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웹진 Vol.24, No.10 (2022년 10월) 발간
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 카테고리: 전체 > Chemical biology > Extraction/Concentration
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질문/투표/프로토콜 등록
Q. TEA제거가 잘 안됩니다. 첨부파일
BODIPY를 만들기 위해 TEA와 BF3.OET2를 넣는데요. 아무리 extracted해도 proton NMR에서 TEA 피크가 계속 나오는데 어떻게 제거를 해야할까요..??
회원작성글 웅갱  |  2021.02.17
Q. dialysis
dialysis를 해본적이 없는 초보가 질문드립니다.. 지속 방출형 제제에 대한 day-dependent한 방출량 측정을 위해 dialysis 실험을 설계하고자 합니다.   1. dialysis tube에 제제 1mL을 넣고 방출배지(PBS) 100mL이 담긴 병에 넣습니다. 2. magnetic stirrer로 37 ºC, 180 rpm으로 교반합니다. 3. 일정 시간이 지난 후 sample(방출배지)을 정해진 시간마다 채취합니다. 4. HPLC를 이용해 분석합니다. 5. 나온 data(농도)를 기반으로 희석배율을 감안해서 실제 방출된 농도(tube 내부)를 구합니다.   이런 식으로 설계를 하였는데 저 방법이 맞나요? 그리고 최초 평형을 맞추려면 최소 어느정도의 시간이 지나야 할까요? dialysis tube를 PBS에 2주정도 계속 담궈둬도 문제는 없나요?
회원작성글 Arkadis  |  2021.02.09
Q. 천연물 추출물 수거 방법
추출물의 활성을 보기위해서 용매추출 후 감압농축, 동결 건조 후 긁어서 파우더 상태로 만들고 있는데요... 시료 수가 많아져서 긁는 작업이 너무 힘들어서 그런데.....혹시 쉽게 할 수 있는 방법이나 다른 방법이 없을까요? 현재는 evaporator volume flask 벽면에 농축된 시료를 긁어 낸 후 막자사발로 분쇄하여 사용하고있습니다. 작은 바이알에 농축 후 전량 stock 용매에 녹여서 활성을 볼까도 생각했는데....녹일 용매가 정해져 있는 상황이 아니고 녹는 용매를 찾아야 하고, DMSO에 녹여야 할 경우도 많아서요.....회수 문제 때문에요.... 될수 있음 파우더 상태로 만들고 싶습니다. 조언 부탁드립니다. 감사합니다.
회원작성글 soeunmi81  |  2021.02.08
Q. 고등학생 피코시아닌 농축하고 싶은데 동결건조기가 없어요..
고등학생입니다. 효소를 이용해서 스피룰리나에서 피코시아닌을 추출하는 실험을 하고 있습니다. 스피룰리나를 0.05M citrate buffer에 녹이고 가수분해 효소를 넣고 효소 불활성화한 다음에 원심분리해서 상등액을 회수했습니다. 원래는 이걸 동결건조시키고 싶은데.. 학교에 동결건조기가 없어요.. 그렇다고 가열건조하면 피코시아닌 변성될까봐 그것도 못하겠고.. 동결건조기가 없는데 농축할 방법 없을까요?
회원작성글 skylark  |  2021.02.08
Q. Column Chromatography로 색소를 분리하려고 합니다. 시약 구매에 궁금한 것이 있습니다.
column에 silica gel을 충진재로 하여 천연물에서 색소를 뽑아내 이동상을 보려고 합니다. 하고자 하는 것이 결과를 보는 실험이 아니라 중간 과정을 관찰하는 것인지라 관련 정보를 얻기가 좀 난해해서 질문을 드립니다. 1.천연물에서 색소를 추출하는 과정에서 사용할 용매를 acetone, ethanol, methanol, hexane 등을 준비하려고 합니다. 천연물이 어떤 것이든 될 수 있어 가능한 한 많은 경우를 커버할 수 있게 준비해 두고 싶은데 혹시 더 필요할만한 것이 있을지 궁금합니다. 현재는 과일, 꽃, 곤충에서의 추출을 생각하고 있습니다.   2.silica gel과 sea sand를 구매하려고 찾아보니 mesh size가 있어 어떤 것을 선택해야 할지 조언을 듣고 싶습니다. 결과를 보는 실험에서 silica gel의 경우 230~400 mesh를 사용한다고 구글에서 알려주는데 저와 같은 경우에도 이런 높은 mesh값을 사용해야 할지 혹은 더 낮은 등급을 사용해도 무방할지 궁금합니다.  sea sand도 같은 맥락으로 10에서 50까지의 mesh가 있는데 어느 정도 사이즈가 적절할지 궁금합니다 이건 구글링을 해도 잘 안 나오는 정보라 혹시 상관이 없는건지도 궁금합니다.   고수님들의 답변 기다리겠습니다 감사합니다!
회원작성글 강짜이  |  2021.02.06
Q. 동결건조물의 상태가 끈적일때
보통 추출을 하고 나서 동결건조를 할 경우 가루 형태처럼 나타나서 분말이라고 표현을 하는데 동결건조 후 물질이 끈적끈적한 물질로 남아 있으면 뭐라고 표현해야되는건가요? 그리고 같은 시료인데 추출 방법에 따라서 동결건조 후 상태가 이렇게 달라질수 있나요?
회원작성글 wodls  |  2021.01.21
Q. tyrosinase inhibition activity 실험관련 질문입니다.
안녕하십니까, 이공계 선배님들 대학에서 미생물학을 전공하고있는 석사과정 대학원생입니다. 저는 현재 bacteria를 이용한 tyrosinase inhibition activity 실험을 진행하고있습니다. 이러한 실험진행은 처음인지라 궁금한 것이 많아 글을 쓰게 되었습니다. 제가 현재 진행하고 있는 실험은 이렇습니다.   식약처에 나와있는 실험방법데로 sodium phosphate buffer(pH6.5) 220ul sample 20ul  tyrosinase(2000unit) 20ul 1.5mM tyrosine 40ul  이 순서데로 96well plate에 분주하여 37도 배양기에 15,45분간 배양한 후  microplate reader 492nm에서 흡광도를 측정하고 있습니다. (15분 배양하고 측정 후, 다시 37도 배양기에 넣고 30분 더 배양해서 45분 배양 흡광도 측정)   저해율 계산방법은  A : buffer, sample, tyrosinase, tyrosine 다 넣음 B : buffer, sample, tyrosine (tyrosinase는 buffer로 대체) C : buffer, tyrosinase, tyrosine (대조군), (sample은 buffer로 대체) D : buffer, tyrosine (sample과 tyrosinase는 buffer로 대체)   저해율 계산 : 100 - [(A-B)/(C-D) X 100]   15분을 배양하고 흡광도를 측정했을 때 대조군(C값)의 흡광도는 3반복 기준 평균 0.321 정도로 도출됩니다. 45분을 배양하고 흡광도를 측정했을 때 대조군(C값)의 흡광도는 3반복 기준 평균 0.510 정도로 도출됩니다.   이렇기 때문에 저해율을 계산하였을 때 15분 배양과 45분 배양의 저해율 값이 다르게 나옵니다. 여기서 !!! 대조군(C값)의 흡광도 값이 몇 정도 될 때 (0.3정도에서 계산하여야하는지? 또는 0.5정도에서 계산하여야하는지)  저해율을 계산하여야 하는지 알려주세요..   아 그리고 tyrosine은 냉장보관, tyrosinase는 버퍼로 녹여서 여러개의 튜브로 소분한 후 냉동보관하였다가 실험시에 녹여서 사용하고 있습니다. tyrosinase는 냉동보관하였다가 녹여서 사용해도 문제가 되지 않나요?   도와주세요..
회원작성글 재재  |  2021.01.14
Q. 신약개발과 환경에따른 약물에 작용
안녕하세요 생물학과 의학에 관심이 많은 고등학생입니다. 항생제나 약물이 외부환경에서는 효과를 발휘하지만 체내의 환경에서는 효과가 없다는 것과 실제로 이 때문에 임상에서 실패한다고 알고는 있었는데요, 혹시 이러한 과학적인 원리가 있을까요? 화학, 생물학적으로 구체적으로 알고 싶습니다.  
회원작성글 의학  |  2021.01.05
Q. Temozolomide(TMZ) 농도에 관하여 질문 드립니다.
Temozolomide를 사용하는 실험을 진행하여야 하는데  100mM 이상으로는 stock을 만들기 힘들어서 질문 드립니다. 현재 저희 랩에서는 DMSO에 200mM stock을 만들어 사용하는데 혹시 그 이상 stock을 더 높은 농도로 만드는 방법을 알 수 있을까요?? 500mM 이나 1M stock을 만들고 싶습니다..
회원작성글 스템셀  |  2021.01.04
Q. 자몽에서 후라노쿠마린을 추출하고 싶어요.
전 고등학교 재학 중이고 1학년입니다. 내년에 2학년 올라가는데 겨울방학에 실험을 해보려고요. 제가 Escitalopram이라고 우울증 치료제ssri를 복용하고 있는데요. 다른게 아니고 그냥 강박사고가 있어서 아빠 약국가서 가져와서 좀 먹어보고 있는데 자몽의 후라노쿠마린Furanocoumarin이 Escitalopram의 약물대사 효소 사이토크롬를 억제한다고 해서 약 먹을 때 그냥 자몽사서 같이 먹어봤는데 효과가 있더라고요. 근데 자꾸 같이 먹으니까 좀 줄어들어서 아예 추출을 해보고 싶은데 어떻게 해야되나요? 장비는 고등학교 화학실 장비고요. 화학쌤이 약품같은거 구입해줄 수도 있어요. 전 그냥 화학1 까지 밖에 모르는 고등학생이라서 하나도 모르니 답변좀 해주세요.
회원작성글 김영재  |  2020.12.26
Q. bradford assay의 실험결과
실험 레포트를 써야하는데 Bradfod assay의 원래 실험결과가 어떻게 나와야하는지 아무리 찾아봐도 알수없어서 질문드려요. 단백질 농도가 높을수록 흡광도가 높게 나타나야하는것이 맞나요? 그리고  1.전체 단백질 1ml 2.Salting out 후 30% 회수가 되지 않고 남은 샘플 단백질 1ml 3.Salting out으로 얻은 70% 단백질 1ml 4. dialysis를 통해 회수한 pellet 1ml 5.dialysis를 통해 회수한 최종 정제 다낵질 상등액  중에서 단백질 농도가 높은순서가  1-3-5-4-2 맞나요?
회원작성글 알토  |  2020.12.10
Q. 카페인 추출 실험
카페인 추출 실험을 이용해서 카페인 분해효소의 능력을 알아보려고 해요. 카페인 분해효소인 사이토크롬p 450 효소가 포함된 주변에서 쉽게 구할수있는 물질이 있을까요??
회원작성글 신선한귤  |  2020.11.30
Q. 펙틴 추출 및 확인 실험
안녕하세요? 첫 실험으로 물의 온도에 따른 양배추의 연도를 주제로 실험하게 됐습니다. 양배추를 물에 넣고 끓였을 때 세포벽의 주요성분인 펙틴이 얼마나 물 속에 있는지 확인함으로써 세포벽 파괴의 정도를 알아보려고 합니다. 자료들을 검색해보았지만 제 검색실력으로는 정확한 확인, 추출 절차를 찾기 어려워 이렇게 전문가님들의 도움을 구하게 되었습니다. 실험에 필요한 준비물, 실험 순서와 관련된 자료를 알고 계시거나 방법을 아시는 분은 귀한 시간 내시어 답변 달아드리면 정말 감사하겠습니다. 꼭 실험에 대한 게 아니더라도 제 주제와 실험이 잘 맞는지 등 다양한 조언 주시면 기쁜 마음으로 참고하겠습니다. 행복한 하루 되십시오.
회원작성글 과___학  |  2020.11.27
Q. 조지방 추출 실험시 에테르 농축방법
조지방 추출 실험에서 속실렛으로 에테르를 모은 뒤 전감압 농축기를 사용하여 에테르를 증발시켰었는데 농축기가 제대로 작동을 하지않아 다른 방법을 모색하고 있습니다.  식품공전상에서 수욕중에서 에테르를 증발시킨다고 되어있던데  그것은 waterbath를 이용하여 증발을 시켜도 된다는 의미인가요?? 가능하다면 온도를 어느정도로 설정해야되며 주의할 점이 있을까요?? 그리고 속실렛 장치에서 둥근 플라스크 수기에서 지방관과 냉각관을 분리시키고 히팅맨틀에 둥근플라스크만 남겨둔 상태에서 맨틀의 온도를 올려 에테르를 증발시키더라도 농축기를 이용하는 것과 큰 차이가 없을 까요??          
회원작성글 drake  |  2020.11.15
Q. SDS-PAGE중 staining solution 데우는 이유?
SDS-PAGE에서 staining을 진행할 때  staining solution을 dye oven에서 데워서 사용하면 빠르게 염색되는데 그 이유가 solution이 가열되면서 분자운동이 빨라지면서 단백질에 dye가 빠르게 결합되어서 그런게 맞을까요?  아니라면 데우면 빠르게 염색되는 이유가 뭘까요?!
회원작성글 Rene르네  |  2020.11.12
Q. elastase 용량 계산법
안녕하세요 이번에 elastase를 이용해 연구를 준비중인 초보 연구원입니다. 저희가 레퍼런스를 찾던중 elastase 100U을 이용했다고 용량만 나와있어서 약물용량에 대한 무지로인해 문의드립니다.   시그마사 elastase pancreatic type I >= 4.0 units/mg protein 12mg protein/ml (biuret) ; 5 units/mg protein, 0.8ml   라고 적혀있습니다. 저의 짧은 생각으로는 1mg당 5unit이 들어있으니 100u을 사용하려면 20mg을 저 병에서 뽑아 사용하면 되는건가요?
회원작성글 뉴로연구원  |  2020.11.05
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