기본 lb broth 포도당 넣은 lb broth 젖당 넣은 lb broth 이렇게 세가지 배지에서 키운 대장균을 분광광도계로 생장곡선을 비교해볼 생각인데 기본 배지 조성을 1L의 LB medium 기준으로 10g의 트립톤과 5g의 효모 추출물, 10g의 NaCl 라고하면 포도당과 젖당은 어느정도 첨가해야 적절할까요?

imageJ로 세포 형광 정량하려고 하는데, 저같은 경우는 colocalization을 한거라, 같은 위치에서의 두 형광 시그널을 받아 비율을 보려고 하는데, (red대비 blue의 형광을 보려고합니다) Split channels->Threshold 설정-> Analyze particles를 사용하면 red와 blue의 point가 다릅니다.  저 위의 사진은 20x에서 찍은 셀을 제가 직접 누끼(?)딴건데 교수님께서는 정량하려면 최소 150 cell 직접 따거나 10x 5장으로 정량하라고 하십니다.   혹시 같은 위치에서 2가지 채널의 시그널을 정량할 수 있는 방법이 있을까요? 제가 일일히 따야하는걸까요? 도와주세요..

brdu를 하려고 하는데 1*10^4cell/100ul로 시딩을 해주고 있습니다. seeding 24시간 후에 starvation 24시간하고 treatment를 24시간을 하고 brdu를 합니다.  교수님께서 1*10^4cell/100ul로 시딩하면 실험하는 3일동안 너무 많이 증식하지 않을까 걱정하시더라구요. 근데 시딩 후 24시간후에 보면 20%정도 confluency 합니다.  starvation할때 medium에 1%의 penicillin streptomycin듣어가 있는 medium을 분주하고있습니다. treatment할때도 이 starvation medium에 처리하고 분주하고 있습니다. FBS가 들어가지 않은채로 2일이상있는 건데 cell 증식 할 수 있나요? 아니면 seeding후에 cell이 60% confluency하면 starvation을 하는게 맞을까요?  

alpha-MEM을 사용하는게 맞지만, 실험상 DMEM에서 분화가 된다면 DMEM으로 진행하는게 나은 상황입니다. 혹시 DMEM배지에서도 분화가 문제없이 되는지 해보신 분 있을까요?

암세포에 어떤 특별한 장치 (의뢰한 회사에서 제공)를 설치하여 암세포의 사멸정도를 확인하려는 실험을 하고 싶은데 대행 또는 용역 업체가 있나요..? 

안녕하세요 cell culture를 하는데 매번 cell이 한 쪽으로 쏠리는 경향이 자꾸 생기네요.. 이걸 differentiation 해도 되는건지 싶습니다. 한쪽은 60% 정도인데 한 쪽은 80~90% 정도 되어보이고.. 그냥 기다려야할지 고민이네요..

APC gene mutation 된 MACF10를 ctl 10A와 비교하여  b-catenin 의 nuclear translocation을 confocal로 live image 찍으려고 합니다. cell이 살아 있는 상태여야해서 fix는 안될 것 같은데 Ab가 nucleus안까지 들어갈까요? cell에는 damage 주지않으면서  Ab를 넣는 방법 뭐가 있을까요?   의견 부탁드립니다.

chicken 다리 근육에서 얻은 primary cell입니다. sorting은 percoll로 진행하고 있는데요   differentation 실험중에 있는데 Hores serum를 10%, 5%, 2% 로 각각 처리하면서 최적화중에 있습니다. 다른 논문들을 찾아보니 재각각으로 처리하는 논문들이 많고 해서 다양한 농도로 진행하고 있었습니다.   그런데 문제는 P0 즉 바로 얻은 cell에서는 따로 HS를 안쓰고 FBS에서 분화가 자연적으로 발생하는데 P1에서 HS 및 FBS로 분화 유도를 하면 myotube가 형성되기 전에 cell들이 막이 생기면서 바닥에서 떠오르면서 공처럼 뭉치고 있는데 왜 그럴까요?  

이번에 ROS 측정을 하려고 protocol을 확인중에 black plate clear bottom을 쓰라고 되어있더라구요   근데 랩실에서는 막힌거만 있고, 현재까지 FL 측정시에 문제 없었거든요 suspension cell 가지고 실험할거라서 clear bottom으로만 측정해야하나요?   다른랩에서 하는 걸 보니, clear bottom을 막아서 측정하시는 분도 계시던데.. bottom reading 하는게 아니면 clear를 안써도 되는 건가요? plate의 종류 때매 너무 헷갈리네요

고등학교 학생인데 젖당 오페론이 작용할 때와 억제될 때의 차이를 농도에 따라 비교해보려고 합니다 원래 대장균은 젖당이 아니라 포도당을 에너지원으로 쓰지만 포도당이 없을 때 오페론이 작동하여 젖당을 분해하는거니까 포도당만 있는 배지와 젖당만 있는 배지에 각각 대장균을 배양하여 젖당 오페론의 작용을 확인하고 두 에너지원 중 어떤 것이 더 효율적인지 실험을 통해 확인하고 싶습니다 (아마 포도당이겠죠?) 만약 포도당만 있는 배지에 있는 대장균과 젖당 대장균의 콜로니를 평판계수법으로 비교하면 더 콜로니가 많은 쪽이 에너지원으로 효율적이라고 볼 수 있는가요?

바실러스 튜링겐시스와 백강균을 액체 배양 하려고 하는데요.   진탕배양과 정치배양이 있잖아요   이 둘 중 어느 배양이 더 빠르고 안전한가요?   모두 호기성 미생물로 알고 있는데   호기성은 진탕배양이 맞다고 하는데    정치배양은 아예 안 되나요? 시간이 오래걸려서 안 되는건가요?   그럼 정치배양을 할 때 걸리는 시간을 어느정도 인가요?   진탕배양을 하면 또 미생물의 성상이 변한다는 말도 있어서   정확하게 알고 싶습니다ㅠㅠ

1. 유산균을 37도~40도에서 4시간동안 중탕으로 증식시킨 우유를 희석해서 mrs 배지에 spreading 평판 도말법을 이용해서 도말하고 뚜껑 닫히는 부분에 진공그리스를 바른 락앤락에 배지를 넣고 48시간 기다릴 계획입니다. 쓸 예정인 동결건조 유산균 제품은 유산균 100%로 혐기성, 호기성 유산균이 둘 다 있다는데요 제가 알기론 혐기성은 산소를 차단해줘야 하고 호기성은 산소 있어도 괜찮다고 알고있는데 진공그리스 발라서 산소 차단해줬으니까 배양 가능할까요… 2. 락앤락에 진공그리스를 어떻게 얼마나 무엇으로 발라야 할까요 정확하게 알 수 있었으면 좋겠습니다 3. 우유에 유산균 넣어서 요거트 만들 때 꼭 일반우유를 사용하라고 하는데 칼슘 우유나 저지방 우유 멸균 우유 유당분해우유 등은 발효가 잘 안된다고만 나와있고 그 이유 원인은 무엇인지 찾을 수가 없어요. 잘 아시는 분 설명해주시면 정말 감사하겠습니다. ㅠㅠㅠ 4. 유산균을 접종한 직후의 우유와 4시간 중탕 후의 우유를 도말할 계획인데 나중에 colony 수를 세어서 어떤 그래프나 표로 비교 분석하는 게 좋을까요 탐구의 목적은 유산균이 가장 많이 증식한 우유와 가장 증식하지 못한 우유를 찾고 그 우유의 다른 우유와의 차이가 되는 성분이 뭔지 조사해서 증식에 도움이 되는/억제가 되는 요소를 예측? 하려합니다.

배지가 굳어서 갈라진건가요? 배지를 새로 갈아줘아하나요?

흰색 가느다란 줄 같은게 보이는데 문제가 있는건가요? 배지를 갈아줘야하나요?

카테고리는 무시해주세요!!   바실러스 튜링겐시스와 백강균을 배양했을 때 각각 액체 배지인 LB 배지   MCM 배지에 배양하여 혼합하려고 하는데 혼합했을 때 서로의 배지가 영향을   주지는 않나요?

실험 관련 내용은 아니지만 여쭙고 싶은게 있습니다 암세포는 성장인자 같은 외부 신호가 없어도  G1기 검문 지점을 지날 수 있나요? 만약 그렇다면, 역으로 암세포가 G1기 검문 지점을 통과할 수 없게 만드는, 즉 G0 성장 정지 상태에 계속 머물게하는 외부 신호를 찾는 연구를 통해서 암세포가 분열할 수 없게 만들 수 있지 않을까요? 혹시 이러한 원리를 가진 항암 요법이 사용되고 있나요?