학부생 인턴입니다 Atg7-NSC cKO 마우스한테 인지와 기억을 확인할수있는 행동실험을 해야하는데 어떤 실험을 해야할까요?

안녕하세요! 지금 조직 염색 하려고 하고 있는데   슬라이드에 조직 붙인 다음에 Antigen retrieval 어떻게 진행하시나요?   큰 비커에 슬라이드를 다 넣고 전자레인지에 돌리라고 많이 말씀하시는데 ㅠㅠ 혹시 슬라이드가 겹쳐도 되는 건지.... 걱정 되어서요.. 그리고 전자레인지로 antigen retrieval 할 때 저는 해동 5분씩 4-5번 (총 20-25 분)하는데 끓진 않고 뜨거운 정도인데 괜찮나요? Abcam protocol 보면 boiling하라고 되어있는데 슬라이드 랙(carrier)에 꽂아서 돌리다 보니 버퍼는 아낄 수 있지만 끓으면서 2-3분만 되도 다 증발되어서 ㅠㅠㅠ    의견 부탁드립니다 ㅎ

안녕하세요!   현재 mouse brain에서 IF staining을 시도하고 있는데요..   먼저 brain은 PFA 고정 후 Parrafin으로 embedding 하였습니다. 선배랑 제가 따로 section을 진행하였고, sample 모두 받아서 제가 IF staining을 하였습니다. 선배는 5 um으로 section을 하였고 저는 8-10 um으로 section을 진행하였는데요. 일반적으로 parrafin section의 경우에는 5-8 um로 많이 한다고 하더라구요. IF staining 결과 (IF staining 모두 한번에 진행) 선배 slide에서는 signal 이 굉장히 약하고 specific 하게 staining이 되지 않았습니다(거의 staining이 안 되었다고 봐도 무방). 조직 염색의 경우 section이 얇으면 얇을 수록 resolution이 좋고 깔끔하게 data가 나온다고 생각했는데 조직에 따라서는 두꺼울 수록 결과가 잘 나오는 경우도 있나요?  제가 8-10 um로 section을 다시 해서 IF staining하는 게 trouble shooting 이 될지 궁금합니다. 모든 step은 똑같은데, section한 사람만 다르니 ㅠㅠ..   그리고 paraffin section의 경우 8-10 um가 mouse brain 혹은 lung 보기 너무 두꺼운지도 의견 부탁드립니다 ㅎㅎ

첨부한 사진과 같이 마우스가 부정교합이 있습니다. 이렇게 심하지 않아서 식이 잘 섭취했었는데 지난주부터 갑자기 섭취도 잘 못하고 있고, 4주령부터 8주령 될때까지 주에 3그램 정도 고르게 체중증가 되고 있었는데 8주차와 9주차 비교했을때 갑자기 2.46그램 감소했습니다. 그래서 살펴보니 아랫니가 코옆부분 피부를 뚫을정도로 길어져서ㅠㅠ 많이 아파하고 식이를 잘 못 섭취해서 그런것 같더라구요. 이런경우는 어떻게 해결할수있을까요? 마취하고 손톱자르듯 잘라주고 싶은데 더 아파할까봐ㅠ 경험에서 우러나온 고견 기다리겠습니다.

안녕하세요  mast cell 관찰을 위해 toluidine blue 염색을 했는데 mast cell 관찰은 처음이라 여러논문 참고해보니까 진피층의 짙은 푸른빛~보라빛을 띄는 점같은 것을 counting 하더라구요  그래서 저두 그렇게 진행을 하려고 하는데 이 방법이 맞는 방법인지, 사진 속 빨간 동그라미 속 점들이 mast cell이 염색된 것이 맞는지 확인부탁드립니다..!!    

안녕하세요, 동물실험하는 초보 연구원입니다. 순화기간 및 실험 스케줄로 breeding을 미루다가 18주령 됐을때 시작했습니다. 지금 40주령이 넘었는데도 임신이 한 번도 되지 않았습니다.. het-het도 해보고 het-wt도 해봤습니다. M1 : F2 비율로 일주일 합사 후 분리하여 임신여부를 확인하는 방식으로 했습니다.   돌연변이 개체 중 임신이 잘 안되는 mouse들도 있다고는 했는데 이정도로 안되는지는 몰랐습니다ㅜㅜ 실험에 매우 중요한 아이들이고 비용이 많이 들어서 다시 구입하긴 어려울 것 같습니다 순화기간 동안 het가 엄청나게 살이 찌더니 지금은 다른 mouse에 비해 뚱뚱합니다..mouse 비만이 임신이 안되는 원인이라고도 들었는데 제가 SPF실에서 다이어트를 시킬 방법이 있을까요?

안녕하세요! 이번에 근력 관련하여 마우스 실험을 진행하려고 하는데 궁금한 점이 있습니다 1. 선생님들은 sigma dexamethasone D4902 쓰시나요 아니면 D2915 (Water-soluble) 쓰시나요? 2. D4902 쓰셨다면 어디에 녹였는지와 투여량 알려주시면 감사하겠습니다 ㅠㅠ (D2915와 비교하였을 때 섭취량이 좀 많더라구요...) 알려주시면 감사하겠습니다!!

background는 C57BL/6J strain 이고 knock out mouse 주문하려고 합니다.  수컷 2마리만 주문하면 괜찮을까요? 국내에서 C57BL/6J 암컷 수입해서 backcross는 몇번 정도 해야 할까요??      

mouse에서 특정 cell의 inoculation 여부에 따라 tumor의 생성 정도를 비교하는 실험입니다. 이때, 왜 mouse간의 weight loss가 관찰되지 않는 것이 중요한지 궁금합니다.   *원문: Based on the above findings, we conducted peritoneal dissemination model experiments using OCUM-2MD3 cells to evaluate the role of S-CAFs in the development of peritoneal dissemination in vivo. The peritoneal tumors of OCUM-2MD3-inoculated mice treated with S-CAF-CM for 30 days were significantly larger than tumors from the other two groups, and weight loss was not observed (Figures 5A and S6A).

안녕하세요, 현재 재료공학부에서 유기전자물질을 개발중인 대학원생입니다. 소리마당에도 질문글을 올렸으나 나중에 보니 실험 QA 항목이 따로 있어서 한번더 올리겠습니다. 조금 급해서요. 최근 새롭게 합성한 물질을 implantable device용으로 사용하기 위해 생분해성을 측정하려고 합니다. 허나 제 주변 대부분의 연구자들이 재료공학만을 하시던 분들이라, 해당 방법에 대해서 굉장히 막막한 생각이 듭니다. 개인적으로 생각하였을때는 쥐에 먹이거나 피부 밑 층에 주입하여, 일정기간 이후 소변을 받아 정말로 해당 물질이 잘 나오는지 검사를 하는게 맞는 것 같은데, 말을 쉽지만 정확한 프로세스나 방식을 전혀 몰라서 답답합니다. 게다가 저희는 공과대학측이라, 생명공학 혹은 의과대학과 co-op을 통해 데이터를 받아야 할 것 같은데 이 부분도 국내 어떤분이 이런 연구를 하시는지 생각보다 찾기가 굉장히 어렵네요   혹시 해당 연구를 하시거나 아시는분들께 짧은 답변이라도 부탁드려도 괜찮을까요?   감사합니다

마우스 변비모델을 만들려고 하고 있어서 레퍼런스를 뒤지고있는데 대중적으로 쓰는 strain인 C57BL6, BALB/C, ICR과 다르게 자꾸 중국계(혹은 중국) 연구원쪽에서 변비 모델에 Kunming mouse를 쓰고 있는 논문들이 찾아지는데, 이 마우스에 대해서 아시는 분 계시나요? 중국 내에서 만든 마우스 모델같은데..한국에선 못구할것같으니 해당 마우스를 제외하고 다시 검색을 해야할거같은데..너무많네요

유튜브에서 생선의 아가미를 열고 대동맥에 카데터를 삽입해서 온몸에 간장을 넣는 영상을 보았습니다. 비슷한 실험을 진행하고싶은데 동물 보호법에 위법이 아닌 방법으로 고등학생이 실험을 진행할 수 있는 방법이 있을까요 (학교 선생님은 심의위원회 개최는 어렵다고 하셨습니다)

in vivo로 cox-2 항체 발현을 보려고 반복실험 하고 있습니다. 그러나 이번 실험에서 밴드를 보니 타겟 밴드 위치가 아닌 actin 밴드 위치에만 밴드가 잡히고 cox-2 밴드 위치에서는 희미하게 뜨거나 안뜨더라구요..ㅠㅠ 이런적은 처음이라.. 이유가 뭔지 알려주세요ㅠㅠ   항체 비율은 5000:1, Mouse, 5% skim milk로 붙이고 있습니다..

안녕하세요,   Subarachnoid hemorrhage (SAH)를 rat에게 유발 중입니다.   만든 뒤에 brain을 포르말린 (4% PFA)에 고정하는데요,   brain을 skull에서 분리하여 포르말린 통에 넣으면 뭔가 clot에 붙은 혈액이 미세하게 포르말린에 희석되는 느낌이에요.   그리고 포르말린 통에서 건져낼 때에도 clot이 잘 분리되어서 조심히 다뤄야 하고요.   그래서 쥐 머리 통째로 (brain을 분리하지 않고) 포르말린에 담궈버릴까 생각하고 있는데요,   혹시 괜찮은 방법일까요?

대학원에서 SD-Rat 교배 실험을 하고 있습니다. 총52마리 암컷을 암수 2:1로 5월 29일에 교배시작 하여 6월2일에 암수 분리 하였습니다. 현재 7월 12일까지 출산한 Rat이 없습니다. 보통 얼마뒤에 출산하나요? 출산이 너무 늦는 것 같아 걱정입니다.

안녕하세요 제가 논문 공부를 하고 있는데 검색해봐도 도저히 이해가 안가서 실험동물에 대한 내용에 대해서 질문드려요.  유전자 발현 평가를 하기 위해 실험동물을 교차 교배시켜 모델을 생성한 것 같은데 그림에서 나온 TPO-Cre;Tbx3 G/+, mPTC/Tbx3G/+ 가 어떤걸 의미하는지 정확하게 모르겠어서요.. 실험동물 전문가 분들 알려주시면 감사하겠습니다!! 

키트 사용 후 결과 계산중인데 흡광도 450, 620으로 측정후 620 값으로 background를 보정해주라고 하는데 이때 보정이 450 흡광도 값 -620 흡광도값인지, 450/620흡광도값인지 궁금하여 질문 남깁니다!  어떤 보정 방법이 맞는걸까요ㅜㅜ  

mouse serum 내 IgE 측정위해 kit 사용하였습니다다   첫 시도에서 Sample(10배 희석) 분주 후 흡광도 측정결과 standard 값보다 높게 나와서 200배 희석 후 흡광도 측정했는데 값이 더높게 나왔습니다 왜 이런결과가 나왔는지 kit 내 프로토콜에도 결과 해석이 없더라구요ㅠㅠ  프로토콜에 샘플 희석 농도에 대한 언급이 없어서 보통 kit 사용시 얼마나 희석을 해야하는지 흡광도 값은 얼마정도 나와야하는건지 궁금합니다!   그리고 흡광도 측정시 만약 2.5nm가 나왔다면 sample을 10배 더 희석하면 0.25nm 정도의 흡광도 값을 얻을 수 있을까요?.

CreER mouse한테 tamoxifen 사료를 먹여 발현을 유도하려 하는데 tamoxifen을 feeding하지 않은채로 genotype하면 cre gene을 확인할 수 없나요? 그리고 tamoxifen을 급여하다가 멈추면 creER gene 발현이 멈추나요?

치매 연구 모델 마우스로 jackson에서 5xFAD mouse를 구입한 뒤 breeding하여 사용할 예정입니다.   jackson 측에서 안내하는 공식 breeding startegy에서는 hemizygote X F1 로 breeding을 시행하라고 나와 있는데, 여기서 homozygote를 사용하지 않는 이유가 있을까요?   그리고 hemizygote는 mutant allele을 하나만 가지고 있는 개체를 말하는 것으로 알고 있는데, F1이라는 단어는 단순히 mouse들의 첫 세대 자손을 의미하는 것인지 용어의 정확한 의미도 알고 싶습니다. 답변 부탁드립니다.