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 카테고리: 전체 > Molecular Biology-Protein > etc.
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Q. APS powder 유통기한 지난것
SDS Gel 굳힌는 역할을 한다는 APS. APS powder 유통기한이 22.8월이네요. 가루는 현재 뭉치거나 하진 않았어요. 정상가루형태면 10% 만들어 SDS Gel 만들때 사용해도 될까요? 감사합니다.
회원작성글 BBluee  |  2022.12.28
Q. porphyrin이 생체밖에서 파괴가 잘 안되는지
  bacteria가 생성한 porphyrin이 일정 파장에서 형광발현이 되는 것으로 실험을 진행중인데 1년이 지난 시편에서도 porphyrin으로 인한 형광발현을 확인하였습니다. 다른 처리 없이 냉장보관만 하였는데도 synthesis된 prophyrin은 생체 밖에서는 파괴되지 않는 건지 궁금합니다 
회원작성글 hipp06  |  2022.12.16
Q. protein interaction 관련 질문입니다!
안녕하세요 Protein interaction과 관련한 분석법에 대해 질문이 있어 남깁니다ㅜㅜ 현재, 정제한 protein과 target protein의 binding affinity를 분석하고자 SPR 분석 조건을 찾고있는데, 조건을 찾는데 조금 시간이 필요할 것 같아  protein-protein interaction을 검증할 수 있는 다른 분석법을 함께 하고자 합니다. ITC와 pull down assay 외에도 정제한 protein을 cy3, cy5와 같은 형광 dye와 conjugation 시켜 protein interaction을 볼 수 있는 방법이 있다고 들었는데, 관련된 정보가 부족해 질문 남기게 되었습니다. Protein과 dye를 conjugation 시켜서 interaction을 확인할 수 있는지 궁금합니다. 또한 정제한 protein과 target site의 interaction, binding을 검증하기 위한 다른 실험법들이 있다면 추천해주시면 감사하겠습니다!   감사합니다!  
회원작성글 name158  |  2022.12.15
Q. 프라이머 시퀀스만 보고 뭔지 알 수 있나요?
5` cat cat cac cat cac cac ... ... ... ... ... ... ... cat cat cac cat cac cac 3`    이게 뭔지 알고 싶은데 이것만 가지고 뭔지 알수 있나요?  
회원작성글 gksdnfl  |  2022.12.13
Q. 단백질 발현시 엔자임 선택 첨부파일
프라이머 제작할때 2개 엔자임을 선택하려고 하는데 엔자임이 인설트와 벡터에 다있는 애를 골라야한다고 하더라구요. 그럼 이렇게 되있는 경우 엔자임을 어떻게 선택해야되는건가요??
회원작성글 gksdnfl  |  2022.12.13
Q. 희석 맞는지 확인 부탁드립니다ㅠㅠ
ELISA 키트를 사서 해봤는데 detect 범위가 5pg/ml~1500pg/ml이라서 키트 내에 있는 STD와 제 샘플로 calibration을 진행해봤습니다. STD는 잘 나오는데 제 샘플은 모두 blank(D.W)와 동일하게 나왔습니다. STD는 잘 나오는걸 보니까 실험 과정 중에 이상은 없는 것 같고 샘플 문제인 것 같은데 희석을 잘 했는지 확인 부탁드립니다ㅠㅠ 1mg/ml 용액   -1/100희석 (10ul +990ul DW) - 10ug/ml -1/100희석 (10ul +990ul DW) - 100ng/ml -1/100희석 (10ul +990ul DW) - 1ng/ml   이렇게 샘플을 1ng/ml로 만들어서 반씩 희석해서 calibration 용액을 제조했습니다. 희석 문제가 아니라면 제 샘플이 이 키트에 안맞는다는 것 같은데 확인 한 번만 부탁드립니다ㅠㅠ
회원작성글 hj1226  |  2022.12.13
Q. soft/hard inclusion body에 대해 궁금합니다
라이소자임과 같은 단백질이 변성된 후 리폴딩 되는 과정에서 inclusion body가 생기는 것으로 알고 있는데 여기서 inclusion body가 정확히 무엇이며 그 종류가 soft와 hard로 나뉜다고 하는데 각각은 어떠한 특징이 있으며 이 두 종류의 inclusion body를 준비하는 방법에 대해 알고 계시거나 관련 논문을 알고 계시다면 답변 부탁드립니다.
회원작성글 gogogogogo..  |  2022.12.12
Q. 히알루론산 피부 침투 관련 질문이 있습니다.
피부 최외각층인 피부각질층은 보통 500달톤 미만의 물질만이 침투된다고 알려져있습니다. 그래서 피부침투능력을 지닌 히알루론산과, 피부약효물질을 화학적으로 결합시켜 피부에 도포하는 방식으로 침투시키려 합니다. 제가 궁금한점은 이때의 피부약효물질이 500달톤 이상 약 900달톤 정도인데, 히알루론산이 피부침투능력을 가지고 있긴하지만 기본적으로 분자량이 큰 물질과 결합되었을 때 어떻게 피부속으로 끌고 내려가는지 궁금합니다.. 이론상 히알루론산과 결합되었을 때 물질을 둘러싼 히알루론산에 의해 끌려갈 수 있지만, 조금 더 생각을 해보니 피부각질층에 걸려서 히알루론산만 흡수되고 분자량이 더 큰 유효물질은 흡수되지않고 표피층에 잔류할 것 같습니다. 화학적 접합과정을 거쳤기에 각각의 분자량이 크던 작던 상관이 없는건가요 답변 해주시면 정말 감사하겠습니다 !
회원작성글 12312  |  2022.12.11
Q. 안녕하세요 % 단위를 IU/ml 로 환산하는 공식을 알고싶습니다.
응고인자 검사중에 %로 표기되는 장비가 있는데, 저희는 IU/ml를 사용합니다.   이 때 단위환산을하고 싶은데, 공식이 어떻게 되는지 잘 모르겠습니다.   도움부탁드려요.
회원작성글 Hippo90z  |  2022.12.08
Q. IHC 실험 중
IHC과정 중에서 primary Ab를 dilution 할 때 1% BSA가 들어간 PBS-T랑 해야하는데 5% BSA PBS-T와 dilution 했습니다... 이런 경험 있으신 분 있을까요..Secondary Ab도 똑같은 5%에 dilution 해서 넣어야할지 고민입니다...
회원작성글 Luminous  |  2022.12.06
Q. 단백질 정량 값 변화 첨부파일
BCA를 통해서 흡광도를 측정해 단백질 정량을 하였습니다. 같은 샘플 2개(1차에서 2개 2차에서도 2개), 동일한 양일때 조건을 다시 한건 2차 측정시 샘플을 좀 더 많이 파이펫팅으로 풀어주었습니다. 그럴경우 좀 더 흡광도 값이 높게 나와 단백질이 많이 있다고 판단 할수도 있나요? 원래 파이펫팅으로 이렇게 값이 크게 변하는지도 궁금합니다. 
회원작성글 ouoo  |  2022.12.04
Q. SDS-PAGE 끌림현상(reducing Vs non-reducing)
안녕하세요!   단백질을 SDS-PAGE로 확인하고 있고, complex 형태를 이루는 부분이 있기 때문에 reducing과 non-reducing 샘플을 항상 비교하고 있습니다. Column work을 한 후에 보고 있는데, 최근 affininty 후에 샘플에서 끌림현상이 확인되고 있습니다. 정확하게는 affinity column 후, reducing과 non-reducing 샘플을 1개의 pre-made(commercial gel) gel에 loading을 하는데, 'non-reducing' 샘플에서만 끌림 현상이 확인되고, reducing 샘플은 깨끗하게 나오고 있습니다.  혹시 어떤 원인이 있을지 궁금합니다. 답변 주신 분들게 미리 감사 인사 드립니다.
회원작성글 sein  |  2022.11.30
Q. 미토콘드리아로의 전위 관련 해석이 안됩니다ㅠ 첨부파일
제가 가지고 있는 단백질의 서열에서 미토콘드리아로의 transmit을 해주는 서열이 있는지 확인하기 위해서 구글에서 찾아진 예측 프로그램을 돌려보았습니다! 아래 사진같은 결과가 나온다면, GO-term: C: mitochondria outer membrane 을 보았을 때, outermembrane 쪽으로 가게 해주는 signal peptide가 있다고 해석해도 되는 것인가요?
회원작성글 jjnli  |  2022.11.27
Q. protein 농도 만들기
human recombinant IFN-γ와 같은 protein을 사서 실험을 하려고 할때 사진에서처럼 농도(20ng/ml, 767U/ml 등등) 이렇게 만드려면 계산을 어떻게 해서 만들어야 하나요?ㅠㅠㅠ 1mg으로 오면 이걸 1ml에 녹여서 1mg/ml로 만들고 희석하면 ng/ml로 만드는게 맞나요? 근데 U/ml은 어떻게 할지 모르겠어요...unit?정보도 안나와있고
회원작성글 개똥이야  |  2022.11.25
Q. SDS-PAGE 밴드 휘어짐
최근 한달 사이에 PAGE를 내리면 두번째 사진처럼 양 끝쪽 밴드들이 더 많이 내려가 ∩ 모양으로 결과가 나오고 있습니다. 젤 퍼센트도 같거나 비슷하고, 버퍼도 동일하고, 러닝할 때 전압과 시간도 동일합니다. 유일하게 달라진 건 샘플버퍼를 새로 만들어서 썼다는건데 혹시 샘플버퍼 때문에 이런 문제가 생길 수 있나요? 체감상 샘플버퍼 바꾼 이후로 이런 문제가 생기는 것 같긴 하네요   정상일 때. 두달전까지만 해도 전부 이런식으로 잘 내려왔어요 최근에는 다 이렇게 양 끝이 휘어서 내려오고 있습니다  
회원작성글 ckk  |  2022.11.25
Q. (그래프 있음, 질문 2개) 정량 곡선인 Standard curve 그렸을 때의 농도끼리 간격에 대한 질문이요. 첨부파일
질문 1) standard curve를 그렸을 때, 데이터가 너무 멀리 떨어져 있으면 좋지 않다고 하는데요. 그 이유를 모르겠어요. 질문 2) 예전에 R²값이 0.99 이상 되지 않았을 때, 데이터 1개를 빼서 0.99 이상으로 만들었었는데 모든 Standard 값이 다 들어간 상태로 정량해야 한다고 했었고요. 0.99 이상으로 만들기만 하면 되는 것이 아닌가요? 답변 부탁드립니다. 감사합니다.
회원작성글 아스널  |  2022.11.24
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