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 카테고리: 전체 > Buffer/Reagent
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Q. buffer 조성관련 질문합니다. (RE)
안녕하세요 초짜 생명과학인 입니다. 다름이 아니라 제가 실험 중 Buffer A: 10 mM HEPES-KOH pH 7.4, 10 mM KCl, 1.5 mM MgCl2, 5 mM Na EDTA, 5 mM Na EGTA, 250 mM sucrose 인 조성의 cell lysis buffer를 만들어야 하는 일이 생겼는데, 몰만으로는 각각의 solution의 stock을 얼마나 섞어서 total 20ml로 만들수 있는 것인지 감이 오지 않아 고수 분들의 고견을 묻기 위해 질문합니다. 이렇게 buffer의 조성이 몰로만 표기 되어 있을 때는 각각의 stock solution의 양을 어떻게 계산해서 buffer를 만들어야하는 걸까요? 방식을 알려주시면 감사하겠습니다.
회원작성글 bureokjam  |  2021.09.03
Q. buffer 조성관련 질문합니다.
안녕하세요 초짜 생명과학인 입니다. 다름이 아니라 제가 실험 중 10 mM HEPES-KOH pH 7.4, 10 mM KCl, 1.5 mM MgCl2, 5 mM Na EDTA, 5 mM Na EGTA, 250 mM sucrose 인 조성의 cell lysis buffer를 만들어야 하는 일이 생겼는데, 몰만으로는 각각 얼마나 섞어서 total 20ml로 만들수 있는 것인지 감이 오지 않아 고수 분들의 고견을 묻기 위해 질문합니다. 이렇게 몰로만 표기 되어 있을 때는 어떻게 계산해서 buffer를 만들어야하는 걸까요? 방식을 알려주시면 감사하겠습니다.  
회원작성글 bureokjam  |  2021.09.03
Q. 항균활성에 사용할 buffer 질문드립니다.
유산균이 생산하는 박테리오신의 항균활성을 확인하려고 합니다. 여러 논문에서 pH를 7.0으로 맞추거나 아니면 test plate에 pH 7.0 buffer를 첨가하던데, nisin과 같이 낮은 pH에서만 활성을 가지는 박테리오신이 있다보니 조금 활성이 감소되어도 확인 할 수 있도록 pH를 6.0정도까지만 낮추어 screening을 하려고 합니다. pH 6.0 buffer를 만들때, citric acid-sodium phosphate buffer와 potassium phosphate buffer중 아무거나 사용해도 되는지 궁금해서 질문드립니다. citric acid-sodium phosphate buffer의 경우 pH 7.6까지 커버가 되고, potassium phosphate buffer의 경우 5.8-8.0 이더라구요.. 
회원작성글 쮜  |  2021.09.02
Q. chloroform에 Tris를 녹일 수 있나요?
제가 논문들을 보던 중 chloroform-saturated 0.05 M Tris–HCl (pH 7.7) 을 봤는데 이 용액은 chloroform에 Tris를 녹여 pH7.7를 맞춰야 하는 건가요? 제가 알기로는 Tris가 chloroform에 안 녹는 걸로 아는데 잘못 알고 있나 해서요...
회원작성글 Vanguard05..  |  2021.09.01
Q. Carrier-free 와 animal-free
배지 조성물 구매할 때 carrier free를 구매할려고 하는데  홈페이지에 Carrier free라고 적힌 것도 있고 animal free라고 적힌게 있어서  두개가 동일하다고 생각하고 구매해도 괜찮을까요? 두개 차이점이 있으면 뭐가 다른 걸까요?
회원작성글 qsdfe  |  2021.08.27
Q. DNA/RNA prep시 washing 문제 ㅠㅠㅠ
안녕하세요 DNA/RNA prep을 진행하고 있는데 PCR 후 밴드가 뜨지않아 확인해보니 핵산이 뽑히지 않고 있었습니다 ㅠㅠ 스텝을 나눠서 진행한 후 나노드랍을 찍어보았는데 1.lysis buffer 처리후 elution 2. washing A 처리후 elution 3. washing B 처리후 elution 했을때 3번 결과물에서 거의 없는걸로 나와서  (1.300ng/ul대, 2.150ng/ul대, 3.- 혹은 한자리수 대) 새로운 kit를 까서 washing B에 EtOH 첨가해서 fresh한 상태로 똑같이 진행했는데도 같은 양상으로 나왔습니다.   EtOH가 문제있거나 kit 보관온도가 문제인가 싶었는데 큰 영향이 없을것 같다는 얘기를 들어서 도대체 뭐가 문제인지 고민하다가 올립니다 ㅠㅠㅠㅠ   뭐가 문제일까요?ㅠㅠㅠ  
회원작성글 Vind  |  2021.08.26
Q. 중금속(납)에 대한 질문
좋은 아침입니다^^ 질문이 있어 이렇게 글 남깁니다. 제품 품질시험 중인데 당사 생산 제품중 콜라겐을 원료로 하는 제품의 중금속시험을 대한약전 시험2법에 근거하여 진행하였습니다. 비교액에 납표준용액 (2ppm)으로 변색을 확인한 바 있는데, 제 질문은 변색된 비교액이 시간이 경과하니 변색정도가 점점 맑아져(검액과 비슷하게) 별로 차이를 확인할 수 없는데요 혹시 원인이 무엇일까요 처음해보는 시험이라 잘 모르겠지만, 시간이 경과되면 납용액이 희석(?)되어 다소 맑아질수 있는건지... 아님 납의 기준이 낮은건지... 혹시 아시는 분 계시면 답변 기다리겠습니다.
회원작성글 Daphne  |  2021.08.26
Q. total 볼륨을 알 수 있을까요??
시약 500mg를 9x로 tube 1개에 1ml씩 분주를 했습니다. 총 몇개의 tube에 분주했는지 모르겠습니다. 혹시 계산하는 방법좀 알 수 있을까요?? 개인적인 사정때문에 물어볼 곳이 없습니다ㅠ
회원작성글 세라민B  |  2021.08.25
Q. Avertin 마취제 만들려고 합니다.
일단 제가 찾은 방법은 이러한데, Avertin (20 mg/ml) (=tribromoethanol) 1. Avertin 25g에 tert-Amyl Alcohol 15.5ml을 넣어 녹여준다. 2. voretex 후 호일에 싸서 over night한다. 3. over night한 Avertin stock solution 을 0.5ml 딴 후 PBS 또는 생리식염수 39.5ml을 넣어 혼합하여 사용한다. (PBS= 인산완충생리식염수) 2.5X Avertin 마취제를 만드려면 앞서 3번에서 Avertin stock을 1.25ml 넣어 주고 PBS 39.5ml을 넣어주면 될까요?  
회원작성글 비비비비빅  |  2021.08.24
Q. 37% metaphosphoric acid 을 이용하여 5% metaphosphoric acid solution 제조
  안녕하세요!  비타민C정량실험을 하게 되었는데요, 5% 5% metaphosphoric acid solution을 만들어야 하는데 가지고 있는 고체상의 metaphosphoric acid의 순도가 37%라고 되어있어요. 500ml정도 만들고싶은데 얼만큼 넣어야할까요?
회원작성글 엘린이  |  2021.08.23
Q. buffer 계산하는 법..ㅠㅠ
안녕하세요, 신입생 초짜배기 학생입니다..ㅠㅠ 다름이 아니라 실험을 하기 위해 버퍼를 만들어야하는데 계산을 어떻게 해야할 지 모르겠어서 이렇게 질문드립니다..   1. 20mM Tris, pH8.0, 10mM KCl, 6mM MgCl2, 0.01% Triton-X100, 1mM DTT, DEPC-treated water : 10ml 2. 94% formamide, 30mM EDTA, DETC-treated water : 10ml   다음과 같은 조성으로 buffer를 만들려하는데, 염치불구하고 도와주시면 정말 감사하겠습니닷..!! 
회원작성글 크크  |  2021.08.17
Q. 휘발성 용질이 녹아 있는 용액의 희석
안녕하세요.   상온에서 기체로 존재하는 유기물질을 녹여 만든 30% 수용액, 45 wt% 수용액을 가지고 있습니다.  이를 30mg%로 희석하려고 하던 도중 의문점이 몇 가지 생겼습니다.   1. 희석하는 도중 용액 속 가스가 휘발하여 제조한 시약의 농도가 낮아지지 않을지. 농도가 낮아질 가능성이 있다면 이를 억제할 방법이 있을지. (한번에 1000배 희석보다 10배씩 희석하는 것이 목표하는 농도를 갖는 데 유리할 것 같다던가.. ) (DW를 먼저 넣은 후 일정량을 시약을 넣는 것을 통해 잠깐이나마 증기압을 낮춘다던가..)   2. 만약 10배씩 희석을 진행한다고 하였을 때 순차적으로 제조한 용액들을 voltexing 하는 과정에서 발생한 힘으로 인해 용액 속의 가스가 시약병안의 빈 공간으로 누출되어 용액의 농도가 낮아지지 않을지.   3. 30% 수용액을 w/w% 라고 판단하고 희석을 진행해도 되는지.    4. 희석하는 과정에서 용질 또는 용액을 넣은 후 목표하는 부피만큼 증류수 또는 용매를 넣어주는 것을 Volume up, Mass up, Mess up 등으로 표현하는 것을 보았는데 이 중 어떤 것이 정확한 표현인지 궁금합니다.   감사합니다.      
회원작성글 준스퀘어  |  2021.08.16
Q. 500ml LB 배지 암페니실린
계산 초보 입니다 ㅠㅠ 500ml LB 배지네 암페니실린 100mg/ml짜리 얼마나 넣는지 감이 안오네요. 친절히 설명 부탁드리면 감사 하겠습니다.
회원작성글 동물연구  |  2021.08.13
Q. 아세트산 피펫팅 시 버블 발생
안녕하세요. 실험하다 궁금증이 생겨 문의 남깁니다. 아세트산은 액체 상태에서 이합체로 존재한다고 알고 있습니다. 또, 카복실산과 메틸기가 결합한 형태인 형태라서 물에도, 헥세인에도 잘 녹는다고 알고 있습니다. 실험시에 아세트산 수용액을 피펫팅 하는데요, 이때 버블이 많이 발생해서 잘 빨려오지 않는 문제가 있습니다.  이것이 아세트산의 계면활성제적 성격 때문에 마이셀 같은 것을 형성해서 그런 건가요? 아니면 아세트산의 밀도가 물보다 높아 상대적 점도가 높아져서 그런건가요? 잘 아시는 분의 답변을 기다립니다 ㅜㅜ 궁금해요!!
회원작성글 ssdn0055  |  2021.08.13
Q. extracted RNA의 purity를 높이는 방법 없을까요?
안녕하세요 선배님들   RNA-seq 을 위해서 QIAZEN 상품을 이용해서 추출을 하였습니다   총 12개의 샘플에서 추출하였고 nanodrop을 이용하여서 순도랑 농도를 측정하였는데여 7개의 샘플은 정상인데 5개의 샘플이 purity가 좋지 못한 상황입니다 ㅜㅜ   분석해주는 회사에 샘플을 넘기면 QC에서 통과가 안될 거 같은데 다시 샘플을 만들기에는 3주의 시간이 필요하고, 데이타가 급한 상황이라 지금 뽑힌 RNA 자체에서 purity를 높일 수 있는 방법이 있는지 궁금해서 이렇게 질문 드립니다.   농도는 다들 준수하게 나온편이고 purity는 기억이 잘 안나지만 A260/A230에 이상이 있었습니다.
회원작성글 도비가공짜  |  2021.08.13
Q. cell lysis buffer 안에 들어가는 100mM의 PMSF와 200mM Na3VO4 제조법?
안녕하세요. 초보대학원생입니다.  cell lysis buffer에 들어가는 100mM PMSF(sigma #78830)와 200mM Na3VO4(sigma #S6508)를 제조하여야 하는데 제조프로토콜이 자세히 안나와있어서 여쭈어봅니다.  혹시 만들어보셨다면 제조방법을 알려주시면 감사하겠습니다!
회원작성글 버들  |  2021.08.12
Q. 소량의 시약을 용매에 용해할때 어떻게 하는게 좋을까요?
1mg의 시약을 구매하였는데요 1mg/ml 농도로 용매(유기용매가 될것같습니다)에 녹이고 싶습니다. 시약의 양이 너무 적어서 볼륨플라스크 등을 이용하기도 무리가 있을것 같습니다.   구매한 시약이 들어있는 용기에 바로 용매를 넣어 완전히 용해 시킨후 캡튜브에 옮겨 담을 생각중인데 혹시 어떤 방식으로 하는것이 가장 좋을까요?   용매를 바로 1 ml 넣으면 정확히 1mg/ml 의 농도는 아닐 것 같고.. 그렇다면 9.99ml을 넣는것이 옳을까요?  가르침을 부탁드립니다.
회원작성글 ㄷㅎㅇㅅ  |  2021.08.12
Q. RCM 질문
C. acnes 균주 키우는 것에 대해 질문있습니다.  Rainforced clostridial을 멸균돌리면 agar가 뭉친 것처럼 이물질이 떠다니던데 이유 아시는 분 계신가요? 어떻게 없앨 수 있나요?  배양이후에 centrifugation할 때 pellet으로 생겨서 너무 불편해요..
회원작성글 고민고민55  |  2021.08.11
Q. DMSO와 물은 잘 섞이는걸로 알고 있는데 덩어리가 집니다.
브릭 첫 질문이라 형식이 어색해도 양해 부탁드립니다.    m-phenylenediamine과 p-phenylenediamine을 d.w / EtOH에 녹이고 전자렌지 돌려서 carbon dots를 합성하고 이걸 PL을 재려고 다시 물에 녹여봤는데 전혀 녹지 않아서 DMSO 1ml + d.w 9ml를 하려 했습니다.    DMSO 1ml를 먼저 넣어서 어느정도 녹인 후에 d.w를 넣으니까 불투명하고 불용성의 침전이 엄청 생기더라고요. 원랜 잘 섞이는걸로 아는데.. 혹시나 해서 볼텍스로도 깨보고 초음파로도 해보았지만 물에 풀어놓은 된장같은 모양만 나왔습니다.    실험실 환경이 문제인가 해서 어차피 버린 큐벳이고 해서 DMSO만 넣어두고 퇴근했다가 다음날 아침 와서 출근해보니    이렇게 되어있더라고요.    혹시 비슷한 일을 겪으신 선배님 계시면 조언 부탁드립니다.    지금은 그냥 PL 측정을 위해 소량만 따서 물에 어떻게든 조금이라도 녹이기 위해 건조중입니다. 
회원작성글 현미르  |  2021.08.11
Q. rat plasma 채혈 시 EDTA tube K2와 K3의 차이
항응고제가 dry type으로 도포되어있는지, liquid type으로 도포되었는지 차이를 인지하고 있으나, 연구실에서 내내 K3 type을 사용했었습니다. 하지만, 이번에 거래하던 업체에서 해당 재고가 없어서 급하게 K2를 사용하고자 하는데 혹시 K2 EDTA를 사용해도 실험 진행할 때 무관할지 여쭤보고 싶습니다.
회원작성글 푸우부리  |  2021.08.10
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