기본 lb broth 포도당 넣은 lb broth 젖당 넣은 lb broth 이렇게 세가지 배지에서 키운 대장균을 분광광도계로 생장곡선을 비교해볼 생각인데 기본 배지 조성을 1L의 LB medium 기준으로 10g의 트립톤과 5g의 효모 추출물, 10g의 NaCl 라고하면 포도당과 젖당은 어느정도 첨가해야 적절할까요?

암세포에 어떤 특별한 장치 (의뢰한 회사에서 제공)를 설치하여 암세포의 사멸정도를 확인하려는 실험을 하고 싶은데 대행 또는 용역 업체가 있나요..? 

안녕하세요 cell culture를 하는데 매번 cell이 한 쪽으로 쏠리는 경향이 자꾸 생기네요.. 이걸 differentiation 해도 되는건지 싶습니다. 한쪽은 60% 정도인데 한 쪽은 80~90% 정도 되어보이고.. 그냥 기다려야할지 고민이네요..

고등학교 학생인데 젖당 오페론이 작용할 때와 억제될 때의 차이를 농도에 따라 비교해보려고 합니다 원래 대장균은 젖당이 아니라 포도당을 에너지원으로 쓰지만 포도당이 없을 때 오페론이 작동하여 젖당을 분해하는거니까 포도당만 있는 배지와 젖당만 있는 배지에 각각 대장균을 배양하여 젖당 오페론의 작용을 확인하고 두 에너지원 중 어떤 것이 더 효율적인지 실험을 통해 확인하고 싶습니다 (아마 포도당이겠죠?) 만약 포도당만 있는 배지에 있는 대장균과 젖당 대장균의 콜로니를 평판계수법으로 비교하면 더 콜로니가 많은 쪽이 에너지원으로 효율적이라고 볼 수 있는가요?

바실러스 튜링겐시스와 백강균을 액체 배양 하려고 하는데요.   진탕배양과 정치배양이 있잖아요   이 둘 중 어느 배양이 더 빠르고 안전한가요?   모두 호기성 미생물로 알고 있는데   호기성은 진탕배양이 맞다고 하는데    정치배양은 아예 안 되나요? 시간이 오래걸려서 안 되는건가요?   그럼 정치배양을 할 때 걸리는 시간을 어느정도 인가요?   진탕배양을 하면 또 미생물의 성상이 변한다는 말도 있어서   정확하게 알고 싶습니다ㅠㅠ

1. 유산균을 37도~40도에서 4시간동안 중탕으로 증식시킨 우유를 희석해서 mrs 배지에 spreading 평판 도말법을 이용해서 도말하고 뚜껑 닫히는 부분에 진공그리스를 바른 락앤락에 배지를 넣고 48시간 기다릴 계획입니다. 쓸 예정인 동결건조 유산균 제품은 유산균 100%로 혐기성, 호기성 유산균이 둘 다 있다는데요 제가 알기론 혐기성은 산소를 차단해줘야 하고 호기성은 산소 있어도 괜찮다고 알고있는데 진공그리스 발라서 산소 차단해줬으니까 배양 가능할까요… 2. 락앤락에 진공그리스를 어떻게 얼마나 무엇으로 발라야 할까요 정확하게 알 수 있었으면 좋겠습니다 3. 우유에 유산균 넣어서 요거트 만들 때 꼭 일반우유를 사용하라고 하는데 칼슘 우유나 저지방 우유 멸균 우유 유당분해우유 등은 발효가 잘 안된다고만 나와있고 그 이유 원인은 무엇인지 찾을 수가 없어요. 잘 아시는 분 설명해주시면 정말 감사하겠습니다. ㅠㅠㅠ 4. 유산균을 접종한 직후의 우유와 4시간 중탕 후의 우유를 도말할 계획인데 나중에 colony 수를 세어서 어떤 그래프나 표로 비교 분석하는 게 좋을까요 탐구의 목적은 유산균이 가장 많이 증식한 우유와 가장 증식하지 못한 우유를 찾고 그 우유의 다른 우유와의 차이가 되는 성분이 뭔지 조사해서 증식에 도움이 되는/억제가 되는 요소를 예측? 하려합니다.

배지가 굳어서 갈라진건가요? 배지를 새로 갈아줘아하나요?

카테고리는 무시해주세요!!   바실러스 튜링겐시스와 백강균을 배양했을 때 각각 액체 배지인 LB 배지   MCM 배지에 배양하여 혼합하려고 하는데 혼합했을 때 서로의 배지가 영향을   주지는 않나요?

안녕하세요.  Skin에서 primary Endothelial cell 연구하고 있는 학생입니다.  Endothelial cell만 배양하고 싶은데 Fibroblast를 어떻게 제거 해야하는지 모르겠습니다.  계대하게 되면 Fibroblast가 우세하게 자라 문제가 되는 상황입니다. 배지는 Endothelial cell 전용배지로 키우고 FBS는 들어있지않습니다.  부착 시간으로 dish 옮겨도 보고, TE를 통해서 진행 해봐도 계속 Fibroblast는 남아있어요 ㅜㅜ MACS 통해서 분리해봐도 (밀테니 회사- 조언받아가면서 진행) 전혀 분리되지 않습니다.  이럴때 방법이 있을까요?

사람 조직에서 콜라겐 처리해서 세포 프렙 중인데요 세포 카운팅 시 RBC와 세포 구분이 잘 되나요?   트립판 블루 염색해서 카운팅 할때는 항상 동그랗고 살짝 노랗고 투명하고 빛나는? 모양이 세포라 생각하고 카운팅을 하는데 막상 디쉬에 깔아보면 비슷한 세포 수라도 디쉬에 붙어있는 세포가 확 차이가 나던데요 제가 카운팅한 세포에 RBC가 많이 포함이 돼서 그런걸까요? 모양으로 구분이 가능한가요 원래?

안녕하세요, 식품회사에서 계속 필름배지로 실험을 하다가 agar로 넘어왔는데, 일반세균과 진균은 괜찮은데 대장균군 실험이 애매하더라구요 ,,,,ㅠㅠ LB 배지 제조 시 한천가루를 섞어서 고체배지를 만들어서 공중낙하균 및 각종 미생물 검사를 하려고 하는데,  공중낙하균은 무조건 고체배지로 실험을 해야하는데 다른 세균이 섞이면 골라낼 수 있는지요, 혹은 공중낙하균 검사 장소를 피펫스왑해서 해야하는지,,,ㅋㅋ; 아무튼, 대장균군 외 다른 세균이 LB 고체배지에서 에서 자라거나 이를 골라낼 수 있는지 질문드립니다.

안녕하세요 이번에 제가 암세포 배양과 관련된 실험을 했습니다. 근데 제가 다니는 학교가 과학고나 영재고가 아니라서 실험 기구 등 제약이 있어서 원하는 결과를 얻지는 못했습니다. 실험의 실패 원인을 분석하는 와중에 혼자서 해결하기는 어려운 의문이 들어서 질문 올립니다.  실험의 내용은 대략 약물(영양제)이 배양된 암세포에 미치는 영향을 관찰하는 것입니다. 암세포는 동결되지 않은 상태의 MDA-MB-453 세포를 사용하였고, 세포 배양 방법은 계대배양과 비슷한 방식으로 cell culture flask에 배양했습니다. 질문의 내용은 다음과 같습니다. 1. 이산화탄소를 공급해줘야 하는 이유가 배양액의 pH 농도를 일정 수준으로 유지하기 위함이라고 알고 있습니다. 배양액의 pH 농도 변화가 세포의 생존을 크게 좌우하나요? 2. 배양 과정에서 너무 적은 부피의 conical tube를 사용한 탓인지 원심분리 후 pellet이 눈에 보이지 않았습니다. 그래서 불가피하게 ‘상층액을 suction하고 새로운 medium을 넣어 pipetting’하는 과정을 생략하고 바로 culture flask에 새로 제조한 배양액과 넣었습니다. - 원심분리 후 상층액을 제거하고 새로운 medium을 다시 넣어 재현탁 과정을 거치는 특별한 이유가 있을까요? - 2번 내용이 암세포가 flask에 자리 잡는 데에 큰 영향을 미쳤을까요? 3. 약물 투여 방식과 시점이 적절하지 않았던 것 같습니다. 정제를 직접 빻아 사용했기 때문에 크고 거친 입자가 배양액에 충분히 용해되지 않았습니다. 논문을 찾아보니 실제 연구에서는 동결 건조 분말 상태의 약물을 배양액에 용해한 후 사용한 것을 확인할 수 있었습니다. 보완해서 실험을 다시 설계해보고 싶습니다. 약물 투여 시 분말 형태의 약물을 사용하는 것 이외에는 다른 방법이 없을까요? 결과를 얻기 위해 약물 투여 시점은 어떻게 설정하는 것이 좋다고 생각하시나요?  4. 4번은 실험과는 상관없는 질문이긴 한데  암세포, 종양은 인체 내에서 혈관을 생성한다던가 아니면 다른 부위로 전이된다던가 해서 조직과 상호작용? 을 많이 하면서 성장하는 것으로 알고 있는데 암세포 관련 in vitro 실험에서는 in vivo 실험에 비해 생체 조직과의 관계성이나 어떤 작용 매커니즘을 알기에는 어려움이 있지 않나요? 그저 '암세포'자체 와의 관련성을 확인하는 것인가요? 제 질문 내용이 미흡할 수 있겠지만, 답변해주신다면 정말 큰 도움이 될 것 같습니다. 감사합니다!      

안녕하세요, 세포 실험하는 학생입니다. p19cl6 Cells로 실험을 계획하고 있는데 혹시 해당 세포를 분양해주실 분이 계실까요? 만약 있으시다면 쪽지 부탁드리겠습니다ㅠㅠㅜ   감사합니다.   

여러 조건(빛, 온도, 습도)들이 곰팡이 생장에 어떤 영향을 미치는지에 대해 실험을 계획 중에 있습니다 당초 계획은 빵에 핀 곰팡이를 멸균된 이쑤시개를 통해 PDA배지에 옮겨 PDA배지 전체로 퍼질 때까지의 기간을 측정한 후(대조군), 조건을 설정하여 곰팡이를 배양해 곰팡이가 PDA배지 전체로 퍼질 때까지 걸리는 시간을 측정하여 대조군에서의 기준 시간과 비교하는 것을 계획했었습니다 저희가 이 실험을 진행하면서 생겼던 문제점과 질문을 말씀드리겠습니다 1. 저희는 곰팡이를 멸균된 이쑤시개로 빵을 콕 찌른 다음에 PDA배지에 살짝 문지르는 방법으로 옮겼는데요. 이경우 곰팡이가 도말된 곳에서만 곰팡이가 자랐습니다. 왜 이러한 현상이 생기는지와 이를 보완할 수 있는 방법이 있을까요? 2. 온도와 습도를 조절하여 실험을 진행하고 싶은데, 고등학생이다 보니 많은 실험 기구가 있지 않습니다. 20도 이상 온도 조절이 가능한 인큐베이터 하나 뿐입니다. 온도 변인을 30도, 4도, 영하 20도 (각각 인큐베이터, 냉장고, 냉동고 온도와 비슷하기 때문에)로 계획했었는데요. 각각의 경우에 습도를 일정하게 만들어줄 수 있는 방법을 모르겠습니다. 고가의 습도 조절기를 사용하지 않고 습도를 조절할 수 있는 방법이 있을까요? 3. 일반 빵에도 곰팡이를 옮겨 생장 정도를 측정하려 하는데, 곰팡이를 옮겨도 일반 빵에서 더 이상 생장이 일어나지 않습니다, 이러한 현상이 나타나는 이유와 그 보완책에는 무엇이 있을까요?

질소탱크에 질소 잔량 체크할때 보통 inch로 측정하나요? 피딩 날짜는 무얼 말하는 건지 알 수 있을까요? 감사합니다. 

Urine sample을 받아 Urine cell로 만들어 stock 해둔 cell을 thawing 하여 실험을 진행하려합니다.   thawing을 하고난 후 다음날에는 cell이 많이 불어서 정상적으로 잘 자라서 media change만 해주고 다음날 확인했더니 contam이 되어 다 죽어있더라구요.   incubator에는 urine cell과 fibroblast cell 동시에 키우는데 fibroblast cell은 건강하게 아무문제없이 잘 자라는데 urine cell에서만 공통적으로 contam이 확인이 됩니다. 지난번에 thawing을 했던 동일한 cell stock에서는 이러한 문제가 없었는데... 도데체 뭐가 문제일까요? 안전하게 incubator를 Auto돌려서 멸균을 다시 하고 진행하는게 답일까요?ㅠ 여러 문헌을 찾아보니 Urine cell이 baterial contam이 잘 일어난다고는 하는데, 이전에는 문제없던 stock이 최근들어 반복적으로 이런 현상이 나타나네요 ㅠㅠ   도와주세요 ㅠ

저희 실험실에선 부착형 암세포를 주로 키우고 있습니다. 그러다가 이번에 새로 HeLa cell을 좋은 곳에서 받아왔습니다. 잘 가져와서 바로 풀었는데 이틀이 지나도 cell이 잘 붙지 않습니다... media는 DMEM high glucose에 10% FBS, 1% P/S를 쓰고 있습니다. 질소에 얼려있던 것을 녹인건데 너무 많이 안 붙어서... 두개를 받아와 하나는 아예 안 붙어 다 버리고 마지막입니다ㅜㅜ 혹시 media가 안 맞는 것일까요? 다뤄보신 분의 조언이 필요합니다..

토착미생물 배양시 밥이나 감자 콩이 들어가는데 이유가 당밀이나 전분을 대신하기 위한것 맞나요  

대학원 반학기차인데 cell seeding 계산하는 게 너무 어려워용 ... 만약에 cell counting 하였을 때 5.86x10^6 이라면 586x10^4 로 바꿔서 계산 하는 게 편하다고 하는데 필요한 cell 양이 5.0x10^4 이고 well 갯수는 10 이면  한 well 당 500ul 씩 넣어야한다면 cell 포함한 media 몇이랑 dmem 몇을 넣어야 할까용 ,,, 어렵네용 도와주세용 ㅠㅠ !!

안녕하세요.! 궁금한게 있어서 글 올리는데요 cell 계대하는데, 모아서 센트리 1000에 돌렸는데 pellet이 적으면 이상한건가요?? cell을 깨끗히 다 떼내질 못해서 양이 적은건가요???