서 main culture에서 cell 키우다가 3시간 뒤에 amp를 넣어버렸습니다ㅜㅡㅜ 아직 초보라서 이것저것 하다보니 이런 말도 안 되는 실수를 한 것 같습니다.. 혹시 다시 키워야할까요? ㅜㅜ
회원작성글 1954열정  |  07.28
Q. FACS 분석 의뢰 할 수 있는 외부 업체 소개 좀 해주실 수 있으신가요?
제목 그대로 입니다 ^^ FACS 장비가 없어서 외부 업체에 의뢰를 맡기려고 하는데 업체 소개 해주실 선생님 계신가요~?
회원작성글 데롱이  |  07.28
Q. 처음들어보는 용어? 4 lg, tj 99%
안녕하세요.  외국 바이어분과 메일을 주고 받던중 처음 보는 약어가 나타나서 문의 드립니다.  생화학을 하기는 해보았으나, 살짝 맞만 본 상태이라 제가 모르는 약어 같습니다.  혹시 아래의 내용이 무엇일까요?    "effect of the disinfection to get 4 lg, tj 99,99% for virus and 5 lg, tj. 99,999% bacterium and mould"   4 lg, tj 99,99%   << 이부분을 모르겠네요..;; 대략 4 얼마를 쓰면 99.99% 살균된다는 내용같은데요..;; lg 와 tj 를 처음 봅니다.;;  
회원작성글 KDragon  |  07.28
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세오 (필명) (Cincinnati Children’s Hospital Medical Center)
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분석장비 탐험가 (필명) ((주)신코)
박은총 연재마감후배에게 주고 싶은 면역학 노트
박은총(Duke University)
Mr.S 연재마감의학계의 Spectaculum: 임상시험
Mr. S (필명) (연세대학교)
에스프리 연재마감실험을 해봅시다
에스프리 (필명)
이제욱 연재마감생명과학자 기초체력 다지기
이제욱 (오송첨단의료산업진흥재단, 신약개발지원센터)
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