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trichrome staining |
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skeletal muscle의 development를 비교해보려 하는데 H&E를 하려다가 Trichrome staining이라는 것을 알게되었는데 이 염색방법도 근 섬유의 단면적을 비교할 수 는 있겠더라고요 혹시 H&E가 아니라 Trichrome staining으로 skeletal muscle을 본다면 이유가 있을까요?
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별헤는밥 | 08.18 |
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Q. |
마우스 접종 전 면역억제제 투여 |
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마우스에 균을 접종하는 실험을 계획중입니다
면역억제제를 cortisol과 cyclophosphamide를 생각중인데요
vehicle과 투여 방법이 궁금합니다
빠른 답변 부탁드립니다...ㅠㅠㅠㅠㅠㅠ
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rladmltjd | 08.17 |
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Q. |
tg마우스 만들기. B6/N 과 J가 섞여도 되나요 |
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안녕하세요
ES cell targeting으로 tg mouse를 만드는 과정에서 질문이 있습니다.
gene manipulation한 ES cell line은 background가 B6/N인데, 교배하여 colony를 만들 적에 B6/J를 사용해도 되는지요?
이미 만들었다면, 나중에 용인이 될 수준인지요? 면역학 실험에 사용할 예정입니다 (N과 J는 102개 SNP 차이가 있고, phenotype에도 영향을 미칠 '수' 있다고 알고 있습니다만.. 컨센서스가 궁금하네요)
이걸 만회할라면, 몇 번 back crossing을 해야할까요. 이게 비효율적이라면 chimera를 다시 B6/N wt과 교배시켜야할까요?
추가로.. mouse coat color gene (agouti) 도 보통 backcrossing으로 다 없애고 시작하시는지, 아니면 이정도는 그냥 black mouse와 동일하다고 보고 사용하시는지도 궁금합니다.
브리딩 한 번도 안 해보다가 처음 도입하려니 모르는게 많습니다..
도움 부탁드립니다.
감사합니다!!
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암세포1 | 08.11 |
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생쥐 행동실험 |
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학부생 인턴입니다
Atg7-NSC cKO 마우스한테
인지와 기억을 확인할수있는 행동실험을 해야하는데
어떤 실험을 해야할까요?
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우노 | 08.07 |
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Q. |
Antigen retrieval 전자레인지 |
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안녕하세요! 지금 조직 염색 하려고 하고 있는데
슬라이드에 조직 붙인 다음에 Antigen retrieval 어떻게 진행하시나요?
큰 비커에 슬라이드를 다 넣고 전자레인지에 돌리라고 많이 말씀하시는데 ㅠㅠ 혹시 슬라이드가 겹쳐도 되는 건지.... 걱정 되어서요..
그리고 전자레인지로 antigen retrieval 할 때 저는 해동 5분씩 4-5번 (총 20-25 분)하는데 끓진 않고 뜨거운 정도인데 괜찮나요? Abcam protocol 보면 boiling하라고 되어있는데 슬라이드 랙(carrier)에 꽂아서 돌리다 보니 버퍼는 아낄 수 있지만 끓으면서 2-3분만 되도 다 증발되어서 ㅠㅠㅠ
의견 부탁드립니다 ㅎ
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뚠뚜딘 | 08.07 |
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Q. |
Mouse Brain Paraffin section IF staining 섹션 두께 |
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안녕하세요!
현재 mouse brain에서 IF staining을 시도하고 있는데요..
먼저 brain은 PFA 고정 후 Parrafin으로 embedding 하였습니다.
선배랑 제가 따로 section을 진행하였고, sample 모두 받아서 제가 IF staining을 하였습니다.
선배는 5 um으로 section을 하였고 저는 8-10 um으로 section을 진행하였는데요. 일반적으로 parrafin section의 경우에는 5-8 um로 많이 한다고 하더라구요.
IF staining 결과 (IF staining 모두 한번에 진행) 선배 slide에서는 signal 이 굉장히 약하고 specific 하게 staining이 되지 않았습니다(거의 staining이 안 되었다고 봐도 무방).
조직 염색의 경우 section이 얇으면 얇을 수록 resolution이 좋고 깔끔하게 data가 나온다고 생각했는데 조직에 따라서는 두꺼울 수록 결과가 잘 나오는 경우도 있나요?
제가 8-10 um로 section을 다시 해서 IF staining하는 게 trouble shooting 이 될지 궁금합니다. 모든 step은 똑같은데, section한 사람만 다르니 ㅠㅠ..
그리고 paraffin section의 경우 8-10 um가 mouse brain 혹은 lung 보기 너무 두꺼운지도 의견 부탁드립니다 ㅎㅎ
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뚠뚜딘 | 08.07 |
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Q. |
Mouse 치아 부정교합 관련  |
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첨부한 사진과 같이 마우스가 부정교합이 있습니다.
이렇게 심하지 않아서 식이 잘 섭취했었는데 지난주부터 갑자기 섭취도 잘 못하고 있고,
4주령부터 8주령 될때까지 주에 3그램 정도 고르게 체중증가 되고 있었는데
8주차와 9주차 비교했을때 갑자기 2.46그램 감소했습니다.
그래서 살펴보니 아랫니가 코옆부분 피부를 뚫을정도로 길어져서ㅠㅠ 많이 아파하고 식이를 잘 못 섭취해서 그런것 같더라구요.
이런경우는 어떻게 해결할수있을까요?
마취하고 손톱자르듯 잘라주고 싶은데 더 아파할까봐ㅠ
경험에서 우러나온 고견 기다리겠습니다. |
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뽀렙뽀렙 | 08.04 |
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Q. |
mast cell staining 결과 해석 방법 |
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안녕하세요
mast cell 관찰을 위해 toluidine blue 염색을 했는데 mast cell 관찰은 처음이라 여러논문 참고해보니까 진피층의 짙은 푸른빛~보라빛을 띄는 점같은 것을 counting 하더라구요
그래서 저두 그렇게 진행을 하려고 하는데 이 방법이 맞는 방법인지, 사진 속 빨간 동그라미 속 점들이 mast cell이 염색된 것이 맞는지 확인부탁드립니다..!!
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jineee | 07.28 |
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Q. |
mouse breeding |
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안녕하세요, 동물실험하는 초보 연구원입니다.
순화기간 및 실험 스케줄로 breeding을 미루다가 18주령 됐을때 시작했습니다.
지금 40주령이 넘었는데도 임신이 한 번도 되지 않았습니다..
het-het도 해보고 het-wt도 해봤습니다. M1 : F2 비율로 일주일 합사 후 분리하여 임신여부를 확인하는 방식으로 했습니다.
돌연변이 개체 중 임신이 잘 안되는 mouse들도 있다고는 했는데 이정도로 안되는지는 몰랐습니다ㅜㅜ 실험에 매우 중요한 아이들이고 비용이 많이 들어서 다시 구입하긴 어려울 것 같습니다
순화기간 동안 het가 엄청나게 살이 찌더니 지금은 다른 mouse에 비해 뚱뚱합니다..mouse 비만이 임신이 안되는 원인이라고도 들었는데 제가 SPF실에서 다이어트를 시킬 방법이 있을까요?
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초초보연구 | 07.28 |
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Q. |
근력 관련 마우스 실험 dexamethasone 어떤 걸 쓰시나요? |
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안녕하세요!
이번에 근력 관련하여 마우스 실험을 진행하려고 하는데 궁금한 점이 있습니다
1. 선생님들은 sigma dexamethasone D4902 쓰시나요 아니면 D2915 (Water-soluble) 쓰시나요?
2. D4902 쓰셨다면 어디에 녹였는지와 투여량 알려주시면 감사하겠습니다 ㅠㅠ (D2915와 비교하였을 때 섭취량이 좀 많더라구요...)
알려주시면 감사하겠습니다!!
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ㄹㄹ | 07.25 |
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Q. |
잭슨랩에서 KO마우스 주문하려고 하는데요 |
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background는 C57BL/6J strain 이고 knock out mouse 주문하려고 합니다.
수컷 2마리만 주문하면 괜찮을까요?
국내에서 C57BL/6J 암컷 수입해서 backcross는 몇번 정도 해야 할까요??
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따르릉 | 07.22 |
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mouse의 tumor 생성 정도에서 weight loss 여부가 중요한 이유가 궁금합니다. |
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mouse에서 특정 cell의 inoculation 여부에 따라 tumor의 생성 정도를 비교하는 실험입니다. 이때, 왜 mouse간의 weight loss가 관찰되지 않는 것이 중요한지 궁금합니다.
*원문: Based on the above findings, we conducted peritoneal dissemination model experiments using OCUM-2MD3 cells to evaluate the role of S-CAFs in the development of peritoneal dissemination in vivo. The peritoneal tumors of OCUM-2MD3-inoculated mice treated with S-CAF-CM for 30 days were significantly larger than tumors from the other two groups, and weight loss was not observed (Figures 5A and S6A).
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옵몽이 | 07.21 |
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생분해성 물질의 경피/경구 주입 후 tracking 방법에 대해 질문있습니다 |
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안녕하세요, 현재 재료공학부에서 유기전자물질을 개발중인 대학원생입니다. 소리마당에도 질문글을 올렸으나 나중에 보니 실험 QA 항목이 따로 있어서 한번더 올리겠습니다. 조금 급해서요.
최근 새롭게 합성한 물질을 implantable device용으로 사용하기 위해 생분해성을 측정하려고 합니다.
허나 제 주변 대부분의 연구자들이 재료공학만을 하시던 분들이라, 해당 방법에 대해서 굉장히 막막한 생각이 듭니다.
개인적으로 생각하였을때는 쥐에 먹이거나 피부 밑 층에 주입하여, 일정기간 이후 소변을 받아 정말로 해당 물질이 잘 나오는지 검사를 하는게 맞는 것 같은데, 말을 쉽지만 정확한 프로세스나 방식을 전혀 몰라서 답답합니다. 게다가 저희는 공과대학측이라, 생명공학 혹은 의과대학과 co-op을 통해 데이터를 받아야 할 것 같은데 이 부분도 국내 어떤분이 이런 연구를 하시는지 생각보다 찾기가 굉장히 어렵네요
혹시 해당 연구를 하시거나 아시는분들께 짧은 답변이라도 부탁드려도 괜찮을까요?
감사합니다
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mo아일리카 | 07.19 |
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Q. |
kunming mouse에 대해서 아시는 분 계십니까? |
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마우스 변비모델을 만들려고 하고 있어서 레퍼런스를 뒤지고있는데
대중적으로 쓰는 strain인 C57BL6, BALB/C, ICR과
다르게 자꾸 중국계(혹은 중국) 연구원쪽에서
변비 모델에 Kunming mouse를 쓰고 있는 논문들이 찾아지는데,
이 마우스에 대해서 아시는 분 계시나요?
중국 내에서 만든 마우스 모델같은데..한국에선 못구할것같으니
해당 마우스를 제외하고 다시 검색을 해야할거같은데..너무많네요
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토라 | 07.18 |
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Q. |
고등학생 해부실험 |
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유튜브에서 생선의 아가미를 열고 대동맥에 카데터를 삽입해서 온몸에 간장을 넣는 영상을 보았습니다.
비슷한 실험을 진행하고싶은데 동물 보호법에 위법이 아닌 방법으로 고등학생이 실험을 진행할 수 있는 방법이 있을까요
(학교 선생님은 심의위원회 개최는 어렵다고 하셨습니다) |
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이효재 | 07.15 |
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Q. |
in vivo western blot |
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in vivo로 cox-2 항체 발현을 보려고 반복실험 하고 있습니다.
그러나 이번 실험에서 밴드를 보니 타겟 밴드 위치가 아닌 actin 밴드 위치에만 밴드가 잡히고 cox-2 밴드 위치에서는 희미하게 뜨거나 안뜨더라구요..ㅠㅠ
이런적은 처음이라.. 이유가 뭔지 알려주세요ㅠㅠ
항체 비율은 5000:1, Mouse, 5% skim milk로 붙이고 있습니다..
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문어체 | 07.15 |
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