안녕하세요,  cell stock할 때 보통 cryo tank에 넣어서 -80에 하루정도 보관했다가 질소탱크로 옮깁니다. 제가 일하는 곳을 옮겨서 현재 cell cryo tank를 찾지를 못해서 그냥 일반 종이박스에다가 cell을 -80에 보관하였는데 괜찮을까요? 아니면 지금 바로 질소탱크로 옮길까요? 조언 부탁드립니다. ..

10 uM 시료를 1 uM로 10배 희석하기 위해 10 mM 시료에서 1 ul를 따서 media 9 ul과 희석하였습니다.  여기서 5 ul를 따게 되면 농도는 5 uM가 아니라 1 uM 그대로 인가요? 

선배님들, PBMC 구매하여 IL2 activation하여 cancer cell에 대한 cytotoxicity 실험을 진행하고자 합니다. ZENBIO사 또는 ,LONZA에서 판매를 하고 있는 것을 확인하여  구매하려고 하는데, 아래와 같이 종류도 너무 많고 세포수도 선택을 해야해서 어렵더라구요.... 혹시 PBMC는 doubling이 안되나요? 적은 수의 세포를 구매해서 뿔리는게 가능하지 않아서 저렇게 세포 수별로 판매를 하는것인지도 궁금합니다 ㅠㅠ 선택에 참고가 될 수 있는 선배님들이 아시는 PBMC에 대한 정보를 얻을 수 있을까요? 사용해보신 경험이나... 의견들이 궁금합니다!

Western blot blocking할 때 skim milk를 쓰고, 부족해서 똑같은 비율로 타서 마저 antibody타서 진행하려고 하는데 그래도 괜찮나요? 같은 비율인데 또 만들었다고 해서 실험결과가 달라지거나 그러진 않죠?

Chaperone Competent Cell BL21 Series 구입하였는데 이걸 배양해서 셀 스탁을 만들라고 하셨는데 도저히 인터넷에 찾아봐도 세부적인 프로토콜이 나오지않습니다.... 도와주세요

2000K/ml이 10K/well, 100K/1000ul가 되서 20배가 된다. 그래서 media 19ml, cell 1ml을 넣는다. 고 하는데 왜 20배에서 media 19ml, cell 1ml이 되나요? 그리고 20배가 나온 이유는 100K에 20곱하면 2000K가 되기 때문인가요?

실험할때 sample이 낙다운시켰다고 하는 sample들이 있잖아요. 낙다운시켰다는 의미가 뭐예요?

loading기준이 30ug이면 몇ul씩 내리면 되는지 계산법을 잘 모르겠어요ㅜㅜ  

안녕하세요 선배님들에게 제 실험에 대해 자문을 받고 싶습니다 :) 제가 P-glycoprotein인 막단백질을 추출하기 위해 HeLa Cell을 RIPA buffer를 통해 Lysis하였습니다. 이후 HPLC로 분석을 진행하려고 하는데, 이때 Buffer를  RIPA buffer로 샘플을 그대로 분석이 잘 될까요?   추후에 LC/MS도 분석할 계획이기 때문에 Amcion으로 농축 후, 3차 증류수로 용매를 바꿔주려고 하는데, 이 또한 제가 원하는 물질을 분석하는데 기계나, 분석하는데 문제가 없을까요? 도움 부탁드립니다 ㅠㅠ

학교과제로 대사성질환 조사좀 해야되는데 담낭염 조사해도 될려나요?

293T Cell을 배양하고 MTS 시약을 넣으면 원래 보라색으로 반응이 일어나야하는 거 아닌가요? 왜 갈색으로 나오는지 궁금합니다.

HepG2 in vitro 3D culture 논문을 읽고 있는데..   albumin과 urea secretion이 시간이 지날수록 감소하더라고요? 제 검색으로는 그 이유를 찾아볼 수가 없어서.. 혹시 알고있는분 계시면 답변 부탁드립니다!!

target으로부터 exosome을 분리하는 제품이라고 들었습니다만 제 생각에는 엑소좀 침전법인 것 같습니다만... 혹시 어떤 원리로 분리하는지 혹시 아시나요?ㅠㅠ 구체적이면 좋지만 구체적이지 않아도 좋습니다!

안녕하세요, 요즘 invsaion assay실험을 하고있는 석사생입니다. 다름이 아니라 invasion assay중 cell fixing 과정에 있어 궁금한점이 있어 이렇게 작성해 보았습니다.  대부분 fix 을 10% formaldehyde로 하는데 ,            저는 4% paraformaldehyde을 사용해서 진행해 보았습니다. 처음에는 잘되었는데 웰안쪽을 딱을때 남아있는 cell이 없을 정도로 깨끗해져서 fix과정에서 well 안쪽까지 다 채워야 하는지 영향이 있는지 궁금합니다.  invasion assay 실험을 많이 하시고 좋은 팁 있으면 알려주시면 감사하겠습니다.

안녕하세요~ ^^   qPCR 결과 해석 관련 질문이 있어 여쭤봅니다.   제가 실험을 아래와 같이 진행하였습니다.   실험1) Bone marrow derived macrophage(BMDM) cell 에 특정 미생물(사균)을 처리한 뒤, (cell: bacteria = 1:200 비율) 4시간 후 cell의 RNA를 extraction 하여 TNF-a, IL-6, IL-12에 대한 qPCR 진행 실험2) 위 실험에서 BMDM을 Raw 264.7 cell로 바꿔서 그대로 진행   두 실험 결과 동일하게, 대조군(PBS 처리 그룹)에 비해 실험군(미생물 처리 그룹)에서 RNA 발현량이 심하게 높게 나왔습니다(TNFa: 약 100배, IL-6: 약 1000배 가량)   이렇게 RNA 발현량이 크게 차이가 날 수 있는걸까요?   아니면 실험에서 잘못된 부분이 있는걸까요?   Housekeeping gene 보정은 GAPDH로 진행하여 2^(-ddCt) 값으로 비교하였습니다.   읽어주셔서 감사합니다.  

cell harvest 후 Mycoplasma test 를 진행했는데요 Band 가 뜨지 않아요 ㅠㅠ 계속 해봐도 안되네요 뭐가 잘못된 건지 모르겠어요.. 몇일 전에 했을때는 ladder 도 떴고 잘 떴는데 갑자기  ladder 도 뜨지 않고 band 가 아무것도 뜨지 않습니다.ㅠㅠ   순서가 Positive negative cell Ladder 입니다. 1.5% agarose gel 을 사용했고 25분정도 내렸습니다.