16S PCR을 하는데 어제는 밴드가 떴는데 좀 희미하게 떠서 오늘 다시 진행했는데 밴드가 하나도 안떠요.   DNA는 colony 따서 chelex에 풀어서 사용하고, 어제 2ul 넣었다가 잘 안떠서 10ul로 다시 실험 진행했는데 샘플 전부 밴드가 안떠요 다른 reagent는 양 맞게 넣었고 다시 여러번 확인해봐도 뭐가 문제인지 모르겠어요ㅜㅠ  

R2A에서 1/100 dil 후 원래 od 0.3까지 4-5시간이면 자랐던 E. faecium이 어떤 방법을 써도 O/N을 해도 0.2까지밖에 안자랍니다... 이 이유를 아시는 분 혹시 있을까요? 벼래별 용은 다 썼는데 growth가 회복되지 않습니다.... 도와주세요 1. 신선한 R2A 사용 2. stock을 agar에 긁은 후 콜로니 뜨면 broth에 키운 후 dilution 3. stock을 broth에 키운 후 broth에 dilution 4. airation 잘 될수있게 큰 플라스크에 배양 위 방법등을 모두 써도 전처럼 그로스가 돌아오질 않습니다....ㅜㅜㅜㅜㅜㅜ   추가로 BHI라는 고영양 배지에서 배양했을 시 OD값은 높아지긴한다만,  원래는 3시간이면 자라던 게 지금은 6시간 이후부터 반응이 올 정도로 느리게 자랍니다..... 이유를 아시는 분 계시면 알려주세요 ㅠㅠㅠㅠ  

안녕하세요. 이번에 처음으로 low melting agarose를 이용한 virus plaque assay를 진행했는데요. CMC media를 사용하면 media를 흡입하여 제거하면 끝이지만 agarose는 물리적 충격을 주어서 떨어뜨려야 한다고 배웠습니다. 실제로 진행하니 잘 안되더라구요. formaldehyde로 fixing 한 후에 2hr을 두고, 제거하려다보니 잘 안되어서 suction기로 끝부분을 살짝 띄워서 제거하는 방식으로 진행하였습니다. 혹시 잘 떨어뜨리는 노하우를 가지고 계신분 도와주실 수 있으신가요? 그리고 CMC media보다 agarose를 사용했을 때 plaque 형성 기간이 길어지는 것 같은데 맞는지도 궁금합니다.

아래자료로 더블링 타임 구하면 16.3 시간이 나오는거 맞나요?? 36시간 300 48시간 500 60시간 800 72시간 900   단위 콜로니 수   점들 그래프에 찍고 접합직선계산하니 0.43이 나왔습니다

1. 일반적으로 혐기성 여드름균 더블링 타임이 얼마로 나오나요..?   2. 고등학생이 콜로니 수 대략적으로 새서 더블링 타임 구해보는거 괜찮을까요?

제품에서 허용 가능한 미생물 회수 결과를 얻기 위해 가장 낮은 희석 배율의 검액으로 준비한다 이 뜻이 잘 이해가 안돼서요..! 가장 낮은 희석배율의 뜻이 희석을 여러번 하지 않은 비교적 높은 농도의 상태인가요? 또한 허용 가능한 미생물 회수 결과는 제품별로 정해져 있는 미생물 결과 기준치를 넘지않는 결과값 이라는 뜻인건가요?

벡터에 클로닝 한뒤에.. 컴셀 키워서.. LB agar +엠피실린 100ul/ml 배지에 (일주일 전 미리 만들어놓았기 때문에.. 잘 굳어있는 상태) 500ul컴셀.. 넣고 도말했습니다.. 새 엠피실린으로 만들었어요.(엠피실린 맛 간 건 아닐것 같습니다,,) 다음날 아침에 콜로니를 관찰하려 하니 파일 첨부한것 처럼 뿌얀 무언가 덮여있고.. 콜로니가 아예 없어요..  잘 안보이는 저 콜로니같은것들은 콜로니가 아닌.. 도말하면서 밀렸던 배지 찌꺼기? 입니다.. 도와주십시요 ㅠㅠ

안녕하세요. Influenza, herpes 등..여러 바이러스로 plaque assay를 진행중입니다. 마지막 단계에서 agar overlay후에 배양하고 며칠 지나면 agar에 세균이 자랍니다ㅜㅜㅜㅜㅜ agar는 당연히 오토클레이브 돌렸구요... agar랑 같이 섞어주는 배지는 필터링 하였습니다. 고정하고 염색해보아도 agar에 난 오염으로 cell이 죽는건지.... plaque는 잘 보이지도 않습니다..ㅡㅜㅜㅜㅜㅜㅜㅜ 혹시 오염나지않게 AA를 첨가했는데 농도를 더 올리면 될런지요..

대장균을 배양하고 페이퍼디스크에 유산균을 적셔서 향균효과를 확인하는 실험에서 더 나아가 온도나 ph가 이 향균효과에 미치는 영향등을 확인해보는 실험을 기획해보고싶은데 어떻게 해보면 좋을까요? 틀이 잘 안잡혀서,,

안녕하세요. 대학 진학을 앞둔 3학년입니다. 마지막 동아리 실험 보고서를 작성 기획중입니다 . 현재 곰팡이와 미생물을 한천 배지에 배양하고 그 위에 항생제 디스크를 올려서 4종의 항생제 중 어느 것이 효과적인지 지름의 길이를 통해 구하는 실험과 항생제 감수성 디스크에 포비든 요오드 용액과 소독용 알콜, 과산화수소수를 농도에 따라 다르게 3종으로 나눠서 소독제의 원리에ㅡ대해서 배운 내용을 적용하여 용액의 농도에 따른 효과를 비교해보는 추가적인 실험을 하려고 합니다. 이때 이러한 디스크들을 얼마나 올려놓아야할까요? 시간 제약이 있는 지라 지속적인 관찰이 불가능하여서 이렇게 질문 드립니다. 관련된 내용을 아셔서 답변해주시면 감사하겠습니다.

안녕하세요. 발효 커피에서 카페인을 추출하는 실험하고 있는 고등학생입니다. 생두를 발효한 후 DCM을 이용해서 카페인을 추출했는데요, 발효한 생두와 발효하지 않은 생두를 비교했을 때 발효한 생두의 카페인 함량이 낮게 나오는 것이 이론적으로도 맞고 실험도 잘 진행이 되었는데 왜 발효를 하면 커피의 카페인 함량이 줄어드는지 모르겠습니다. 왜 발효 커피에서 카페인 함량이 낮게 나오는 것인가요?? 친절한 답변 부탁드립니다ㅜㅜ

시중에서 구입한 유산균 분말의 효능을 알아보고자 디스크 확산법에 활용하기 위해 배양액으로 만들려 합니다.   실험이 먼저 유산균 분말을 생리식염수에 희석하고 mrs 고체 배지에 도말해서 배양시킨 후, 다시 균을 따서 액체 배지에 배양시키고 원심분리 후 상등액만 사용하려는데 방법이 옳은가요? (원심분리는 불필요한가요..?)   고등학생으로서 조사하면서 배우고 있어 꼭 도움 부탁드립니다.틀린 부분이 있으면 집어주시면 감사하겠습니다ㅠㅠ

안녕하세요, 고등학교에서 미생물의 DNA를 추출하는 실험을 진행하고자 해서 관련 자료들을 찾아보았는데, 실험에 쓰이는 Washing buffer 1, 2에 대한 정보를 찾을 수가 없어서 이를 알고 싶어 질문드립니다.

안녕하세요 실험을 준비하고 있는 학생입니다. 아는것이 많이 없어 최대한 조사하면서 공부하고 있는데 많이 막막해서 의견을 여쭤봅니다.. 저희가 시중에 판매하고 있는 유산균(분말, 캡슐 형태)을 활용해서 실제 썩힌 음식에서 채취한 식중독균을 억제할 수 있는지를 실험하고 싶습니다. 원래는 김치와 같은 식품을 쓰려 했는데 그 속에 유산균 말고도 다른 세균이나 등등이 영향을 줄 수 있다고 해서 시중의 최대한 순수한 유산균 가루를 쓰려고 합니다. (음식으로 해도 가능할까요?)   1. mrs 배지에 판매하고 있는 유산균 가루를 멸균수에 희석해서 도말해서 배양 2. 실제로 썩힌 음식을 멸균수에 넣어서 상등액을 일반 배지에 도말해서 배양 그리고 나서 디스크 확산법을 활용해 배양시킨 유산균이 일반 배지의 균을 억제하는지 확인을 하고 싶은데요...방법을 아무리 찾아봐도 정확히 모르겠습니다 ㅠㅠ Q. 1)여기저기 찾아보니까 mrs 배지에 유산균을 배양시키고 원심분리기 를 이용해서 상등액만 사용해라..는 말이 나오는데 액체 mrs 배지를 사용하는건가요..?? 배양액이 액체 상태의 mrs 배지인가요..? 2)배양시킨 유산균을 어떻게 액상으로 해서 식중독균에 실험하는지 잘 모르겠습니다. 3) 무균 상태 대신 알코올 램프로 대신해도 가능한가요? 4) 원심분리기가 없으면 가만히 오랜 시간동안 두고 상등액만 쓰는 건.. 너무 비과학적인 거겠죠?ㅠㅠ 5) 디스크 확산법에서 한 배지에 여러 유산균을 한 번에 여러 디스크로 테스트해도 되나요? 성장 억제 지대가 서로 막 겹치고 그렇진 않죠..?  너무나 기본적인 내용이라 죄송합니다...! 

안녕하세요. 학부연구생입니다. 오늘 클로닝을 하려고 LB배지를 만든 후에 엠피실린을 넣는 과정에서 100ug/ml 넣어야하는데 실수로 200ug/ml을 넣었습니다. 이 배지를 사용해도 괜찮을까요?  LB배지의 총 볼륨은 500ml이었습니다. 엠피실린 stock 농도는 100mg/ml이었습니다.  

아래에 제시된 reference에 따라, Sudan black B를 이용한 PHA생산 균주 스크리닝을 진행했습니다. 첨부한 사진의 결과가 positive인지 몰라서 질문드립니다.  이 결과 positive라고 볼수있을까요? Narayanan, M., Kandasamy, S., Kumarasamy, S., Gnanavel, K., Ranganathan, M., & Kandasamy, G. (2020). Screening of polyhydroxybutyrate producing indigenous bacteria from polluted lake soil. Heliyon, 6(10), e05381.Narayanan, M., Kandasamy, S., Kumarasamy, S., Gnanavel, K., Ranganathan, M., & Kandasamy, G. (2020). Screening of polyhydroxybutyrate producing indigenous bacteria from polluted lake soil. Heliyon, 6(10), e05381.