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질문/투표/프로토콜 등록
Q. DTR mouse에 대해 알려주세요!!
안녕하세요! 학부 연구생입니다. 지금 연구참여하고 있는 랩실에 MGL-2 DTR 마우스가 있는데요. 이 마우스는 MGL-2도 발현하고 DTR도 발현하는 것인가요? 아니면 MGL-2 대신 DTR을 발현하는 것일까요?   구글에 아무리 찾아봐도 정확한 답은 찾기가 어려워서 이 곳에 질문드립니다.. 제발 알려주세요...!!!
회원작성글 paca  |  11.29
Q. IF double staining 관련 질문
두가지 primary 항체를 써서 각각 다른색으로 labeling하려고 하는데요, 만약에 다른 1차항체 두개가 같은 단백질에 결합할 수 있으면 두 색으로 모두 염색되는게 아니라 결합자리를 경쟁하게 되어서 하나의 색으로만 염색이 되는건가요?  예를들어,   1차항체 #1 (초록색): A단백질, B단백질   1차항체 #2 (빨간색): B단백질, C단백질 위와 같이 반응시키면, B단백질은 초록색/ 빨간색으로 둘 다 염색이 되는게 아니라 둘 중 하나의 색으로만 염색되는건가요...?
회원작성글 snkd  |  11.29
Q. IHC .. Dehydrate 질문드립니다.
안녕하세요    최근들어 조직염색을 하고 있는 대학원생입니다.   조직을 염색하는데 프로토콜마다 좀 다른것같아서요..     파라핀 조직이고 deparaffin 하는건 알겠는데 (자일렌-알콜 고->저)   Dehydrate 할때 알콜 저->고농도 하고 자일렌하고 끝내는 것도 있고 (ex>H&E) 그냥 absolute alcohol 으로 끝내는 것도 있는데..(ex>sirius red) 이게 무슨 차이가 있는건지 궁금합니다.   DAB염색시 자일렌을 해주는게 좋은가요?(이것도 프로토콜마다 달라서..)     그저 키트마다 다른건지.. 마지막에 자일렌을 무조건 해주는게 좋은건지 궁금합니다.   그리고 absolute alcohol으로 끝냈을때 마운팅은 지용성으로 해야하는지 수용성으로 해야하는지도 궁금해요...         감사합니다!
회원작성글 찌랭이  |  11.28
Q. 현미경 으로 동물조직을찍을때
현미경에서 동물조직을 찍을때, DAPI와 594 red signal을 확인을 해야하는데요. 컨트롤(약물을 처리하지 않은 샘플)을 우선 찍으려고 아이스피스로 봤을때 잘보이는데, 현미경컴퓨터상에서는 흐리게 보여 레이저 파워를 조절한다면, 그 다음 대조군(약물처리한 샘플)에서는 DAPI 레이저 조절를 하면 안되는건가요? 차이를 비교하려면 어떻게 조건을 잡아야하는지 궁금합니다. ㅠㅠ 초보라 많이 어렵네요
회원작성글 초코파티  |  11.25
Q. IF permeabilization 생략?
IF에서 membrane protein & intracellular protein을 둘다 labeling하는 항체를 사용하려고 하는데요. 너무 강하게(?) permeabilization하면 membraine protein이 망가질 우려가 있지 않을까 싶어서 검색하다가  antibody dilution을 PBS-Trition으로 하니까 permeabilization 과정을 생략하는 사람도 있는 것 같아서요. 혹시 이렇게 해보신 분 계신가요?  아니면 membrane protein & intracellular protein 동시에 labeling하신 분 어떻게 진행하셨는지 여쭤보고 싶습니다. 
회원작성글 enedd  |  11.22
Q. autotaxin
논문 공부하다가 이해가 안가는 부분이 생겨서요... ATX-LPA 신호 전달과정에 대한 inhibitor에 대한 효과를 나타낸 result입니다 ATX+LPC 자극 시에 왜 LPA 수용체 발현이 감소하는 건가요? inhibitor 처리하면 증가하는 이유도 알고싶습니다...  
회원작성글 소로리  |  11.21
Q. 면역형광염색 IF 1차, 2차항체 확인 부탁드립니다 + 관련질문
3종류의 다른 단백질의 발현을 확인하고 싶어서 triple로 IF를 진행하려고 합니다.  처음 해보는거라 불안한데 물어볼 선배가 없어서요ㅠㅠ 도움 부탁드려요.   <primary antibody> 1. Mouse 유래 2. Rabbit 유래 3. Gout 유래   <secondary antibody> 1. Donkey anti-Mouse IgG (H+L) Highly Cross-Adsorbed Secondary Antibody, Alexa Fluor™ 488 2. Donkey anti-Rabbit IgG (H+L) Cross-Adsorbed Secondary Antibody, Alexa Fluor™ 594 3. Donkey anti-Goat IgG (H+L) Highly Cross-Adsorbed Secondary Antibody, Alexa Fluor™ 647   + 추가적으로 질문드립니다. 위와 같이 염색진행 후, 동일한 sample에서의 ER이나 mitochondria와 같은 subcellular 구조를 염색해서 단백질 위치를 확인하려고 합니다.  연구실 항체리스트를 보니까 subcellular marker의 primary antibody가 전부 rabbit 유래인데, 위의 2번째 단백질 primary antibody를 rabbit 유래를 썼는데 또 다음 염색에서 동일한 host꺼를 사용해도 되는지 궁금해서요ㅜㅜ 사용해도 된다면, secondary antibody 선택 시 alexa 488, 594, 647을 제외한 색의 anti-rabbit 항체를 선택하면 되나요?
회원작성글 세포실험초보입니당  |  11.18
Q. phospho antibody 관련 질문드립니다
항체관련해서 질문드립니다.   만약에 ERK1/2 안티바디라면   p-ERK1/2와 ERK1/2 모두가 detection 되는건가요??   아니면 인산화 되지않은 ERK1/2만 확인되는건가요?
회원작성글 깍뚝이  |  11.17
Q. 감염재생산수에 대해 질문이 있습니다
안녕하세요 탐구 활동을 기획 중인 고등학생입니다. 얼마 전 미생물 관련 책에서 재생산수에 관한 내용을 읽고 후속활동으로 어떤 범위에서 감염재생산수가 가장 치명적일지에 대해 탐구하는 활동을 기획하게 되었습니다. 감염재생산수가 너무 높으면 숙주가 죽어버려 바이러스가 효율적으로 기생할 수 없고 너무 낮으면 기생할 수는 있지만 인간에게 치명적이진 않을 것이며 그렇기 때문에 일정 범위의 감염재생산수가 가장 치명적 것이라는 것이 이번 탐구활동의 배경이 된 저의 생각입니다. 그런데 이 활동에 앞서 전문가 분들께 제 생각을 검증 받고싶습니다. 관련 내용에 대한 지식이 부족해서 제가 가진 의문이 잘못된 이해에서 비롯된 것인지 궁금합니다.   
회원작성글 forespring..  |  11.08
Q. masson's trichrome 염색 관해 질문드립니다.
안녕하세요 지금 학부연구실을 다니고 있는 학생입니다. masson's trichrome 염색을 진행을 하고 있는데, 폐에서는 collagen 염색이 너무 안돼서 어떻게 해결을 해봐야할지 여쭤봅니다. 염색을 너무 적게하는가 싶은 생각이 들지만, aniline blue solution에 담구는 시간은 40분 정도 담궈 둔 상태에서 염색을 진행을 한 뒤, 그 후 D.W에 10회 tapping을 진행 한 뒤 1% acetic acid에 10분 가량 더 담군 후 dehydration 과정을 거치고 70%~자일린까지, 여기서 문제가 될만한 점이 있는지 아니면 수정을 해야할 점이 있는지 여쭤봅니다.
회원작성글 EWSN  |  11.08
Q. 염소에서 얻은 2차항체가 토끼 혈청의 모든 IgG와 결합하는 이유 설명해주세요
2차 항체 (HRP conjurated goat anti-rabbit IgG)는 염소에서 얻었다고 하는데, 이 항체가 토끼 혈청의 모든 IgG와 결합하는 이유가 뭐죠..? ㅜㅜ 아시는 분 좀 설명해주세요 
회원작성글 she'sreal  |  11.06
Q. ELISA 실험에서 450nm 파장을 사용하는 이유가 뭐죠?
고등학생입니다 흡광도 측정할 때 450nm 의 빛을 사용하는 이유가 뭔가요? 
회원작성글 she'sreal  |  11.05
Q. western blot caspase-3 관련 질문
웨린이가 웨스턴 고수님들께 여쭙고자 고민 끝에 질문 올리게 되었습니다. 혹시 Caspase-3 가 아주 잘 나오더라도 cleaved caspase-3 가 안나오는 경우가 있을까요?? Cell signaling 의 caspase-3 #9662 를 사용하여 cleaved form 과 동시에 확인하려고 하는데, proform 은 아주 확연하게 차이가 나는 반면 cleaved size는 아주아주 깨-끗 하게 나오는 상황입니다.. lysate 양도 늘려보고 1'Ab binding time 도 늘려보았는데 잘 안나오네요.. 1'Ab 비율을 늘려보는 시도는 아직 해보지 않았지만 아주 깨끗하게 cleaved band 자체가 뜨지 않는 상황이라 의미가 있을 지 잘 모르겠습니다ㅜㅜ 웨린이를 도와주세요 고수님들
회원작성글 대하권생  |  10.31
Q. 의문점 해결
생명과학 1 문제 변형인데요, 아래 문제의 정답은 (2)번, ㄷ이라고 합니다만 혹시 ㄴ도 포함되지 않나요? 생명 알 못입니다. 알려 주세요 -.,-;;  (문제) 다음은 항원 A와 B에 대한 생쥐의 방어 작용 실험이다.  [실험 과정] (가) 유전적으로 동일하고 A와 B에 노출된 적이 없는 생쥐 ㉠~㉤을 준비한다. (나) ㉠에게 A를 주사하고 일정 시간이 지난 후 ㉠에게서 혈청과 A에 대한 기억 세포를 분 분리한다. ㉡에게 B를 주사하고 일정 시간이 지난 후 ㉡에게서 혈청과 B에 대한 기억 세포를 분리한다. (다) ㉢에게 ㉠에서 분리한 혈청 X를, ㉣에게 ㉡에서 분리한 혈청 Y를, ㉤에게 Z를 각각 주사한다. Z는 A 또는 B에 대한 기억 세포 중 하나이다. (라) 일정 시간이 지난 후 (다)의 ㉢~㉤에게 A와 B를 동시에 주사한다.   [실험 결과] 그림은 ㉢~㉤에서 측정한 항체 P의 혈중 농도 변화를 나타낸 것이다. P는 A에 대한 항체와 B에 대한 항체 중 하나이다.         이에 대한 설명으로 옳은 것만을 <보기>에서 있는 대로 고른 것은? (단, 제시된 조건 이외의 다른 조건은 동일하며, 면역 반응은 정상적으로 일어난다.)  <보기> ㄱ. 구간 I은 A에 대한 항체의 농도 변화량이다. ㄴ. 구간 II와 III에서 모두 비특이적 방어작용이 일어났다. ㄷ. 구간 IV에서 B에 대한 2차 면역 반응이 일어났다. ⓵ ㄱ                ⓶ ㄷ                       ⓷ ㄱ, ㄷ ⓸ ㄴ, ㄷ           ⓹ ㄱ, ㄴ, ㄷ      
회원작성글 uyunamu  |  10.26
Q. ELISA 실험에서 positive control, negative control의 역할이 이해안갑니다
Sandwich ELISA 실험중인데 전문적 지식이없어서인지 이론이 이해안가는부분이 있습니다   positive control과 negative control이 왜 필요한지..역할이 어떻게 쓰이는지 정확히 이해가 안갑니다...   그냥 실험 후 샘플 OD측정해서 샘플의 OD값이 정해둔 cut-off값 이상인지 이하인지만 확인하면 되는거 아닌가싶은데..   positive control과 negative control이 왜 필요한지를 모르겠습니다 ㅠ  
회원작성글 위어우보으  |  10.24
Q. Sandwich ELISA 실험하는데 표준물질 OD가 plate별로 다른 이유가 뭘까요?
Sandwich ELISA 실험중입니다   같은 농도와 양의 항원,항체인데..   왜 PLATE마다 표준물질의 OD값이 다를까요?   표준물질은 동일한거고 PLATE도 동일한 방법으로 제작한건데요   예를들면   PLATE 1,2,3  = 3개가있다고 하면   PLATE1은 표준물질의 농도가 1,3,5,7,9 PLATE2는 표준물질의 농도가 2,4,6,8,10 PLATE3은 표준물질의 농도가 5,7,9,11,13   이렇게 나옵니다   plate 1,2,3 모두 1,3,5,7,9이던...5,7,9,11,13 이던.... 좀 비슷하거나 동일하게 나오는게 아니고 다르게나오네요   OD값은 다 다르지만  실질적으로 표준물질 농도에따라 커지는 비율은 2씩 커지는거라 비율적으론 문제가안되는데요..   표준물질,항원,항체 모두 다 똑같은건데 PLATE별로 OD값이 다르게 나오는 이유가 궁금합니다...    
회원작성글 위어우보으  |  10.21
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