MRC-5를 T 플라스크에 일주일 배양 하였고 세포를 수집한 다음에 세포수를 카운팅하는데 세포의 모양이 일반적인 세포 크기보다 퍼져보이고 늘어져 보이는 것을 확인 했습니다.  seeding 했을 때와 세포의 모양이 차이가 많이 나서 정상적인 세포가 아니었다고 판단을 하였는데 어떤 부분을 주의하면서 계대를 진행해야 할까요...

미백 실험을 위해 시료 전처리를 하고 있는데 시료 준비가 어려워서 문의드립니다.    시료 1g/50ml (70%EtOH) 초음파 추출 > 감압농축하여 용매를 날린 후 증류수로 녹여 동결건조했습니다.  동결건조한 시료를 70% EtOH로 녹여 고농도의 stock을 제조하였습니다.  이후 tyrosinase 효소의 영향을 줄이기 위해 에탄올이 10% 이하가 되도록 증류수로 stock을 희석하였습니다.  그런데 이 과정에서 동결건조 stock의 침전물이 생겼습니다.  이런 이유는 무엇인가요? ㅠ    아니면 동결건조 시료를 다시 용액으로 만들 수 있는 다른 방법이 있을까요? 

https://medipoint.com/animal-lancets/ Submandibular bleeding 혹은 Facial vein blood collection을 위해서 필요한 Goldenrod Animal lancet의 국내 구입처가 있는지 궁금합니다.    혹시 과거에 Submandibular bleeding에 대한 경험이나, Lancet을 사용해본적이 있으신 분이 있다면 답변 부탁드립니다.    Lancet이 있다면, Medipoint사의 것이 아닌 다른 animal용 lancet추천도 감사드립니다. 

과산화수소가 포함 되지 않은 TMB solution을 구매하고 싶은데 powder로 밖에 팔지 않는걸까요? ㅠㅠ 혹시 그렇다면 TMB powder를 사서 DMSO에 녹여 사용하면 될까요?

혹시 pcDNA3.1-PCDH10을 가지고 계신 대학이나 개인 있으신가요? 이번에 pcDNA3.1-PCDH10을 이용하여 transfecton을 진행하려고 하는데, 국내에서 받고싶어.. 혹시 있으신분들 댓글 남겨주시면 감사드리겠습니다..

바이러스 strain 분류가 Wa-like, DS-1 like 로 나뉜다는데 Wa랑 DS-1의 의미가 뭘까요ㅠㅠㅠ

위 사진은 아세트아미노펜 hplc 분석 사진입니다. 아세트아미노펜 단일 분석을 진행했는데, 피크가 2개가 검출되었습니다. 시료는 MeOH에 녹이고, 크로마토 조건은 ACN:H2O=40:60, 검출 파장 260nm, 유속 1.5ml/min, 컬럼은 C18컬럼을 사용했습니다.  어떤 이유로 아세트아미노펜 피크가 2개가 검출되었는지 알 수 있을까요?   위 사진은 아세트아미노펜과 동일 조건으로 Methyl p-hydroxybenzoate 단일 분석을 진행한 사진입니다. RT 초기 2분에서 3분 사이에 알 수 없는 피크가 2개가 검출되었는데 이유를 모르겠습니다. 실험 전 ACN:H2O=75:25 비율로 세척을 진행하고, ACN:H2O=40:60으로 안정화 진행 후 분석을 진행했습니다. 컬럼 세척이 제대로 안되서 고스트 피크가 발생한 걸까요? 문제 해결을 위해 필요한 정보가 있으시다면, 댓글 보는대로 정보알려드리겠습니다. 

학부 실험하는데 현미경으로 동물세포를 관찰하는데는 구강상피세포를 사용하고 등장, 저장, 고장액으로 삼투실험할때는 적혈구를 썼습니다. 이유가 있나요? 왜 삼투실험에서는 굳이 복잡하게 채혈해가면서 적혈구를 사용하는건가요...?

안녕하세요 이번에 처음으로 Ta cloning 을 진행하게되면서 다양한 이론도 읽어보고 실험 방법도 보고있는데 plasmid prep 과정을 진행하게 되면 전체 염기서열도 읽을 수 있게 되는걸까요?

안녕하세요. 4T1 cell에서 chemical 처리 후 생성되는 ROS 측정을 FACS로 실험중입니다. 데이터를 분석하는 도중 Untreat group(Control-FITC)이 Unstatin 기준 100%가 나옵니다. Control그룹에서 시그널이 너무 강하게 떠서 chemical 농도별로 분석이 안되는 상황인데, control 그룹 시그널을 약하게 할 수 있는 방법이 있을까요? 처음에는 DCFH-DA working solution의 농도가 너무 높아서 그런가해서 10uM로 사용하던 것을 1uM로 줄여서 사용했습니다. 반응은 37도에서 20분 반응했습니다.

안녕하세요 저는 방사선을 세포에 조사해 immunofluorescence로 gamma H2AX를 관찰하는 실험을 하고 있습니다. 이번 실험에서 세포 주기를 특정 지점에 고정시켜서 세포주기에 대한 변수를 없애고 관찰하고 싶은데 혹시 세포 생장을 특정 주기에만 머물도록 하는 방법을 아시는 분이나 관련 논문을 아시는 분이 계실까요? 사용하는 세포들은 Rat diencephalon, Rat gliosarcoma 입니다. 감사합니다.    

안녕하세요, mouse genotyping을 하려는데 PCR condition에 문제가 있는것인지 band가 이상하게 떠서 여러번 시도끝에 도움을 구하고자 글을 씁니다 ... 증폭되어야 할 서열의 길이는 WT=500bp, MT=163bp 입니다. primer 길이는 20mer 이구요, PCR condition은 다음과 같습니다. (The Jackson laboratory protocol 24678 을 참고하였습니다) 94℃/3min→[ 94℃/15sec→ 65~60℃/15sec (touch down)→ 68 ℃/30sec] x10 cycles → [ 94℃/15sec→ 60℃/15sec→ 72 ℃/30sec] x28 cycles→ 72℃/10min

10mM(1ul) + PBS(999ul) =10uM(1ml) 10uM(5ul)+PBS(5ul) =5uM(10ul) 10uM(1ul)+PBS(9ul) =1uM(10ul) 10mM용액을 10uM, 5uM, 1uM의 농도로 1ul씩 필요해서 만들어야 하는데 맞을까요?

대학교에서 일반생물학실험 수업을 듣습니다. 확산과 삼투 현상에 대해 실험을 진행하면서 셀룰로오스 튜브에 녹말용액과 포도당 용액을 넣고 물이 담긴 비커에 넣은후, 비커에 요오드 용액을 넣었습니다. 이후 녹말 용액과 요오드 용액의 반응이 일어나 튜브의 색이 청남색으로 변했고, 튜브를 비커에서 뺀 후 남은 용액에 베네딕트 용액을 넣고 가열했더니 노란색을 띄던 용액이 투명하게 변했습니다.   저는 포도당이 셀룰로오스 튜브를 통과하여 베네딕트 용액과의 반응을 일으켜 황적색이 될거라고 예상했는데 결과가 당황스럽습니다.. 베네딕트 용액과 포도당을 섞고 가열하면 포도당이 베네딕트 용액의 2가 구리이온에 전자를 주어 환원시키고 1가의 구리이온을 만들고, 이때 산화구리 침전물이 생기면서 용액의 색이 황적색으로 변한다고 알고있습니다.

안녕하세요~ 항상 유익한 답변 감사드립니다. flow cytometry 데이터에서,, 흔히 n=3~5로 실험을 합니다. ctrl과 treated군 이렇게 두 개를 비교한다고 할 때, 특정 cell population의 frequency를 dot plot으로도 나타내고, flow cytometry 데이터도 1개씩만 representative 로 싣습니다. 이 때 dot plot에서 평균값에 가까운 flow cytometry data를 싣다보면 ctrl과 treated에서 서로 다른 개체의 data를 써야하는 경우가 종종 있습니다.   서로 다른 개체의 data를 사용해도 문제 없는지 궁금합니다. 면역학 고수님들의 고견을 부탁드립니다 ㅠㅠ   미리 감사드립니다!

DNA cloning을 하기 위해서 enzyme cut이후 blunt end를 만들고 gel extraction kit의 filter tube에 넣고 washing 후 elution하였습니다. 그리고 nano-drop측정을 하였는데 loss가 너무 많이 일어나서 다시 진행하였습니다. -enzyme cut 이후에도 gel extraction kit로 DNA만 얻었습니다. -한 쪽만 blunt end를 만들기 위해 enzyme cut시 잘려나가는 부위는 없고 linear 형태가 됩니다. 이번에는 enzyme cut만 하고 이전과 같은 방법으로 DNA를 얻었는데 2ug을 사용했던 DNA의 양이 약500ng만 남게 되었습니다. 주변에 물어보니 이상이 없는 것 같은데 왜 그러냐는 소리를 듣다가 브릭에 올려봅니다. cloning에 대하여 아는 것도 많이 없고 머리 싸메다가 올립니다. 고수님들 도와주시면 감사하겠습니다.