안녕하세요 실험 중인데 ss배지에서 자꾸 포도상구균이 자랍니다.. 처음에는 제가 실수로 배지만들 때 오토클레이브에 돌려서 그런 줄 알고 그냥 끓이기만 해서 배지 만들었는데 여기에서도 자라네요...뭐가 문제일까요 스톡이 잘못된건지ㅠ배지사진도 첨부할게요..

안녕하세요. 개미 체표면 미생물상 조사 전 변인통제를 위해 수용액 상태로 희석한 항생제를 개미 표면에 도포한 후 사육을 시작하려 하는데, 고민입니다.   1. Ampicillin, Rifampin, Kanamycin 중에 가장 범용성이면서 수용액으로 사용하기 적절한 게 뭘까요? 이것부터 너무 고민입니다.   2. 농도는 약 얼마 정도가 괜찮을까요? 개미가 소형종이라 농도 조절이 중요함은 알고 있는데, 어느 정도로 해야 할지가 막막하네요. (1% 리팜핀을 개미 표면에 처리한 논문은 있었는데, 그게 수용액인지 다른 용매에 녹은 건지 알수가 없네요.) 단위는 g/mL로 부탁드립니다.   3. ampicillin은 그람음성과 양성 모두 범용성이고, 리팜핀은 그람양성에 효과적인 것으로 알고 있는데, 수용액 상에서 두 항생제를 섞어서 개미 체표면에 도료하면 문제가 될까요?

안녕하세요 균을 계수를 했는데 이런 경우엔 어떻게 결과값을 내야하는지 궁금해서 여쭤봅니다!   g으로 채취한 샘플을 10배 희석해서 1ml을 취해 실험한 결과 10,000,000 CFU/g 나왔습니다.   만약에 표기값이 CFU/2g 일 경우 10,000,000 X 2 = 20,000,000  으로 계산하면 되는건가요? 

안녕하세요. 미생물 한도시험 진행 중인 대학원생입니다.  의약품 미생물 한도시험 중 특정미생물 시험에서 양성 판정되어                                동정시험을 진행하고자 하는데,  식품, 의약품 특정미생물 동정시험(녹농균, 황색포도상구균, 살모넬라, 대장균)              분석의뢰기관을 찾고있는데,  혹시 다른 곳들보다 많이 저렴한 분석기관이 있을까요? 추천해주시면 정말 감사하겠습니다. 

  안녕하세요, intestinal barrier관련하여 박테리아의 liver translocation을 확인하고자 CFU를 진행하였습니다. liver 0.15g 또는 kidney 1개를 통째로 1XPBS base 0.05% NP-40, 1%BSA solution 2ml에 갈았습니다. 이때는 dounce tissue grinder 를 사용하였습니다. (A,B pestle을 모두 사용)   이후 희석하지 않은 원액 100ul을 포함하여 serial dillution한 용액을 100ul씩 LB plate에 도말하였는데  12시간 정도 지나 확인하였을때 원액을 도말한 plate에서 조차 colony가 확인되지 않았습니다.   여러가지 trouble shooting을 해보려 논문도 찾아보고 이것저것 검색해보았는데 도저히 잘못된 점이 무엇인지 알기가 힘들어 이렇게 조언구하고자 질문드려봅니다.   대장균의 translocation을 확인하기 위함이라 LB plate를 사용한 것에는 문제가 없어보입니다. buffer역시 NP-40의 농도차이는 있어도 여러 논문에서 해당 buffer를 사용하는 것을 확인했습니다. 직접 연구실의 DH5a를 해당 buffer에 1/10 희석하여 도말해보아도 잘 자라는것을 확인 했습니다. buffer와 LB plate모두 아래 논문을 참고하였던 것입니다.  https://doi.org/10.1016/j.immuni.2018.12.020 dounce grinder를 사용하였을때 B pestle의 유격이 너무 좁아 bacteria가 죽었을까 생각도 했었는데, bacteria크기는 고작 2um이하이고, B pestle의 유격은 20um이라 문제 없을것 같습니다.   위의 논문의 figure7을 보면 정상 WT mouse에서도 CFU가 어느정도 측정되는것을 확인할 수 있는데, 저는 대조군과 실험군 모두에서 단 하나의 colony도 관찰할 수 없었어서... 조언 주시면 정말 감사하겠습니다. 긴글 읽어주셔서 감사드리며 좋은 한주 되세요

제가 푸른곰팡이를 배양하려 하는데 귤껍질이나 상한 음식에서 푸른곰팡이가 자라나면 포자를 루프로 때어내서 바로 배지에다가 접종시기면 될까요..?

안녕하세요. 개미 표면에 상주하는 박테리아 종류가 뭐가 있는지 알아볼려고 하는데요. 당면한 문제가 2가지 있습니다. metagenomics는 비용 문제로 쓰지 못하므로 관련 내용 언급은 삼가주세요.   1. 개미 표면에서 어떻게 혼합균주를 떼어낼 수 있을까요? 개미를 핀셋으로 잡아가지고 그대로 배지에 문지를 수도 없고 말입니다. 2. 1.을 해결하기 위해 한 가지 방법을 생각해 봤는데요, 다음과 같습니다. 희석한 생리식염수나 3차 증류수를 살짝 묻힌 멸균 면봉으로 개미 표면을 닦아낸 후, 그 면봉 끝을 액체배지에 담갔다가, 그 액체배지를 3일 후 다시 고체배지 위에 도말한다   인데... 뭔가 이래도 되나 싶기도 한 방법이라.... 이렇게 해도 될까요?  그리고 1. 질문도 답변 부탁드립니다.

TLC관련 질문 드립니다. 왼쪽은 쿠마린 이라는 스탠다드 물질의 농도를 잡기 위해 실험한것으로 0.2,0.02,0.002g/ml입니다. 오른쪽은 양쪽이 스탠다드이고 중간에 세개의 spot은 곰팡이의 배양액입니다. 배양액이다 보니 탄소원이 들어있어서 파란색으로 나온것인지 아니면 아예 다른물질들이 들어있어서 파란색으로 나온것인지는 잘 모르겠으나 실험 결과 상 쿠마린 스탠다드와 동일한 위치에 밴드가 없는 것으로 보아 이 배양 액에 쿠마린이 없는 것으로 판단해야 될지 모르겠습니다. 추가적으로 배양액 sample들이 전개 되지 않은것이 이동상이 잘못되어서 인지 아니면 sample에서 많은 물질들이 추출되어서 인지 잘 모르겠습니다.

Gluconacetobacter xylinus 를 키우고 있는데, 논문들을 찾아서 여러가지 배지조성으로 키워봐도 OD값이 전혀 안올라가고 있습니다. Cellulose 를 생성하는 균주라 접종 후 7일정도 되면 배양액 위로 두꺼운 막 형태의 cellulose gel 이 형성되는 것이 관찰되고 agar 배지에 도말해봐도 colony 가 나타나는 것으로 보아 균이 자라기는 하는 것 같은데, 논문들에서는 배양 시 균체 증식에 따라 OD 값이 증가한다고 되어 있는데 동일한 형태로 자라지 않아 pilot scale 진행을 못하고 있습니다. 배지조성이 문제인지, 다른 문제가 있을지 조언 부탁 드립니다.

오버나잇한 컬쳐를 50ml에 od=1.8당 1ml 희석하라고 하셨는데 od값이 1.6 나왔습니다 그럼 0.8ml 접종을 하면 되는게 맞는지.. 여쭤봅니다. 오디값이 더 낮게 나왔으니 더 많이 접종해야 할 것 같은데 계산을 잘 못하겠네요 ㅜ 실험이제 처음 시작한학부생입니다 ㅜ

두 곰팡이를 co-culture 한 배양액중에 tannic acid가 생성되었는지 확인하기 위한 목적으로 TLC실험을 진행하였습니다. 우선 tannic acid의 분자량은 1,701.19g/mol입니다. 아세톤으로 추출을 진행하였으며 농축한뒤 첫번째 이동상(CH3 Cl: ethyl acetate: formic acid=5:4:1)으로 tlc를 내려보았더니 거의 전개가 되지 않은것을 볼수있었다.그래서 이동상을 바꾸어 보았다.                             두번째 이동상은 에틸 아세테이트: 포름산: 아세톤: DW= 100: 11: 11: 27를 이용하였으며 그 결과 이전보다는 전개가 되었지만 실리카겔의 위쪽까지 전개되지는 않았다. 맨 왼쪽은 dw에 희석한 standard tannic acid이고 맨 오른쪽은 acetone에 희석한 tannic acid 이다. 질문사항은 1. 두개의 standard 중 어떤 용매에 희석한 standard가 더 적합한지?  2.sample이 전개되지 않은 이유가 이동상이 적합하지 않아서 인지, 분자량이 커서 인지 아니면 제가 따로 정제 과정을 거치지 않았기 때문인지 궁금합니다. 3.스탠다드와 샘플이 다른 속도로 전개된 이유에 대해서도 궁금합니다 4. 스탠다드의 농도 설정을 어떻게 해야될지  궁금합니다.

안녕하세요. 농도에 따른 물질 혼합물을 만들려고 하는데요. 각 물질을 혼합하면 농도가 달라질거 같아서 계산을 하려는데 이해가 잘 안가서 질문을 드리게되었습니다. 혼합하려는 물질 stock 농도가  VEGF-A (100ug/ml) 특정 물질 (80nmol 동결건조 상태 -> PBS 80ul를 추가하여 80nmol/80ul로 만들어서 1mM) 제가 Mixture를 4ml 만들기 위해 VEGF-A와 특정물질을 특정 농도가 되게 만들려고하는데요. 4ml을 만들기 위해 DW에 VEGF-A는 100ng/ml농도가 되게, 특정물질은 33nmol이 되게 DW에 혼합을 할건데 각각 얼마나 넣어야 하는지 계산을 잘 못해서 질문을 드립니다... 꼭 좀 도와주시면 감사드리겠습니다. 

유전자 분석 맡기기에는 가치가 조금 떨어지는 것 같아 먼저 여쭤봅니다. 하루만에 이렇게 자라는 균은 거의 바실러스균으로 보여지는데요. YPG배지에 Cycloheximide를 적당량 첨가하여 항생배지를 만들었는데 하루만에 바로 저런 형태의 균이 자라네요. 동그란 형태는 바실러스로 추정되는데, 실타래는 궁금해서 여쭤봅니다.  

현재 저희 실험실 deep freezer에 캠필로박터 stock이 있어서 이걸로 배양하려고 하는데요 실험 하기전에 동정 맡겨보려고 합니다  제가 궁금한 것은 식품공전을 보니까 modified campy blood free 한천 배지, abeta-hunt blood 한천배지, preston 한천배지 등등에서 분리배양한다고 되어있는데 NA배지에 배양하면 안되나요..?  NA 배지가 대부분의 미생물 배양할 때 사용한다고 하는데 캠필로박터는 호염성이고 미호기성세균이라 좀 까다로워서 안될지 궁금해서 여쭤봅니다  

ATCC에서 Staphylococcus aureus를 분양받아 계대 하려고 합니다.   1. 1차스톡(마스터스톡) 만들 시 균 수를 몇 승 정도 하는게 좋은가요? 2. 배양액과 글리세롤은 1:1 비율로 하는게 좋은가요? 아니면 8:2가 좋은가요?  

안녕하세요 제가 소독액성능시험을 해야하는데 균 컨트롤이 잘 안돼서요ㅠㅠ 혹시 소독액성능시험하시는 분들 중에 시험균주 어떻게 만들어서 사용하시나요? ㅠㅠ 저는 tsb 2ml에 균주 넣고 배양한다음에 생균수 얼만지 계산하고 다음날 그 균주로 희석해서 사용하는데 원하는 범위로 컨트롤이 잘 안돼서요ㅠㅠ