[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보 회원가입   로그인
BRIC홈 실험
국립암센터
배너광고안내
이전
다음
스폰서배너광고 안내  배너1 배너2 배너3 배너4
[우당탕탕 석사 적응기] 석사 1학기 - 새로운 환경, 그리고 후회
전체보기 안전점검 LABox
 카테고리: 전체
Mol. Biol.-DNA Mol. Biol.-RNA Mol. Biol.-Protein Immunology
Cell Biology Microbiology Plant Biology Laboratory Animals
Omics Chemical biology Bioinformatics Laboratory Equipments
Buffer/Reagent Bioethics Etc.
카테고리 전체보기펼치기
질문/투표/프로토콜 등록
Q. Phosphate buffer 실온보관해도 되나요?
배지에 쓸 Phosphate buffer를 만들었는데 바로 쓸 건 아니고 이틀이나 사흘 뒤에 쓸거 같습니다. 이걸 막상 어디다 둘지 애매해서 검색해보니까 다들 말이 다르더라고요. 냉장보관해라, 실험조건이랑 비슷한 온도에 보관해라, 잘못하면 침전물 생긴다 등등... 뭐가 맞는건가요? 그리고 이것도 필터링 해야되나요?
회원작성글 란란루  |  09.23
Q. C2C12 cell culture 분화 유도 확인 (사진) 첨부파일
c2c12 cell 양만 불리면서 유지하려고 키우는 중인데, high density로 키운 것 같아서 분화가 유도 된 건지 확인해봐야 할 것 같은데, 눈으로는 크게 잘 모르겠습니다.. 아래 사진 첨부하겠습니다 density (confluence) 별로 다양하게 찍어봤습니다
회원작성글 mintim99  |  09.23
Q. 벤조피렌 HPLC 형광파장 안써도 검량곡선 이용해서 정량 알 수 있나요?
벤조피렌에 관한 HPLC 실험을 하려고 합니다 그런데 여기파장 이랑 형광파장이 논문에 있는데 형광파장이 없어서 여기파장만을 쓰려고 하는데 여기파장만 써도 벤조피렌 정량분석이 가능할까요?    여기파장이 UV를 뜻하는지 RID를 뜻하는지도 알려주세요
회원작성글 히힛헷  |  09.23
Q. lipid peroxidation assay kit 관련 질문입니다.
abbexa사의 lipid peroxidation(MDA) assay kit을 구매했고 이걸 이용해서 lipid peroxidation를 측정하려고 합니다. Collect the cells into a centrifuge tube, and briefly centrifuge to precipitate the cells. Discard the supernatant and add 1 ml of Assay Buffer for every 5,000,000 cells. Sonicate at 20% power in 3 second bursts with a 10 second rest interval, for 30 bursts in total. Centrifuge at 8000 × g at 4°C for 10 minutes. Transfer the supernatant to a new tube, keep on ice and analyze immediately. 위의 sample 준비 과정에서 5x10^6를 1ml assay buffer를 넣으라고 하는데 cell seeding > 시약처리 > cell counting 해서 5x10^6 cell 만큼의 cell을 tube에 넣고 centrifuge하고나서 여기에 assay buffer를 1ml 넣으면 되는건가요? 제가 이해한게 맞는지 확인부탁드립니다.
회원작성글 SLYSH  |  09.23
Q. RT-qPCR 관련 질문입니다.
qPCR관련 해서 질문드립니다.   Delta-delta Ct로 진행을 하고 reporter로는 SYBR을 사용하고 있습니다.   여기서 궁금한게 qPCR에서 실험 설정할 때 cDNA template를 넣어주지 않는 blank를 거는데    이 blank를 거는 이유가 무엇이 있을까요?
회원작성글 ㅡ,ㅡ;;  |  09.23
Q. 오일류 방부력 시험 가능 여부가 궁금합니다.
안녕하세요. 오일류(오일 성분 100%)는 방부력 시험이 불가능한가요? 샘플에 균액을 넣을때, 균액 자체가 수용성이니까 전혀 섞이지 않을것같아서 궁금해서 질문 드립니다! 혹시 가능하다면 어떻게 진행해야하는걸까요? ㅜㅜ 참고할만한 서적이나 자료 링크 알려주시면 감사하겠습니다.
회원작성글 뜌  |  09.23
Q. genomic DNA의 분리 실험에서
아직 초짜라 유전체 분리 실험에서 모르는점이 많은데 도움 주시면 정말 감사하겠습니다. 1. 유전체 분리 실험에서 DNA를 TE 버퍼에 보관하는 이유가 뭔가요 ??  안정적으로 보관할 수 있는건 아는데 그 정확한 이유가 궁금합니다. 또한 TE buffer 가 완충용액이 맞나요 ?    2. 분리된 DNA순도와 농도에 영향을 미치는 요인은 무엇인가요 ..?  이 실험에서 영향을 미치는 요인이 있을까요 ??     
회원작성글 vlsly  |  09.22
Q. Raw264.7 물질처리 9시간 후 이상반응 문의 첨부파일
안녕하세요. Raw264.7 세포를 이용하여 생존율 확인하는 중  0.1ug/ml 농도로 물질처리 9시간 후 세포의 형태가 이상하여 질문드립니다. 48well plate 에 5x10^4 로 계산하여 seeding 하였고, 0.1, 1, 10 ug/ml 농도별 3반복씩 물질처리 하였습니다. 9시간 후 현미경 관찰 시 0.1ug/ml 농도 처리 3반복 well만 첨부한 사진처럼 변했습니다. 똑같은 plate가 하나 더 있었는데 그 plate 상 0.1ug/ml well은 멀쩡했구요.. 사진의 핵?막?같은건 뭐라고 판단하시나요.. 오염된걸까요..?    
회원작성글 펩시라임  |  09.22
Q. C2C12 cell culture confluency
안녕하세요. C2C12 cell을 저번주 금요일에 thawing down 해서 이틀 후에 확인하여 90% 정도 confluency가 찼을 때 split을 하고(vial은 안 만듦) 다시 이틀 후에 15cm dish로 subculture를 했는데 그 때는 처음보다 confluency가 더 많이 차 있었습니다.  제가 이 세포의 doubling time을 착각해서 confluency 가 너무 많이 찼을 때 계대를 했는데, 이미 분화가 시작 되어서 이 세포로 실험을 진행하지 못할까요..? 그동안 만들어둔 vial도 이제 분화 및 추출처리 실험에 사용하지 못하는 건가요?ㅠㅠ 그리고 differentiation 유도가 된지 안된지 잘 모르겠는데, 단순히 morphology 만 보고 알 수 있는건가요? 귀한 세포인데 큰 실수를 한것같아서 너무 조마조마합니다. c2c12 cell에 관한 자세한 조언 등등 부탁드립니다. 감사합니다.
회원작성글 mintim99  |  09.22
Q. two-way anova관련 R에서 p-value가 의미하는 바
독립변수 A 화학modification의 위치 독립변수 B 약품의 농도 일 때 two-way anova를 R에서 aov(y~A*B, data=) 로 돌렸는데요             Df Sum Sq Mean Sq F value   Pr(>F)     A            1  14877   14877 178.177 4.34e-10 *** B            3  13821    4607  55.176 1.17e-08 *** A:B          3   2474     825   9.878 0.000632 *** Residuals   16   1336      83   이러한 결과값이 나왔습니다. 확인하고자하는게 화학modification에 의해 유의미하게 다르다 라는 것을 확인하고 싶은데요 그 때는 A의 Pr(>F) 만 확인하면 되나요?  A:B는 무엇을 의미하는지 모르겠습니다.
회원작성글 Julius_jin  |  09.22
Q. 미생물 od 값 희석 방법
안녕하세요, 박테리아 stock 만들려고 하는데, OD600 값이 0.8이 될 때 저장하려고 합니다. 그런데 만약 OD600 값이 1.5를 넘는다면, 어떻게 희석해서 저장해야 하나요? 예를 들면.. 키우는 중인 broth에서 얼마를 따서 media 얼마에 희석한다는 등..
회원작성글 kkykk  |  09.22
Q. 조직 병리 실험 대행 업체 아시는분 계실까요?(슬라이드, IHC)
조직 병리 실험 대행 업체를 찾을려고 합니다   혹시 경기도 서울 주변으로 업체를 아시고 계신분 있으실까요?   고수님들의 많은 관심 부탁드립니다.
회원작성글 행운13  |  09.22
Q. antibiotics selection 시 media
G418 항생제를 통해 selection test를 해보려고 합니다. media에 G418을 농도에 맞게 넣은뒤 cell에 처리한다고 하는데 이때 ampicillin이 없는 FBS만 포함된 media를 사용해야하나요?? 아니면 ampicillin이 포함되어 있어도 상관없나요??
회원작성글 빙글뱅글  |  09.22
Q. 보존료 실험 중 내부표준물질의 RT변화에 대해서 질문드립니다!
안녕하세요. 식품중 보존료를 검사하고 있는 일을 하고있습니다. 식약처에서 제시한 방법에 따라서 프로피온산을 GC로 분석을 하고있습니다. 표준품(프로피온산), 내부표준물질(크로톤산)은 아세톤에 희석하여 분석하고 시료같은 경우는 추출용매가 에탄올입니다. 그래서 그런지 GC분석을 하면 표준물질의 프로피온산, 크로톤산의 RT와  시료의 프로피온산, 크로톤산의 RT가 조금 차이가 납니다.ㅠㅠ 에탄올에 녹인 시료를 분석할 때의 RT가 표준품보다 살짝 밀립니다.  RT를 맞추고 싶은데 혹시 해결할수 있는 방법이 있을까요? (GC컬럼은 FFAP를 사용합니다.) 도움부탁드리겠습니다!
회원작성글 둥배누나  |  09.22
Q. Dna methylation 확인 실험 계획
고등학교 1학년이고 학교에서 예산을 받아 dna 메틸화 관련 탐구를 진행하려고 합니다 그래서 dna methylation 확인 실험을 해보려고 하는데 검색을 해봐도 방법을 찾지 못하겠어서 질문을 하게 되었습니다 Dna methylation 확인 실험 중 bisulfite conversion 로 계획하고 있습니다! 방법이나 혹은 참고할 만한 사이트 있으면 알려주시면 감사하겠습니다
회원작성글 다음  |  09.22
Q. iPSC 배양용 Essential 8 배지 써보신분
fibroblast로 episomal reporgramming 해서 ips를 만드려고 하는 중인데요.   episomal reprogramming kit를 이용하는데 여기 protocol에 essential 8 media를 쓸때는 37도에서 데우지 말고 상온에 둬서 찬기가 없어질때까지 두라는데 이렇게 사용하는게 맞는건가요?   "Before use, warm complete medium required for that day at room temperature until it is no longer cool to the touch. Do not warm the medium at 37°C."   주말에도 나와서 배지교환해줘야 하는데 37도에서 데우기 없이 상온에서 두려면 시간이 꽤 걸릴것 같아서요ㅜㅜ   essential 8 배지 사용해보신분 계시면 이렇게 사용하셨는지 37도에서 데워도 상관없는지 궁금합니다.
회원작성글 him  |  09.22
Q. cystal violet이 옷에 묻었는데 어떻게 지우나요?
gram-staining 하다가 crystal violet이 옷에 튀었는데 알코올로 지우면 지워질까요? 다른 글 보니까 오래 세탁하다보면 연해진다고는 하던데 알코올로 하면 좀 효과 있으려나요?? ㅠㅠ
회원작성글 빈가루  |  09.22
Q. rt-qPCR prep과정 시 rna추출량이 너무 적어요ㅠ
안녕하세요 rt-qPCR prep을 하고 있는데 RNA추출량이 너무 적게 나와서 문의드려요.. 일단 24well plate에 RAW 264.7 cell을 10^4cells/ml씩 seeding한 후 단백질을 treat 한 후 5일 째 되는 날 prep 진행하였습니다. prep 과정은 아래에 적어놓았습니다. 1. RiboEx 1ml을 넣고 피펫팅을 하여 세포를 회수한 후 Chlroform 200ul씩 넣고 볼텍싱하여 4도에 15분 두기 2. 13000g , 15min centrifuge 후 상등액 200ul 만 isopropanol 500ul에 넣고 4도에 15분 두기 3. 다시 13000g, 15min centrifuge 4. 펠렛을 제외하고 나머지는 피펫으로 빨아들이고 75%에탄올을 600ul넣고 13000g, 15min centrifuge를 하여 워싱 (이 과정 3번 반복) 5. 피펫으로 나머지 알코올 최대한 제거 후 Ep tube 뚜껑 열어서 말려주기 6. 50도에 히팅한 NFDW를 6ul 정도 펠렛이 들어있는 튜브에 넣고 잘 mix하여 나노드랍찍기   control군과 물질처리한 군을 비교해 보기 위해 진행하였습니다. control군의 RNA양은 800ng/ul정도 나오는데 treat한 군의 RNA양은 80~90ng/ul정도로 너무 적게 나와서요. 260/280값과 260/230값은 모두 정상범위안에 들어왔고, treat한 군의 세포를 현미경으로 확인하였을 때는 죽어보이진 않았습니다. 10번정도 진행했는데 거의 같은 결과가 나와서 핸들링 문제는 아닌 것 같아요.. 조언 부탁드립니다ㅜㅜ
회원작성글 asgacaew  |  09.22
Q. PCR melting curve peak 관련 질문 드립니다.
안녕하세요. PCR 진행 중 primer peak 관련해서 질문 드립니다.   현재 저희가 선배 실험을 그대로 재현하는 중이어서 예전에 사용했던 primer와 같은 sequence로 제작하여 사용 중입니다.  근데 타겟군에서는 melting curve peak가 1개로 일정하게 나오는데 nc군에서는 melting curve peak가 일정하지 않고 다른 쪽에서 1 peak를 찍거나 2 peak를 찍는 경우가 있습니다. 전에 실험했던 선배는 primer 문제는 없다고 했습니다. PCR cycle은 95도 10분 preheat 후 95도 15초 -> 60도 15초 -> 72도 30초로 40 cycle 진행하였습니다. primer의 TM값은 58도입니다. NC 군의 melting curve이고 타겟군의 melting curve 입니다.   PCR을 여러번 진행했는데 매번 같은 결과가 나왔습니다. 재현 실험이라 primer 교체는 최후로 생각하고 있습니다.   답변 주시면 감사하겠습니다.
회원작성글 anfakfen  |  09.22
Q. 균 TEM negative staining 관련 질문 드립니다.
안녕하세요. 저희는 균 겉에 붙어있는 exosome을 촬영하고 싶어서 TEM 촬영을 하고 있는데 균을 negative staining하면 염색약 (uranyl acetate)를 정말 짧게 (올렸다가 바로 흡수시킴) 해도 너무 까맣게 나오네요ㅜㅜ   sample 5 ul loading 후 1분 방치 -> blotting -> 2% uranyl acetate staining (20 ul, 1초) -> blotting -> drying 이 방법으로 negative staining 진행했습니다. 이게 저희가 찍은 사진이고 위 사진처럼 나오길 원합니다.   감사합니다.
회원작성글 anfakfen  |  09.22
이전  01 2 03 04 05 06 07 08 09 10  다음
실험 회원 등급이란?
실험Q&A 회원등급안내
위로가기
실험 홈  |  실험FAQ
 |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의
트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS
진스크립트 광고