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 카테고리: 전체 > Cell Biology > Cell Culture
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Q. Ficoll 거래처 소개 해주실 선생님 계신가요?
NK cell 연구 하는 사람입니다.  PBMC 작업에 필요한 Ficoll 을 계속 해외 직구로 구매해서 사용 하고 있었는데, 최근들어 배송 기간이 한달 가까이 늘어나고 있어서요.  100ml 이상 대용량 에 재고 가지고 있는 국내 업체 소개해주실 선생님 계시나 해서 글 남겨 봅니다. 혹, 관련 업체 내용을 올리는 것이 게시판 룰에 어긋나는 행위이면 withusgroup1@gmail.com  으로 업체 소개 부탁드립니다. 감사합니다.  
회원작성글 Derick  |  06.23
Q. 3D 엑소좀 질문있습니다
2D와 3D cell에서 추출한 엑소좀을 비교하는데 같은양의 cell을 seeding해도 3D에서 스페로이드를 형성못한 cell들이 있기 때문에 세포수는 차이가 있는것이 아닌가요? 논문을 보면 셀카운트하는것을 볼 수 가 없어서 이렇게 질문드려봅니다.
회원작성글 태태태  |  06.22
Q. 원심분리 후 pellet의 모양 첨부파일
미생물 초보 자입니다. Geobacillus stearothermophilus를 액체 배양 후 원심분리를 통해  그림과 같은 pellet을 얻었습니다. 사진에서 보듯이  pellet은 두 부분으로 나타나는데요.. 어느 부분이 Geobacillus stearothermophilus 인가요? 아랫 부분 작게 뭉쳐진 부분인가요? 윗 부분의 좀 크게 형성 된 부분인가요?
회원작성글 stanley  |  06.21
Q. cell culture시 sodium bicarbonate
cell culture할 때 media에 sodium bicarbonate가 있어서 CO2 incubator속에서 pH를 조절해주는데 이 때 중추적인 역할을 하는 건 bicarbonate로 알고있습니다. 그런데 그냥 bicarbonate를 쓰지 않고 sodium bicarbonate를 넣어주는 이유가 있나요? sodium이 어떤 역할을 하는 건지 궁금합니다.
회원작성글 bboyami  |  06.21
Q. collagenase 1 과 collagenase D 의 차이점?
안녕하세요   collagenase 1 과 collagenase D 의 차이점을 문의 드리고 싶어서 쓰게 되었습니다. 두 엔자임이 같은 것으로 제가 배웠는데, 맞는지 여쭤보고 싶습니다.   그리고 1,2,3,4 등등 A,B,C,D 등등 콜라게네이즈가 너무 많던데, 서로 같은 것이라고 보면 될지 여쭤보고 싶습니다. 답변 미리 감사드립니다.  
회원작성글 아나안난나  |  06.21
Q. 간접 Co-culture에 사용할 conditioned media의 protein 함량을 알 수 있나요?
이번에 처음 co-culture 실험 계획을 짜고있는 석사과정 1학기 학생입니다. A cell을 배양한 배지를 Bcell에 treat하는 방법으로 간접적인 co-culture를 하려고 하는데, A cell에서 secretion된 배지 내 cytokine들의 농도를 확인할 방법이 있는지 궁금합니다.     간단한 키워드라도 주시면 찾아보겠습니다..
회원작성글 wnsl1201  |  06.20
Q. DC2.4 세포 배양 조건 세포 상태
안녕하세요.   DC2.4라는 세포를 배양 중인데 관련된 정보가 많이 없어 질문합니다.   DC2.4 세포가 매우 작던데 원심분리는 보통 어느 조건에서 하나요?? 논문을 참고해보니 300xg에서 3~5분 진행하던데 너무 과한게 아닌가 싶어 우려됩니다.   그리고 DC2.4 세포가 adherent 한 세포도 있고 suspension 한 세포도 있는데 이 같은 경우 계대배양시 두 가지 세포 모두 사용하면되는건가요? 아니면 이 둘 중 한가지만 사용하나요?   답변해 주시면 감사합니다.  
회원작성글 뚱콩뚱콩  |  06.20
Q. 물질에 의한 어떤 오염인지 알려주실 수 있으신가요? 첨부파일
안녕하세요 현재 암세포에 물질을 처치해 apoptosis를 확인하는 실험 중인 학생입니다.  다름이 아니라 세포에 물질을 처치했는데, 다음 사진과 같은 오염이 발생했습니다.  현미경을 넘어서 육안으로 flask 안 바닥에 눈송이 처럼 오염된 것이 관찰되었는데, 어떤 오염인지 아직 찾지 못해 질문드립니다.   감사합니다. 
회원작성글 익명09  |  06.20
Q. Subculture 시 dish 개수
안녕하세요. Cell마다 차이는 있겠지만 혹시 cell stock thawing 후 subculture할 때 dish 몇 개 정도로 하시나요? 저는 하나의 stock을 받아서 3개 dish로 subculture하고, 그 후에 각 dish에 대해 2개씩 subculture해서 총 6개 dish를 만든 후, 그 중 3개를 stock로 freezing하려고 하는데 어떤지 봐주시면 감사드리겠습니다.
회원작성글 eunseuli  |  06.20
Q. Corynebacterium glutamicum CG배지
Corynebacterium Glutamicum을 culture할 때, RG배지에서 CG50배지로 변경하는 이유가 뭔가요??
회원작성글 yebbodizim  |  06.19
Q. 장기간에 걸쳐 균을 배양하면, 배양기를 사용하지 않아도 되나요?
LB 배지 말고도 다른 배지를 이용해서 실온에서 균을 배양할 수 있나요?
회원작성글 LoganH  |  06.19
Q. 약물 희석이 궁금합니다.
시그마에서 산 eugenol이란 물질을 dmso나 ethanol로 스탁해서 사용하려고 하는데 ethanol에 스탁할 경우 원하는 농도로 희석할때 media 나 pbs로 희석해서 사용하려고 합니다. 스탁을 어떤물질로 해야할지 희석은 어떤물질로 해야할 지 모르겠습니다. 또한 trail은 어떤물질로 희석해서 사용할지 모르겠습니다. 알려주세요 둘 다 통일해야하나요?
회원작성글 응가  |  06.19
Q. cell contamination 인가요... 첨부파일
cell을 키우던 중 sub culture하려고 확인차 봤는데 동글동글 cell이 안자라고 그 부분에 뭔가 있는것 같아서 사진을 찍었는데 혹시 이거 cell contamination일까요...?
회원작성글 양지라니  |  06.17
Q. cell 뭉침 원인이 뭘까요? 첨부파일
어제 subculture했고, 오늘 보니까 사진처럼 cell이 일부분 뭉쳐있어요. 어제 resuspension 충분히 했다고 생각하는데 이유가 뭘까요..?? 또 이 정도 뭉쳤다고 악영향이 있을까요?
회원작성글 eunseuli  |  06.17
Q. 대장균 배양실험
안녕하세요 일반고 다니는 고등학생입니다. 제가 생명 동아리 회장을 맡아서 당장 내일 실험을 진행하려고 하는데요. 아는 게 별로 없어서 질문 드립니다. 잘 부탁드립니다 !! 학교에서 항생물질에 따른 대장균 배양정도의 차이에 관해 실험하려 하는데요. 천연항생물질(프로폴리스 추출물, 노니 추출물 등)과 항생제 연고의 항생 효과를 페트리 필름을 이용해서 비교하려고 하는데 그 때 사용하려고 대장균 원액?을 샀거든요.   1. 이 때 대장균을 물에 희석해서 배양해야 하나요? 그렇다면 어느정도로 희석해야 하나요? 2. 천연항생물질은 액체이기 때문에 대장균 희석액과 섞어서 필름에 접종하고 항생제 연고는 패트리 필름에 미리 묻혀놓은 다음에 그 위에 대장균 희석액을 접종하려고 하는데 방법이 맞나요? 3. 학교에서 소각이 어려운데 패트리 필름과 대장균은 어떻게 처리해야 하나요? (참고로 일반고라서 기계가 많이 없어요ㅜㅜ 멸균기 등도 없습니다 ㅜㅜㅜ)
회원작성글 벽돌은영어로  |  06.17
Q. 세포 doubling time 질문
hemocytometer에 나타난 세포수가 83개이고 이를 9로 나누어 N2의 값을 9.222x10^4을 구했습니다 N1이 1x10^4 배양시간 71시간일때 71시간 동안의 늘어난 세대수의 값 3.205를 구했고 평균 성장률 상수 k값을 0.045로 구해 더블링타임을 계산 해보니 22시간이 나왔습니다. 정확하게 계산해주실 분 있으실까요??
회원작성글 샌면과학  |  06.16
Q. 3T3-L1 cell seeding할때
저희 랩실에서는 상피세포 위주로 배양을 했었습니다. 이번에 3T3-L1 세포를 처음 배양하게되었습니다. 아직 배양받은지 1주일이 갓 지나, dish에 얼마나 배양해야 몇일만에 계대를 할수 있는지 기준을 잡고있는 중입니다. 다다음주경에 mtt를 시행하려고 하는데, 48well에 분주를 하여 사용을 하려고 합니다. 논문들을 찾아보니 48well에 1*10^5 cells/well을 분주해서 2일후 분화유도하여 사용을 하였다고 하는데,,, 48well에 1*10^5 분주 후, 다음날 시료처리한다음 제조사에 따라 mtt 시약넣고 흡광도를 봐도 되나요?? 3t3-l1을 48well에 어느정도 분주해야하는지, 다음날 바로 시료처리를 해야하는지, 분화를 한 다음에 mtt를 봐야하는지 알려주세요 ㅠㅠ 
회원작성글 중복된 닉네임  |  06.16
Q. plate에서 세포 특정 모양으로 죽는 현상 첨부파일
안녕하세요  실험중에 괴이한 현상이 일어나서 질문드립니다.  raw세포로 24웰플레이트에 NO 진행하려고 상층을 딴 후에 남은 세포에 mtt시약 처리하여 세포 독성을 보려는데, mtt 처리 후 사진처럼 특정 웰에  이렇게 특정모양으로 세포가 죽는 현상이 발생하네요 cell seeding 후 분포는 80-90%로 모든 well 균일한거 확인했고 상태도 괜찮았어요 약물 처리 24시간 후에 보면 저렇게 텅 빈 곳들은 세포가 죽어 있는듯한 형태인데요.  약물 효과는 아닌거 같은것이 같은 처리 조 안에서도 절반은 괜찮고 절반은 저런 현상이 일어나네요.  그리고 플레이트를 2개 겹쳐 놓았는데 두개 다 왼쪽 웰들은 괜찮앟고 오른쪽 웰들은 저런 현상이 일어나네요 플레이트 회사를 바꿔서 해봐도 같은 현상이 일어나요. 동료가 똑같이 실험했는데 그 동료는 또 플레이트 윗쪽 두줄은 괜찮고  아래쪽은 저런 현상인데 그 친구도 동그랗거나 반달 모양으로 나타나고요 96well 에서도 저런 현상이 나타나네요. 배양기는 지난 주 다시 리셋해서 온도랑 질소 다시 설정했는데  배양기의 문제일까요. 참 이상하네요..   혹시 비슷한 경험 있으신 분 있으시면 도움 부탁드리겠습니다! 
회원작성글 떠돌아다녀요  |  06.16
Q. 세포에 물질 처리시 pre-treat 하는 이유
저는 면역 세포에 치료제 목적으로 사용 할 수 있는 물질을 찾는 screening 실험을 배우고 있습니다.    cell을 seeding 하여 치료제 예상 물질 시약을 먼저 처리하고 1시간 후에 면역세포를 활성화 시키는 물질을 처리합니다.  이때, 왜 먼저 시약을 treat하는지 알고 싶습니다.   제가 생각해본 바로는 예상 물질보다 먼저, 활성화 시키는 물질을 처리하게 되면 이미 높아진 것을 감소 시키는 것 인데, 후에 처리를 하게 되면  활성화의 억제 정도를 보기 위함 이라고 생각했습니다.   제 생각이 맞나요??   도와주세요!!
회원작성글 BIOHIII  |  06.14
Q. FBS를 heat inactivation하여 쓸경우에도 brand가 중요한가요?
  안녕하세요, immune cell 실험 관련하여서 culture를 하다보면 FBS를 heat inactivation시켜 사용하는 경우가 종종 있습니다. FBS안에 존재하는 factor들에 의해 immune cell이 stimulation되는 것을 막기 위함으로 알고 있는데요, 동시에 primary cell을 사용하는 실험에서는 gibco나 hyclone과 같은 고가의 좋은? FBS를 쓰고 있습니다. 그렇지 않으면 분화가 안된다거나.. 수율이 낮다거나 한다는 문제가 있다고 선배들에게 들었습니다. 그런데 오늘 inactivation을 하다 궁금증이 든 것인데, 어짜피 inactivation을 시켜서 혈청안의 factor를 다 killing하는 것이면 어느 브랜드의 FBS를 사다 써도 비슷비슷 하지 않을까 하는 생각이 들었습니다. 이 부분관해서 다른 분들은 어떻게 생각하시는지 궁금하여 여쭤봅니다.  
회원작성글 아이이이잉  |  06.14
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