질소탱크에 질소 잔량 체크할때 보통 inch로 측정하나요? 피딩 날짜는 무얼 말하는 건지 알 수 있을까요? 감사합니다. 

Urine sample을 받아 Urine cell로 만들어 stock 해둔 cell을 thawing 하여 실험을 진행하려합니다.   thawing을 하고난 후 다음날에는 cell이 많이 불어서 정상적으로 잘 자라서 media change만 해주고 다음날 확인했더니 contam이 되어 다 죽어있더라구요.   incubator에는 urine cell과 fibroblast cell 동시에 키우는데 fibroblast cell은 건강하게 아무문제없이 잘 자라는데 urine cell에서만 공통적으로 contam이 확인이 됩니다. 지난번에 thawing을 했던 동일한 cell stock에서는 이러한 문제가 없었는데... 도데체 뭐가 문제일까요? 안전하게 incubator를 Auto돌려서 멸균을 다시 하고 진행하는게 답일까요?ㅠ 여러 문헌을 찾아보니 Urine cell이 baterial contam이 잘 일어난다고는 하는데, 이전에는 문제없던 stock이 최근들어 반복적으로 이런 현상이 나타나네요 ㅠㅠ   도와주세요 ㅠ

기초적인 질문이 될 수도 있지만, 분화 후의 IPS세포는 원래 증식능이 별로 없나요?   대부분의 판매되는 IPS유래 분화세포는 계대가 안된다고 적혀있는게 많은 것 같은데, 알려주시면 감사하겠습니다.

항산화물질 관련 실험을 하고 있는 고등학생입니다. 리그닌의 항산화능 관련 연구를 하고 싶은데 제가 가지고 있는 가루제형의 리그닌으로는 dpph실험의 시료로 사용 불가능하다는 것을 알게 되었습니다.(용액형태의 시료만 가능하기에) 리그닌을 메탄올이나 에탄올에 희석시켜 시료로 사용해도 될까요? 또한 가루제형의 시료를 사용하여 항산화능을 확인할 수 있는 방법은 없을까요?

최근에 AAS 배우기 시작한 뉴비인데, 오늘 K를 측정하는데 흡광도값이 마이너스가 나옵니다.  다른 원소들은 다 +값으로 나오는데 칼륨만 마이너스로 나오는 이유가 있을까요? 

안녕하세요ㅠㅠ 화학이 전공은 아니지만 앞으로 배워야하는 많이 많이 모자란 학생입니다.. HPLC를 측정해야하는데 버퍼를 만들어야합니다.   제가 가지고 있는 Ammonium formate(고체)를 가지고 버퍼를 만드려고 합니다,, 1L짜리 50mM ammonium formate 버퍼를 만들어야 하고, pH는 4.4로 만들어야합니다.  50mM을 만들기 위해서 분자량이 63.06g/mol인  ammonium formate를 1L증류수에 3.153g을 넣으면 된다고 계산하였는데, pH를 4.4로 만들어야 하기 때문에 pH를 4.4로 만들 수 있도록 몇 g , mL씩 넣어야하는지 다시 계산해야 할 것 같은데, 여기부터 막막합니다..   현재 가지고 있는 ammonium formate의 pH는 5.5~ 7.5로, 약 6.5로 계산하려고 합니다ㅠㅠ 헨더슨 하셀바흐식을 가지고 계산하라고 하셨는데, 영상을 아무리 찾아서 공부해봐도 도저히 모르겠더라구요,, 몇 가지 질문하고 싶습니다. 0. pH가 6.5인 것과 물(pH 7)과 섞어서 pH 4.4가 되도록 할 수 있나요?   1. 반응식은 HCOONH4 + H2O --> HCOOH + NH4OH 맞나요?   2. 헨더슨 하셀바흐식을 이용하려면 산과 염기를 찾아야 하는데 HCOOH도 산이고, NH4+와 OH-에도 산 염기가 있는데, 이중 무엇으로 계산해야하는지,,   3. 50mM ammonium formate in water pH=4.4라고 되어있는데, 4.4 짜리 증류수에 50mM ammonium formate를 만들라는 건지, ammonium formate 수용액을 pH 4.4 가 되도록 하라는 건지 부터 말씀해 주시면 감사할 것 같습니다..ㅇ   4. 계산하는 방법등을 알려주시면 감사하겠지만 이거는 안해주셔도 괜찮습니다..!   한번에 너무 기초적이면서도 많은 것을 물어서 죄송합니다..ㅇ 알려주실 수 있으시면 알려주세요,, 감사합니다!! 이중에 아는것만이라도 답해주시면 정말정말 감사합니다ㅠㅠ..

prism program을 이용하여 survival 그래프를 그리고 있는데요. 50%에서 끝나는데, y축 값 0 까지 line을 어떻게 만드는지 아시는분 계신가요? 이것저것 눌러봐도 잘 안되서 올리게 되었습니다. ex. 파란선 그룹은 28일에 모두 죽었으니까 20과 40 사이에 파란색 라인이 생겼으면 합니다. 통계프로그램이라서 그런지 단순하게 data  부분에 0을 추가하면 제가 원하는 그래프를 못얻더라구요.ㅠ   이 프로그램을 조금이라도 아시는 분들은 답변 해주시면 정말 많은 도움이 될 것 같습니다. 미리 감사합니다!   아래 그래프 처럼 하고싶습니다 .

western blot 과정중 항상 transfer한 후 겔을 coomassie에 넣어 transfer이 잘 되었는지 확인을 하는데요. transfer는 transfer buffer을 가득넣어주고 100V, 0.4A, 1시간30분동안 하면서 통주변에 얼음으로 감싸고 20~30분마다 ice pack도 갈아주고 최대한 안따뜻해지게 해주면서 하는데요.   transfer후에 겔을 확인하면 55kDa 정도 위로는 단백질이 남아있습니다. 다행이 저희가 확인하고자하는 단백질은 30~40kDa이지만 완벽하게 transfer가 되지 않는것에 의문이 되는데요. 매번할때마다 이러니 답답합니다. 최대한 nitro cellulose 덮고 whitepaper두장덮고 기포를 빼주기위해서 스크래퍼로 살살 누르고 최대한 밀착되게 마지막에 black, clear plastic으로 꽉 잡아서 transfer을 해줍니다. 머가 문제일까요?ㅜㅜ 도와주세요.

애기장대에 두개의 미세플라스틱을 각각 흡착시킨 시료를 CLSM으로 보려고합니다. 미세플라스틱 형광 파장대는 다음과 같습니다. APS  ex 475nm  em 540 nm CPS  ex 470nm  em 505 nm CPS는 Alexa488이나 FITC로 보면 될거같은데 APS는 어떤 dye로 설정해놓고 봐야할까요,,

안녕하세요. Western blot 실험에서 apoptosis 억제 관련 인자인 caspase를 확인하려고 하는데 35kDa에서 full length caspase-3는 잘 확인이 되는데 17kDa에서 cleaved caspase-3가 안뜹니다. 혹 이유를 아시는 분들 계실까요? 해당 antibody로 실험을 해보셨거나 하고 계신 분들 있으시면 조언 부탁드립니다. 일단 저는 cell signalling(#9662) 이 제품을 사용하고 있고, western 실험 조건은 10% gel에서 일반적인 로딩, wet 트렌스퍼 조건 따르고 있습니다.   +) 덧붙여, 혹 cleaved 형태는 발현되지 않고 caspase-3만 발현되면 apotosis를 억제한다고 보기는 힘든거겠죠? cleaved된 형태 없이 caspase-3 단독으로만 결과를 제시한 논문은 못본듯하여 질문드립니다. 

안녕하세요. 현재 석사과정중인 학생입니다. 현재 진행하고 있는 연구가 새싹삼(새싹인삼)과 β-glucosidase 활성이 있는 유산균을 발효시켰을 때 고분자 진세노사이드에서 저분자 진세노사이드로 전환되는지를 확인하고 있습니다. 유산균의 β-glucosidase활성은 Esculin법으로 배지의 색 변화를 확인하였고, 조효소제를 제조하여 Ginsenoside Rb1의 전환을 확인하려고 하는데 조효소제 제조법에서 막히고 있습니다.. 여러 논문을 찾아보아도 대부분 비슷하게 서술되어 있어 막막합니다. 혹시 작은 도움이라도 주실 수 있으신 분 계시면 아주 작은 도움이라도 부탁드립니다. 감사합니다. 

안녕하세요, LC-MS로부터 나온 데이터를 살펴보다가 궁금한 점이 생겨서 글을 남기게 되었습니다. 개념적인 질문이라 카테고리를 고민하다가 실험쪽에 올렸는데 혹시 맞지 않다면 말씀해주시기 바랍니다! 분석화학쪽을 전공한 게 아니라서 논문이랑 유튜브 보면서 공부하고 있는데, 아래에 있는 이미지에서 헷갈리는 부분이 있습니다. ( https://en.wikipedia.org/wiki/Liquid_chromatography%E2%80%93mass_spectrometry)   1. 분자(t1~t4)마다 esi를 통해 이온화되어 intensity ~ m/z spectra (빨노초파) spectra를 생성하는 것으로 이해했는데, 일반적으로 'relative' intensity로 y축을 표현하면 모든 최고점 peak은 같은 높이(100)로 보이는게 맞나요? 위키에 있는 이 이미지는 상대적인 값이 아니라서 분자마다 제일 높은 peak이 다른 것이라고 이해하면 될까요? (정확히 말하자면 t1~t4는 peak이 찍힌 retention time t1~t4라고 이해했는데 편의상 분자라고 칭했습니다. 혹시 틀렸다면 정정해주심 감사하겠습니다!) 2. 빨노초파 m/z spectra가 합쳐져서 왼쪽 단면에 있는 보라색 peak으로 합쳐지는 건가요? 아니면 LC에서 보라색 픽들을 확인한 다음에 이들을 빨노초파로 분석해서 무슨 분자인지 체크하는 건가요? 3. 위의 질문에서 이어지는 질문인 거 같습니다만.. ToF 방법이 pump에 의해 column에서 분자가 날아오는 시간(retention time)을 측정하는 것으로 알고 있는데요, intensity가 detector에 분자가 부딪힌 강도?라고 하면 그게 무엇을 의미하는 지 잘 모르겠습니다.. 물질의 농도가 peak 'area' 면적이면 무거운 분자일수록 묵직하게 부딪히니 peak이 높게 찍히는 건가요?  4. 저는 m/z spectra에서 가장 큰 m/z를 가지는 peak이 해당 분자고 이온화된 파편(왼쪽 peaks)로 구조를 파악한다고 생각했는데, 아래 에탄올 예시에서 47로 찍힌 건 왜 그런건가요? 동위원소?같은 건가요?   긴 글 읽어주셔서 감사합니다!

항산화 실험으로 sod유사활성능을 보는데 대조군으로 ascorbic acid를 사용하고 있거든요. 그런데 1mg/ml 에서 50% 밖에 효과가 안나오네요. 보통 이농도에서는 100%에 달하게 나와야 하는걸로 아는데요.. 차광도 확실하게 했고, 증류수에 녹여둔지 3~4시간 정도 지난걸로 진행하기는 했는데.. 이정도 시간이 항산화능에 영향을 줄수도 있나요?

저희 실험실에선 부착형 암세포를 주로 키우고 있습니다. 그러다가 이번에 새로 HeLa cell을 좋은 곳에서 받아왔습니다. 잘 가져와서 바로 풀었는데 이틀이 지나도 cell이 잘 붙지 않습니다... media는 DMEM high glucose에 10% FBS, 1% P/S를 쓰고 있습니다. 질소에 얼려있던 것을 녹인건데 너무 많이 안 붙어서... 두개를 받아와 하나는 아예 안 붙어 다 버리고 마지막입니다ㅜㅜ 혹시 media가 안 맞는 것일까요? 다뤄보신 분의 조언이 필요합니다..

안녕하세요. 세포실험은 초짜인 대학원생입니다. 저는 mammalian cell에 bacteria를 처리한 후 약물처리를 해서, bacteria가 줄어드는 양상을 현미경으로 관찰하는 실험을 하고 싶습니다만... 저희 연구실에서 아무도 해본 적이 없고 저도 처음이라서 막막하여 글을 남깁니다. 1. 항체는 꼭 2차까지 처리를 해야하나요? 만약 Mammalian cell의 세포질을 타겟하는 형광이 붙은 antibody와 bacteira를 타겟하고 형광이 붙은 antibody가 존재한다면 그 두 개를 동시에 처리하고 바로 형광 현미경을 보아도 될까요?? 2. 찾아보니 Mounting용액에 DAPI가 섞인 제품도 있던데 ... mounting?? 봉입체?? 를 꼭 해주어야하는건가요? 그리고 mounting 용액에 DAPI가 들어간 것은 DAPI가 핵을 염색시키면 그 후에 추가 wash과정 없이 현미경을 보는 건가요? ㅠㅠ 초보라 질문이 많고 기본적인것일수도 있지만 아시는 분은 상세한 답변 부탁드리겠습니다.

   CB에서 CD3를 아웃시켜주었습니다 분화 6일차에 CD56 값은 증가하였는데 웬 CD3가 생겨났어요 ㅠㅠ.. 실험 고찰을 적어야하는데 왜인지 감이 안잡힙니다 도와주세요 ㅠ.ㅠ