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Q. trichrome staining
skeletal muscle의 development를 비교해보려 하는데 H&E를 하려다가 Trichrome staining이라는 것을 알게되었는데 이 염색방법도 근 섬유의 단면적을 비교할 수 는 있겠더라고요 혹시 H&E가 아니라 Trichrome staining으로 skeletal muscle을 본다면 이유가 있을까요?
회원작성글 별헤는밥  |  08.18
Q. 마우스 접종 전 면역억제제 투여
마우스에 균을 접종하는 실험을 계획중입니다 면역억제제를 cortisol과 cyclophosphamide를 생각중인데요 vehicle과 투여 방법이 궁금합니다 빠른 답변 부탁드립니다...ㅠㅠㅠㅠㅠㅠ
회원작성글 rladmltjd  |  08.17
Q. tg마우스 만들기. B6/N 과 J가 섞여도 되나요
안녕하세요 ES cell targeting으로 tg mouse를 만드는 과정에서 질문이 있습니다. gene manipulation한 ES cell line은 background가 B6/N인데, 교배하여 colony를 만들 적에 B6/J를 사용해도 되는지요? 이미 만들었다면, 나중에 용인이 될 수준인지요? 면역학 실험에 사용할 예정입니다 (N과 J는 102개 SNP 차이가 있고, phenotype에도 영향을 미칠 '수' 있다고 알고 있습니다만.. 컨센서스가 궁금하네요) 이걸 만회할라면, 몇 번 back crossing을 해야할까요. 이게 비효율적이라면 chimera를 다시 B6/N wt과 교배시켜야할까요? 추가로.. mouse coat color gene (agouti) 도 보통 backcrossing으로 다 없애고 시작하시는지, 아니면 이정도는 그냥 black mouse와 동일하다고 보고 사용하시는지도 궁금합니다. 브리딩 한 번도 안 해보다가 처음 도입하려니 모르는게 많습니다.. 도움 부탁드립니다. 감사합니다!!
회원작성글 암세포1  |  08.11
Q. 생쥐 행동실험
학부생 인턴입니다 Atg7-NSC cKO 마우스한테 인지와 기억을 확인할수있는 행동실험을 해야하는데 어떤 실험을 해야할까요?
회원작성글 우노  |  08.07
Q. Antigen retrieval 전자레인지
안녕하세요! 지금 조직 염색 하려고 하고 있는데   슬라이드에 조직 붙인 다음에 Antigen retrieval 어떻게 진행하시나요?   큰 비커에 슬라이드를 다 넣고 전자레인지에 돌리라고 많이 말씀하시는데 ㅠㅠ 혹시 슬라이드가 겹쳐도 되는 건지.... 걱정 되어서요.. 그리고 전자레인지로 antigen retrieval 할 때 저는 해동 5분씩 4-5번 (총 20-25 분)하는데 끓진 않고 뜨거운 정도인데 괜찮나요? Abcam protocol 보면 boiling하라고 되어있는데 슬라이드 랙(carrier)에 꽂아서 돌리다 보니 버퍼는 아낄 수 있지만 끓으면서 2-3분만 되도 다 증발되어서 ㅠㅠㅠ    의견 부탁드립니다 ㅎ
회원작성글 뚠뚜딘  |  08.07
Q. Mouse Brain Paraffin section IF staining 섹션 두께
안녕하세요!   현재 mouse brain에서 IF staining을 시도하고 있는데요..   먼저 brain은 PFA 고정 후 Parrafin으로 embedding 하였습니다. 선배랑 제가 따로 section을 진행하였고, sample 모두 받아서 제가 IF staining을 하였습니다. 선배는 5 um으로 section을 하였고 저는 8-10 um으로 section을 진행하였는데요. 일반적으로 parrafin section의 경우에는 5-8 um로 많이 한다고 하더라구요. IF staining 결과 (IF staining 모두 한번에 진행) 선배 slide에서는 signal 이 굉장히 약하고 specific 하게 staining이 되지 않았습니다(거의 staining이 안 되었다고 봐도 무방). 조직 염색의 경우 section이 얇으면 얇을 수록 resolution이 좋고 깔끔하게 data가 나온다고 생각했는데 조직에 따라서는 두꺼울 수록 결과가 잘 나오는 경우도 있나요?  제가 8-10 um로 section을 다시 해서 IF staining하는 게 trouble shooting 이 될지 궁금합니다. 모든 step은 똑같은데, section한 사람만 다르니 ㅠㅠ..   그리고 paraffin section의 경우 8-10 um가 mouse brain 혹은 lung 보기 너무 두꺼운지도 의견 부탁드립니다 ㅎㅎ
회원작성글 뚠뚜딘  |  08.07
Q. Mouse 치아 부정교합 관련 첨부파일
첨부한 사진과 같이 마우스가 부정교합이 있습니다. 이렇게 심하지 않아서 식이 잘 섭취했었는데 지난주부터 갑자기 섭취도 잘 못하고 있고, 4주령부터 8주령 될때까지 주에 3그램 정도 고르게 체중증가 되고 있었는데 8주차와 9주차 비교했을때 갑자기 2.46그램 감소했습니다. 그래서 살펴보니 아랫니가 코옆부분 피부를 뚫을정도로 길어져서ㅠㅠ 많이 아파하고 식이를 잘 못 섭취해서 그런것 같더라구요. 이런경우는 어떻게 해결할수있을까요? 마취하고 손톱자르듯 잘라주고 싶은데 더 아파할까봐ㅠ 경험에서 우러나온 고견 기다리겠습니다.
회원작성글 뽀렙뽀렙  |  08.04
Q. mast cell staining 결과 해석 방법
안녕하세요  mast cell 관찰을 위해 toluidine blue 염색을 했는데 mast cell 관찰은 처음이라 여러논문 참고해보니까 진피층의 짙은 푸른빛~보라빛을 띄는 점같은 것을 counting 하더라구요  그래서 저두 그렇게 진행을 하려고 하는데 이 방법이 맞는 방법인지, 사진 속 빨간 동그라미 속 점들이 mast cell이 염색된 것이 맞는지 확인부탁드립니다..!!    
회원작성글 jineee  |  07.28
Q. mouse breeding
안녕하세요, 동물실험하는 초보 연구원입니다. 순화기간 및 실험 스케줄로 breeding을 미루다가 18주령 됐을때 시작했습니다. 지금 40주령이 넘었는데도 임신이 한 번도 되지 않았습니다.. het-het도 해보고 het-wt도 해봤습니다. M1 : F2 비율로 일주일 합사 후 분리하여 임신여부를 확인하는 방식으로 했습니다.   돌연변이 개체 중 임신이 잘 안되는 mouse들도 있다고는 했는데 이정도로 안되는지는 몰랐습니다ㅜㅜ 실험에 매우 중요한 아이들이고 비용이 많이 들어서 다시 구입하긴 어려울 것 같습니다 순화기간 동안 het가 엄청나게 살이 찌더니 지금은 다른 mouse에 비해 뚱뚱합니다..mouse 비만이 임신이 안되는 원인이라고도 들었는데 제가 SPF실에서 다이어트를 시킬 방법이 있을까요?
회원작성글 초초보연구  |  07.28
Q. 근력 관련 마우스 실험 dexamethasone 어떤 걸 쓰시나요?
안녕하세요! 이번에 근력 관련하여 마우스 실험을 진행하려고 하는데 궁금한 점이 있습니다 1. 선생님들은 sigma dexamethasone D4902 쓰시나요 아니면 D2915 (Water-soluble) 쓰시나요? 2. D4902 쓰셨다면 어디에 녹였는지와 투여량 알려주시면 감사하겠습니다 ㅠㅠ (D2915와 비교하였을 때 섭취량이 좀 많더라구요...) 알려주시면 감사하겠습니다!!
회원작성글 ㄹㄹ  |  07.25
Q. 잭슨랩에서 KO마우스 주문하려고 하는데요
background는 C57BL/6J strain 이고 knock out mouse 주문하려고 합니다.  수컷 2마리만 주문하면 괜찮을까요? 국내에서 C57BL/6J 암컷 수입해서 backcross는 몇번 정도 해야 할까요??      
회원작성글 따르릉  |  07.22
Q. mouse의 tumor 생성 정도에서 weight loss 여부가 중요한 이유가 궁금합니다.
mouse에서 특정 cell의 inoculation 여부에 따라 tumor의 생성 정도를 비교하는 실험입니다. 이때, 왜 mouse간의 weight loss가 관찰되지 않는 것이 중요한지 궁금합니다.   *원문: Based on the above findings, we conducted peritoneal dissemination model experiments using OCUM-2MD3 cells to evaluate the role of S-CAFs in the development of peritoneal dissemination in vivo. The peritoneal tumors of OCUM-2MD3-inoculated mice treated with S-CAF-CM for 30 days were significantly larger than tumors from the other two groups, and weight loss was not observed (Figures 5A and S6A).
회원작성글 옵몽이  |  07.21
Q. 생분해성 물질의 경피/경구 주입 후 tracking 방법에 대해 질문있습니다
안녕하세요, 현재 재료공학부에서 유기전자물질을 개발중인 대학원생입니다. 소리마당에도 질문글을 올렸으나 나중에 보니 실험 QA 항목이 따로 있어서 한번더 올리겠습니다. 조금 급해서요. 최근 새롭게 합성한 물질을 implantable device용으로 사용하기 위해 생분해성을 측정하려고 합니다. 허나 제 주변 대부분의 연구자들이 재료공학만을 하시던 분들이라, 해당 방법에 대해서 굉장히 막막한 생각이 듭니다. 개인적으로 생각하였을때는 쥐에 먹이거나 피부 밑 층에 주입하여, 일정기간 이후 소변을 받아 정말로 해당 물질이 잘 나오는지 검사를 하는게 맞는 것 같은데, 말을 쉽지만 정확한 프로세스나 방식을 전혀 몰라서 답답합니다. 게다가 저희는 공과대학측이라, 생명공학 혹은 의과대학과 co-op을 통해 데이터를 받아야 할 것 같은데 이 부분도 국내 어떤분이 이런 연구를 하시는지 생각보다 찾기가 굉장히 어렵네요   혹시 해당 연구를 하시거나 아시는분들께 짧은 답변이라도 부탁드려도 괜찮을까요?   감사합니다
회원작성글 mo아일리카  |  07.19
Q. kunming mouse에 대해서 아시는 분 계십니까?
마우스 변비모델을 만들려고 하고 있어서 레퍼런스를 뒤지고있는데 대중적으로 쓰는 strain인 C57BL6, BALB/C, ICR과 다르게 자꾸 중국계(혹은 중국) 연구원쪽에서 변비 모델에 Kunming mouse를 쓰고 있는 논문들이 찾아지는데, 이 마우스에 대해서 아시는 분 계시나요? 중국 내에서 만든 마우스 모델같은데..한국에선 못구할것같으니 해당 마우스를 제외하고 다시 검색을 해야할거같은데..너무많네요
회원작성글 토라  |  07.18
Q. 고등학생 해부실험
유튜브에서 생선의 아가미를 열고 대동맥에 카데터를 삽입해서 온몸에 간장을 넣는 영상을 보았습니다. 비슷한 실험을 진행하고싶은데 동물 보호법에 위법이 아닌 방법으로 고등학생이 실험을 진행할 수 있는 방법이 있을까요 (학교 선생님은 심의위원회 개최는 어렵다고 하셨습니다)
회원작성글 이효재  |  07.15
Q. in vivo western blot
in vivo로 cox-2 항체 발현을 보려고 반복실험 하고 있습니다. 그러나 이번 실험에서 밴드를 보니 타겟 밴드 위치가 아닌 actin 밴드 위치에만 밴드가 잡히고 cox-2 밴드 위치에서는 희미하게 뜨거나 안뜨더라구요..ㅠㅠ 이런적은 처음이라.. 이유가 뭔지 알려주세요ㅠㅠ   항체 비율은 5000:1, Mouse, 5% skim milk로 붙이고 있습니다..
회원작성글 문어체  |  07.15
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