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[우당탕탕 석사 적응기] 석사 1학기 - 새로운 환경, 그리고 후회
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Mol. Biol.-DNA Mol. Biol.-RNA Mol. Biol.-Protein Immunology
Cell Biology Microbiology Plant Biology Laboratory Animals
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질문/투표/프로토콜 등록
Q. pH 7.4 buffer 몰농도 계산 도와주세요
안녕하세요,    pH 7.4 PBS 몰농도 계산 중에 이게 맞는 답인가 싶어 글 올립니다.   제가 만든 7.4 PBS의 몰농도를 계산하고 싶은데 혹시 아래 레시피로 만들었을 때, 몰농도가 0.1M 맞나요?!   혹시 계산방법도 알려주시면 너무 감사하겠습니다 ㅠㅠ   1. 염화나트륨 8g(0.137M) 2. 염화칼륨 0.2g(0.0027M) 3. Sodium Phosphate Dibasic 1.44g(0.01M) 4. Potassium Phosphate Monobasic 0.245g(0.0018M) -> 800mL D.W.에 2~4를 넣고 녹이고(A용액), 200mL D.W.에 1을 넣고 녹인 후(B용액), B 용액으로 A 용액의 pH를 7.4로 조정  
회원작성글 노력노력노력  |  09.15
Q. yeast amp plate
amp가 E.coli에서 colony selection을 하기위해 항생제를 넣어주는걸로 알고있는데요. yeast로 ransformation 과정을 진행중입니다 yeast 에서의 Amp plate도 같은 원리로 사용하는건가요..? E.coli에서만 amp plate를 꺼보고 YPD amp plate는 써본적이 없어서 질문드립니다.
회원작성글 겨율까지  |  09.15
Q. small molecule 구조 예측 프로그램
펩타이드를 포함한 small molecule을 디자인 하려고 하는데 solvent나 buffer에서 대략적인 구조를 예측할 수 있는 소프트웨어가 있을까요? 무료 프로그램이면 좋긴 한데 그게 아니라도 추천해 주시면 감사하겠습니다. 
회원작성글 과학하는사람  |  09.15
Q. 서울쪽에 조직 slide 스캔해주는 업체있나요?
서울쪽에 조직 slide 스캔해주는 업체있나요? 동물실험 후 조직slide제작 했습니다.  이 조직 slide 스캔하는 업체가 있는지 알고 십습니다.
회원작성글 mito59  |  09.15
Q. 구강세균 디스크 확산법에 대해서 질문드립니다
안녕하세요 저는 고등학교 과제연구에서 구강세균에 대한 에센셜 오일의 항균효과에 대해 연구를 진행하고 있는데요, 생물자원센터에서 S. mutans를 분양받으려고 했는데 Bio level1이라서 불가능하고, 대신 연쇄상구균 중 하나인 S. downei 를 분양받았는데요, 동결건조 앰플을 재생하고BHI배지에 획선도말하여 관찰했는데 colony가 잘 관찰되지 않아서요ㅠㅠ 뭐가 문제였는지 잘 모르겠습니다… 1. 동결건조된 미생물이 배송된 후 냉장보관하다가 5~6일 뒤에 재생하고 배양한 것 2. S. downei는 미호기성인데 일반 incubator에서 배양한 것 그리고 추가적인 질문은 3. 구강 내에도 대장균이 존재한다고 들었는데 그냥 일반 대장균으로 실험해도 구강세균 항균효과와 비슷하다고 결론 낼 수 있을까요?(아무래도 문제가 있겠죠?ㅠㅠ) 4. 직접 치아에서 세균을 채취하여 디스크 확산법으로 항균효과를 확인한다면 어떤 방법으로 하는 것이 좋을까요? 고등학생이다보니 조언을 구할 곳이 많이 없다는 것이 어려움인 것 같습니다..ㅠㅠ 조언 간절히 부탁드려요…!!
회원작성글 jian0624  |  09.15
Q. real time pcr 띄 없음
생명과학 고수님들 안녕하세요! 저는 고등학교에 다니고있는 학생입니다.  학교에서 구강상피세포를 이용하여 ACE 유전자 타입을 알아보는 실험을 했는데 모든 조에서 DNA 밴드를 관찰할 수 없었습니다 ㅠㅠ 예상되는 이유가 몇개 있는데 1. 히팅블럭 사용의 유무 ( 학교에 히팅블럭이 없어 그냥 끓는 물에 가열했습니다. 일정한 온도로 가열할 수 없었는데 이것이 세포막 파괴에 영향을 주었을까요? ) 2. 피펫 사용 미숙으로 시료가 균일하게 섞이지 않았다. 3. Agarose gel을 만드는 과정에서 EtBr을 너무 높은 온도에서 섞으면 안된다고 알고있습니다. 이것이 사실인가요? 만약 사실이라면 이유가 무엇일까요? 또 저희는 실험 과정에서 ErBr이 아니라 생물나라의 SafeShine™ DNA Stain을 사용했는데 이 시약도 높은 온도의 Agarose와 섞으면 안되는 걸까요? 4. 실험이 예상보다 지연되어서 냉동보관이 필요한 시약들이 상온에 꽤 오랜시간(약 1시간) 방치되었습니다.    크게는 이렇게 4가지 이유가 있는데 고수님들께서 보시기에는 어떤 이유가 가장 가능성 있다고 생각하시나요? 그리고 pcr과정 말고 전기영동 자주 나오는 실수는 어떤게 있을까요?
회원작성글 생쪼  |  09.15
Q. 세포 파쇄 시 lysis buffer사용
단백질 정제를 위해 세포 파쇄를 할 때 먼저 lysis buffer를 처리해줬습니다. 이 방법은 단백질 파쇄법 중 enzymatic digestion이 아닌 chemical solubilization이라고 봐야할까요? 
회원작성글 말도못하는감자  |  09.15
Q. 플라스크 A, B 추출액을 모르겠어요
안녕하세요 유기화학 분별 증류 실험을 했습니다 아세트산 에틸(끓는 점 77.1) n-아세트산 부틸(끓는 점 126.1) 혼합물을 분별 증류해서 차례대로 플라스크 A, B, C를 얻었습니다. C가 n-아세트산 부틸이란 것은 알겠는데 A와 B 중 무엇이 아세트산 에틸인가요? 또 나머지 하나는 혼합물인가요? 또 수득률 계산을 몰수로 계산할 수는 없나요?
회원작성글 mmiing  |  09.15
Q. 단백질 추출 및 정량 실험에서 쓸 단백질 종류 알려주세요
고등학생이구요 단백질 추출 및 정량 실험에서 무슨 단백질을 써야할지, 어떻게 구해야하는지 잘 모르겠습니다... 이왕이면 의약용으로 활용될 수 있는 단백질로 실험하고 싶은데 괜찮은 단백질 추천부탁드립니다!
회원작성글 ㅊ챙  |  09.15
Q. westernblot 트랜스퍼 시 두 멤브레인의 경향성이 다르게 나와요
wet 트랜스퍼 할때 pvdf 카세트가 두개 들어가잖아요? 트랜스퍼 돌릴때 같은 샘플로 1번, 2번 pvdf 카세트에 트랜스퍼 한 후, 2개 멤브레인에 항체 반응을 하면 1번 2번 멤브레인의 밴드가 경향성이 같게 나오지를 않네요. 이런 경험 하신분 계실지, 어떻게 해결하셨는지 아시는분 혹시 있으신가요? 
회원작성글 AGCT  |  09.15
Q. 콩나물 아미노산 정량을 위한 마이크로플레이트 리더 사용 법 관련 질문
실험 활동으로 키운 콩나물의 아미노산 함량 측정을 위해 마이크로플레이트 리더를 사용하게 되었습니다. 그러나 기자재를 처음 사용하는지라 동결건조 시킨 콩나물에 해야하는 전처리 과정이나 찾아본 바에 의하면 대략 5가지 분석 방법이 있었는데 그중 어느 방법을 사용해야되는지 의문이 듭니다..... 구체적으로 설명가능하시면 부탁드려요ㅠㅠ......
회원작성글 moonHY  |  09.14
Q. Nested PCR 중 NC, PC 샘플링 문의
분자 진단을 이제 배우며 시작하는 단계라 부끄럽지만 문의 드립니다. Nested PCR 중 negative, positive control 도 시료와 같이 1차 PCR 진행한 것에서 샘플링 해야 되는건지 궁금합니다. 박사님께서 1차 PCR 완료된 것에서 샘플링 하여 진행하는 걸로 알려주셨는데 NC에서도 밴드가 계속 보여서 NC만 1차 PCR 진행하지 않고 2차 PCR 진행하여 확인했는데 밴드가 보이지 않습니다. 정확히 어떻게 해야 하는지 궁금합니다. 그리고 2차 PCR때 primer 농도에 따라 결과 값도 달라지던데 자세한 답변 부탁드립니다. ^^;;    
회원작성글 그리심  |  09.14
Q. Heat shock
Ip 하고 heatshock 5분 정도 하려고 했는데 15분정도 방치해버렸습니다ㅠ 샘플이 아까워서 wb까지 진행했는데 flag은 나오는데 다른 항체에서는 안보이네여,, 원인을 찾고있는데 heat shock 오래한게 크게 문제가 될까요..?
회원작성글 바닷가  |  09.14
Q. working 농도 계산에 질문이 있습니다
현재 배지를 2ml씩 넣어서 배양중인 35π dish가 있는데요. 이 cell에 A23187이라는 물질을 1uM 농도로 처리하고자 합니다. A23187의 stock 농도는 1mM인데요. 이렇게 cell에 물질 처리할때도, working 농도 계산은 MV=M'V' 식을 사용해서 사용할 stock의 volume을 계산하면 되나요?   1mM x X = 1uM x 2ml 1000uM x X = 1uM x 2000ul X = 2ul 위의 계산대로라면 2ml 배지가 들어가 있는 35π dish에 A23187 stock 2ul 넣고 잘 섞어주면 되는지 궁금합니다!
회원작성글 가우미  |  09.14
Q. union male/female
안녕하세요.  hplc column을 빼고 union을 연결하려 하는데, 카달로그를 찾아보니까 male to male이나 female to female이렇게 적혀있더라구요. 혹시 어떤 의미인지 알수있는지 궁금합니다! 그리고 union을 선택할 때, lc 라인에 연결되어있는 볼트 라인에 맞춰야 할것같은데, 볼트사이즈와 union 사이즈는 어떻게 확인하고 구매를 하면 될까요?
회원작성글 닁닁  |  09.14
Q. 세균 보존법??
세균을 배양했는데요. 자라난 배지 그대로 -4℃ 보관해도 안죽나요?
회원작성글 iklou  |  09.14
Q. 두 조건 상의 작은 단백질을 (bacteriocin) HPLC 로 정량 비교하고 싶습니다.
같은 균주를 온도만 다르게 해서 배양액 내의 bacteriocin 이라는 5kda 이하 크기의 작은 단백질의 양을 비교하고 싶은데요 같은 균주기 때문에 같은 박테리오신을 분비할 것으로 예상되고, 무엇인지 밝혀지지 않은 박테리오신도 생성하는 것으로 알고있습니다... 따라서 저는 HPLC로  한 가지 물질의 양을 정량하고 싶은 게 아니라  온도에 따라 박테리오신의 양이 얼마나 달라지는지를 HPLC로 확인해보고싶은데,  찾아보니 대충의 피크는 알아놔야한다고 하더라고요... 저는 피크를 모르는 단백질 양 또한 같이 정량하고 싶어서 이를 어떻게 하면 좋을지 고수님들께 여쭤봅니다 ㅜ      
회원작성글 dddda  |  09.14
Q. 채혈 질문입니다.
안녕하세요. 동물실험 진행 중인 대학원생입니다.   채혈 관련해서 질문이 있습니다.   rats를 CO2 가스를 이용해서 안락사 시키고 심장을 통해 채혈을 하면 일반 채혈법과 비교해서 혈액 내의 성분이 크게 변화할 가능성이 존재할까요?
회원작성글 주식회사고래  |  09.14
Q. 1M Tris-HCl 제조 방법
제가 시약 제조법에 대해 배우고 있는 중인데 1M Tris-HCl(pH8.5-8.8) 180µL의 제조법에 대한 정보를 알고 싶습니다.
회원작성글 JHS3219  |  09.14
Q. small panel hyb 관련 질문
혹시 굉장히 작은 사이즈의 패널로 하이브 해보신 분 있으신가요?   큰패널로 실험하고 남은 하이브 전 라이브러리 재활용 해서 다른실험에서 spike in용으로 쓰던 65K 정도 사이즈 되는 패널로 하이브 해보려는데 이렇게 작은 사이즈는 경험이 없어서 잘 될 지 몰라서요. 경험 해 보신 분들이 있는지 궁금합니다. 또 저렇게 작은 걸로 하이브를 길게하면 offtarget이 심할 것 같은데 보통 얼마나 주는지도 궁금합니다.
회원작성글 QIWIEI  |  09.14
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