[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보 회원가입   로그인
BRIC홈 실험
국립해양생물자원관
배너광고안내
이전
다음
스폰서배너광고 안내  배너1 배너2 배너3 배너4
BioLab 최수진 교수
전체보기 안전점검 LABox
 카테고리: 전체 > Cell Biology > Cell Cycle
Mol. Biol.-DNA Mol. Biol.-RNA Mol. Biol.-Protein Immunology
Cell Biology Microbiology Plant Biology Laboratory Animals
Omics Chemical biology Bioinformatics Laboratory Equipments
Buffer/Reagent Bioethics Etc.
카테고리 전체보기펼치기
질문/투표/프로토콜 등록
프로토콜 Flow Cytometry (Cell cycle) 첨부파일
유세포분석을 통한 세포 주기 분석 개요 및 방법입니다.참고 서적http://book.interpark.com/product/BookDisplay.do?_method=Detail&sc.shopNo=0001100000&sc.dispNo=001018&sc.prdNo=213625547
회원작성글 G.P.Ts  |  2013.12.06
Q. cell cycle을 pi로 측정할때 ㅜㅠ.
안녕하세요 처음 cell cycle을 FACS를 찍으려고 알아봤는데여기에 보통 PI 와 triton x-100, RNase를 쓰더라구요..그래서 찾아봤는데 RNase의 종류가 다양하더라구요..혹시 RNase는 어느 용도로 사용하는 것을 사면될까요 ㅜ.ㅜsigma에서 찾아봤는데 종류가 여러가지인지라..아아 그리고 혹시 RNase를 왜 써야하는지도 좀..부탁드려용
실험생  |  2013.12.01
Q. Distant Disease Free suvival DDFS가 정확히 어떤뜻인지
Distant Disease Free suvival DDFS가 정확히 어떤뜻인지알고싶습니다..명확하게 설명히...안되는거같아서여쭤봄니다
회원작성글 매미매미  |  2013.11.05
Q. cell cylce analysis 과정중
 실험을 하려는도중 Facs가 고장이 난듯하여 cell에 70% ethanol 을 넣어 -20도에 보관중입니다.다음 과정인 PI staining을 진행하기 전까지얼마동안 -20도에서 보관 가능할까요
회원작성글 미완의꿈  |  2013.08.09
Q. FACS data분석좀 도와주세요..ㅠ_ㅠ 첨부파일
FACS Pi staining하여 cell cycle data를 얻었는데 여러장을 한꺼번에 3d data로 정리하려고 합니다.첨부한 이미지처럼 정리하고싶은데 아무리 찾아봐도 지원하는 program이나 아시는분이 없으시네요.. ㅠㅠ혹시 이런 정리가 가능한 program 아시는분 있으시면 꼭좀 도와주세요!!CellQuest(BD) 로 얻은 data입니다..
회원작성글 승재  |  2013.07.24
Q. cell 70% EtOH fixation 시간.. 길어도 괜찮을까요?
cell cycle 보고있는 학생입니다.실험 스케줄이 꼬여서 ㅠ 실험을 미뤄야하게 생겼습니다.single cell 만들어서 FACS로 sorting 후, positive cell만 cell cycle 분석합니다.single cell 만든후 70% EtOH에서 -20'c에서 fixation 3일정도 괜찮을까요?지금까지는 4'c에서 오버나잇이나 1시간만 해왔습니다.
석사생  |  2013.07.17
Q. coculture 후의 FACS 관련 문의사항 (Annexin , 항체)
두가지 세포 (Tumor cell 과  MSC)를 coculture 하여 (- cell insert 사용 안함)Tumor cell 에서 일어나는 변화 (apoptosis 등)를 보고자 합니다. (물론 cell insert를 사용하는 indirect coculture 군도 따로 있습니다.)direct co-culture 후에  두 cell 이 뒤섞인 상태에서1. Annexin / PI (apoptosis) 분석이 가능한 지요?2. FACS 경험이 없어서 여쭙는데,  혹시, Annexin /PI / BrdU 의 동시 분석이 가능할까요? 또, coculture 후, 항체를 붙여 p-p65(NF-kB) , CD31(angiogenesis)를 보고자 합니다. 그런데, cell 이 두 가지 뒤섞여 있어 분석에 어려움이 있을 거 같아 그 중 MSC를 CD90으로 표지하여 배제 시키고  Tumor cell 만의 반응을 보고자 합니다. 이러한 경우에 3. 항체를 형광만 서로 다르게 하여 p-p65 / CD31/ CD90을 동시에 염색하여 분석이 가능할까요?    (p-p65는  세포의 permeabilization이 필요하고  CD항체는 필요하지 않은 것으로 알고 있는데   이러한 경우(세가지 동시 stain)에 permeabilization을 한 후에 stain 해도 CD항체에는 영향이 없을까요?  )
회원작성글 씨쏠트  |  2013.07.09
Q. FACS_ cell cycle 분석좀 도와주세요 첨부파일
안녕하세요..요즘 PI staining 으로 cell cycle 을 찍고있는데..제대로 찍은것인지 주변에 물어볼 곳이 없어.. 이렇게 도움청합니다 ㅠ귀찮으시더라도 첨부파일 확인해주시기 부탁드려요~ㅠcontrol에 비하여 특정 약물을 처리하였을때, cell의 증식이 저하되고, 단백질 발현에 있어서도 cell cycle regulatory protein의 변화를 확인하여서.. 이렇게 facs로 cell cycle 을 찍어보았는데요..파일의 맨 처음 그림이 negative control 이며 나머지 3개가 약물을 처리한 것입니다.G2/M arrest가 일어났다고 해석해도 될까요?제대로 facs가 찍힌것인지 궁금합니다.. 제발.. 도와주세요~~ㅠㅠ
연구원  |  2013.05.23
Q. cell cycle analysis 분석관련질문
FACS(PI staining)분석을 통한 cell cycle analysis에서cell proliferation이 촉진되는 조건을 주었을 때,S phase가 증가하는 것은 어떤 의미로 해석할 수 있습니까?cell cycle에서 S phase가 증가하는 것이 apoptosis로 인하여 S phase에서 arrest된 것이라고 판단하는 논문들이 있어서proliferation과 관련하여 해석할 수 있는지 궁금합니다.그리고 대부분 어떤조건처리후에 S phase증가를 확인할 때조건처리 후 얼마 있다가 cell harvest&fixation을 진행하나요? 
cellcycle  |  2013.05.22
Q. 3T3-L1/MM-142/WEHI-3 세포 키우시는 분!!!
제가 요즘 p16 (cell cycle 관련 실험) WB를 진행하고 있는데요. detection이 잘 안됩니다. 예전에도 잘 detection되지는 않았는데, 실험이 좀 많이 지연되어서... 실험 컨디션은 [loading: 100ug이상, 1st 1:100 in 3% BSA,  4C,binding 72 hr이상 --; 2nd 1:3000 in 3% Skim milk, Rabbit, RT 1hr 이상]입니다만 band가 거의/전혀 확인이 안됩니다. (잘 확인이 되지 않아서 WB조건은 정말 최.대.한.으로 정해서 진행했습니다.) 다른 size의 단백질은 WB로 확인이 되었으므로 실험자체 문제는 아닌것 같습니다만... 혹시 antibody자체의 문제인지, 아니면 세포주에 이 단백질이 없는건지 알려면 positive control 을 같이 확인해보면 될것 같은데... sheet에 나온 positive control이 있어서... 급한 마음에 여쭙습니다. 혹시 이 단백질을 확인해 보신적이 있거나, 관련세포주를 키우고 계시거나.. cell lysate를 조금만 주실 수 있는 분이 계신지...?? (세포주가 아니라 lysate면 충분합니다.. ^^;;) 아니면 다른 조언이라도 주시면 감사히 듣고 참고하겠습니다. P.S. 물론 antibody회사와도 연락을 취할 예정입니다만... 구입한지 시간이 많이 지나서 잘 될지 모르겠습니다. T.T
갈수록태산  |  2013.05.20
Q. 실험법에 관해 질문드립니다.
cell cycle 분석하는 실험법과분열중인 세포를 확인하는 실험법에는 어떤것이 있는지 궁금합니다.되도록이면 실험 원리도 함께 알려주시면 감사하겠습니다.
브릭  |  2013.05.10
Q. flow cytometry_cell cycle 실험 방법 문의드립니다
안녕하세요.. FACS를 이용하여  cell cycle 을 찍어보려고 합니다.PI staining을 하려하는데.. 여기저기 검색해서  propocol을 알아보다 궁금한것이 몇가지 있어 이렇게 도움요청 드립니다.살아있는 세포는 pi로 염색이 되지 않아서 염색과정 전에 triton X-100 같은 것으로 세포벽에 구명을 뚫는것으로 알고있는데요..실험과정중에 어떤것은 이 과정이 있고, 어떤것은 생략되어 있는데..어떻게 해야하는게 맞는건가요? 혹시, 70% 에탄올로 고정시키면 이 과정없이도 세포에 염색이 되는건가요?protocol마다 방법이 약간씩 차이가 있어서.. 염색하는 시간도 그렇고..경험있으신 분들.. 실험방법좀 공유해 주시기 부탁드립니다~감사합니다 ^^
연구원  |  2013.05.10
Q. proliferative rate 측정
in vitro cell 에서 proliferative rate 를 측정하는 방법들에는 어떤 것들이 있나요..쉽게 할 수 있으면서 보편적으로 인정 받는 실험 방법에는 어떤 것이 있는지 궁금합니다.
실험 초보  |  2013.05.10
Q. PI staining으로 cell cycle을 보는데요..data분석좀 도와주세요ㅠㅠ!
사진첨부한거 보시면윗줄이 Normoxia이고아랫줄이 Hypoxia입니다맨왼쪽이 컨트롤이구 독성약물을 dose디펜던트하게 처리한거여서 subg0구간을 보는데요..hypoxia peak가 왜 저렇게 무너지는지 모르겠습니다,..셀은hypoxia 24시간전처리후 약물 4시간처리하고 pi staining 한것입니다.에탄올로 fixation하구요..분석좀 도와주세요ㅜㅜ
회원작성글 biochem  |  2013.05.09
Q. PI staining으로 cell cycle을 보는데요..data분석이 어렵습니다..(hypoxia관련) 첨부파일
며칠전에도 질문올렸었는데요ㅠㅠ사진첨부해서 다시 올립니다..guava라는 flow cytometry장비로 cell cycle을 찍었구요제가 나름(?) phase구간을 나누어봤는데맞는지도 잘 모르겠습니다..퍼센트 써있는 구간이 subg0기(라고생각)인데요..분석을 어떻게 해야할지ㅠㅠ... 팩스칼리버로 찍을때랑은 데이터모양이 다른데..이 장비로 찍어야하거든요 cell cycle을요..그리고 normoxia보다 hypoxia를 준 cell은 apoptosis가 줄어들어야 맞는데,g0/g1기 peak가 왜 normoxia보다 hypoxia가 낮은건지도 궁금합니다..제생각엔 hypoxia에서 피크가 더 올라가야 맞는거같은데..아니면 데이터가 잘못나온건지요,,??구간도 어케나눠야할지...ㅠㅠ검색도많이해보고 머리끙끙앓아봐도 답이안나오네요ㅠㅠ저희실험실에선 제가 이걸 처음하는거라...모르는게 많습니다ㅠㅠ도와주세요!!~~
회원작성글 초보실험자  |  2013.05.01
Q. hypoxia를 준 cell의 cell cycle에서.. g0/g1기 봉우리가 줄어드는데 맞나요? 급합니다ㅠㅠ
normoxia/hypoxia 상태에서 독성약물을 농도별로 처리하여 cell cycle을 보고있습니다.그런데normoxia상태보다 hypoxia상태의 cell에서g0/g1기 구간의 봉우리가 더 낮아집니다..hypoxia상태에선 apoptosis가 억제되니까 g0/g1기의 봉우리는 normoxia보다 더 높게나와야 하는거 아닌지요...왜 이런현상이 나타나는거죠??제가 잘못 측정한것인가요?? 뭐가 문제인지 잘 모르겠습니다..도와주세요!
회원작성글 초보실험자  |  2013.04.29
이전  11 12 13 14 15 16 17 18 19 20  다음
실험 회원 등급이란?
실험Q&A 회원등급안내
위로가기
실험 홈  |  실험FAQ
 |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의
트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS
에펜도르프코리아 광고