안녕하세요! 학부 연구생입니다. 지금 연구참여하고 있는 랩실에 MGL-2 DTR 마우스가 있는데요. 이 마우스는 MGL-2도 발현하고 DTR도 발현하는 것인가요? 아니면 MGL-2 대신 DTR을 발현하는 것일까요?   구글에 아무리 찾아봐도 정확한 답은 찾기가 어려워서 이 곳에 질문드립니다.. 제발 알려주세요...!!!

논문 공부하다가 이해가 안가는 부분이 생겨서요... ATX-LPA 신호 전달과정에 대한 inhibitor에 대한 효과를 나타낸 result입니다 ATX+LPC 자극 시에 왜 LPA 수용체 발현이 감소하는 건가요? inhibitor 처리하면 증가하는 이유도 알고싶습니다...  

안녕하세요! FACS를 처음 공부해보는 석사생입니다!ㅠㅠ 저는 HL-60(Human) cell을 이용하여 CD11b를 FACS를 이용하여 측정하려하는데요! 저희 연구실에서는 mouse sample을 2.4G를 이용하여 blocking을 해주었는데 찾아보니까 mouse fc receptor blocking용으로만 사용하는거 같아서요ㅠㅠ human cell sample에서는 어떻게 blocking을 진행하나요ㅠㅠ,, 찾아보니 BSA를 이용하여 blocking해준다는데 이게 맞나요?,, 다 말이 달라서요,, 아니면 2.4G를 human sample에 사용해도 되는건가요? 논문 찾아보면 따로 blocking 했다는게 따로 명시가 안되어 있어서요,, 일단 저는 pellet 모아서 FACS buffer(0.5% BSA in PBS) 90ul+Ab 10ul을 넣은 후 4도에서 30분 둔 후, FACS buffer로 3회 wash를 진행하고 FACS를 찍어볼까 합니다,, Human cell pellet sample에서 blocking을 보통 어떻게 하나요?ㅠㅠ 위에 적은 protocol대로만 진행해도 괜찮을까요???? 도와주세요,,,,,,,,,,,,,,,,

안녕하세요! 이제 막 실험 배운지 3주 된 생초보입니다.. 오늘 실험을 끝내고 베타액틴 찍어보았는데.. 다른 분들 결과 보면 일직선으로 정말 이쁘게 나오더라고용  그치만 저는 왜 일직선이 아니고 갈수록 휘어지게 나온 것일까요? 결과 해석하는 데에는 문제없지만 그래도 의문이 들어 질문 올립니다. 이 문제에 대해 함께 고민해주신다면 정말 감사하겠습니다.

실험실에 새로 항생제를 구입해 항생제 stock을 만들어야 합니다.  구입한 항생제 중 Penicillin G, potassium salt와 Tetracyclin HCl, Vacomycin HCl이 있습니다. 근데 이 항생제들의 MIC 관련 references를 찾지 못하였습니다.  이 항생제들의 MIC가 각각 Penicillin G, Tetracycline, Vacomycin의 MIC와 큰 차이가 존재하나요?

qPCR 프로토콜좀 알려주실 수 있나요. 아무리 찾아봐도 못찾겠습니다. 제가 찾는 방법을 잘 모르기도 하구요... 프로토콜을 찾을 수 있는 사이트라도 알려주시면 감사하겠습니다.

마우스 단백뇨를 측정하려고 하는데 BCA측정법으로 측정이 될까요?? 대부분 어떻게 측정하시나요..?

간질환 유도 모델 mouse의 간에서 염증반응, 지방증, 섬유화 등등을 확인하고자 합니다. 1. 우선 H&E Staining을 하려고 하는데 간질환 유도 모델 mouse의 간 left lobe에서 CV와 Portal triad가 보이도록 cutting한 단면을 보면 될까요? 2. left lobe가 아닌 다른 lobe에서 확인해야할까요? 처음 하는 실험인데 알려주시면 감사하겠습니다ㅜㅜㅜㅜㅜ

안녕하세요 NF-κB관련 연구를 이제 막 시작한 석사과정 학생입니다. NF-κB의 subunit인 p65(RelA)-/- 또는 p50 -/- mouse를 보유하고 계신 연구팀이 계신지요? 저널을 검색해서 백방으로 찾아보고 있는데 여의치 않아 이 곳에 도움 요청드려봅니다. 혹시 계시다면 덧글 부탁드리겠습니다. 즐거운 주말 보내세요 감사합니다~!

안녕하세요, 석사 2학기차에 접어든 대학원생입니다. 저는 Anti tumor immunity 관련한 연구를 진행하고 있습니다. 아직 search 능력이 많이 부족하여 실험 계획을 짤 때 어려움이 많은데요, 보통 anti tumor immunity 를 볼 때 , 어떤 marker 나 실험을 이용하는지 아직까지 감이 잘 잡히지 않습니다. 제가 찾아본 바로는 tumor cell killing 과 관련된 cytokine(IFN-gamma, Granzyme B등,,) secreation을 FACS 혹은 ELISA 로 확인하거나, Chromium-51 release assay(해당 실험은 상당히 오래전 방법인 것으로 보이긴 합니다..) 정도가 있습니다. 혹시 앞의 방법들 외에, Anti tumor immunity 를 확인할 때 많이 사용하는 방법론이 있을까요? 그리고 어떤 식으로 reference를 search 하는 것이 좋을지도 조언해주시면 정말 감사하겠습니다. 선생님들의 많은 의견 부탁드립니다.

보통 면역세포에서 여러 개의 항체를 보려고 FACS할때 compensation을 진행하는데, cancer cell line으로 FACS를 할 경우 교수님 말씀으로 어떤 이유 때문에 compensation을 할 수가 없다고 하는데요. 이러면 compesation을 못하는 만큼 각각 따로 해줘서 FACS tube가 너무 많이 나오게 돼요ㅠㅠ.. 혹시 암세포 FACS 할때 compensation 하는 방법이나 해결책이 있을까요?

prism program을 이용하여 survival 그래프를 그리고 있는데요. 50%에서 끝나는데, y축 값 0 까지 line을 어떻게 만드는지 아시는분 계신가요? 이것저것 눌러봐도 잘 안되서 올리게 되었습니다. ex. 파란선 그룹은 28일에 모두 죽었으니까 20과 40 사이에 파란색 라인이 생겼으면 합니다. 통계프로그램이라서 그런지 단순하게 data  부분에 0을 추가하면 제가 원하는 그래프를 못얻더라구요.ㅠ   이 프로그램을 조금이라도 아시는 분들은 답변 해주시면 정말 많은 도움이 될 것 같습니다. 미리 감사합니다!   아래 그래프 처럼 하고싶습니다 .

calcein 이용했구요 target은 K562 입니다 원래 10:1에서 60-70%는 나와야하는데 값이 왜이렇게 낮게 잡혔을까요 실험 결과에 대한 고찰을 써야하는데 어떤 부분이 문제였는지 감이 안잡혀요ㅠ

염증모델 실험위해 쥐에게 LPS를 i.t 주사하고 있는데  예비 실험에서 건강에 문제 없이 충분히 생존 가능한 농도 확인하고 실험을 진행하였는데 본 실험 들어오니 갑자기 쥐들이 자꾸 죽기 시작하네요   마취제로는 Avertin 사용 중이고 LPS 농도도 다른 문헌과 비교했을 때 그리 높지 않은, 오히려 낮은 편인 농도로 주사 중입니다. 죽은 쥐들 해부했을 때 복숙 차있는 등 염증성 지표가 보여 아마 급성으로 염증이 심하게 올라와 죽은거 같은데   지금 생각으로는 Avertin이 초기 염증 반응을 강화시킨다는 문헌이 있어 마취제로 Avertin을 사용하여 이런 일이 발생한 것인가 싶은데 혹시 Avertin 사용하는 연구실에 계신 분 있으시면 비슷한 일이 있으셨는지 여쭤보고 싶습니다. 

암이나 염증 관련 세포실험할 때 종종 세포를 키운 후 세포에서 나온 물질이 있는 media에 다시 세포를 키우는 경우가 있는데 이를 실험적 명칭으로 뭐라고 하나요? 그리고 이러한 실험을 왜 하는 건가요? 

안녕하세요. 이번에 Multiplex cytokine assay 를 진행하려고 합니다. 외주 업체에 맡겨서 진행할까 하는데, 혹시 많이 사용하시는 업체가 있을까요?  제가 찾아본 곳으로는 래비스고마, 코스모진택 과 같은 업체가 있고, 웅비메디텍에서도 Luminex 분석을 하는 것 같습니다. 많이 사용하시고, 분석을 잘 하는 업체가 있다면 추천해주시면 감사하겠습니다!!

안녕하세요.  FACS 관련하여 질문드리고 싶습니다. permeabilization 단계에서 Foxp3 buffer 를 사용하게 되는데 이 단계부터 상온에서 incubation 을 해야하는 이유를 잘 모르겠습니다.  바쁘시겠지만 알려주신다면 정말 감사드리겠습니다.

안녕하세요 초보 대학원생입니다.   xenograft tumor로 IHC DAB를 진행하는데 갑자기 염색이 너무 이상하게 되서요ㅠㅠ  첨부한 사진처럼 너무 진하게 나오는데 DAB 발색이 너무 진해서 그런걸까요 다른 문제일까요...ㅠㅠ   조직은 oct compound로 얼려서 cryosection으로 진행하였습니다.   HIF-1a, CD31을 염색하였는데 모든 슬라이드가 저러는데 문제점이 무엇일까요ㅠㅠㅠ

NK92와 제대혈에서 직접 분화시킨 NK의 차이는 뭐죠 media도 다르던데 둘의 차이가 궁금합니다ㅠㅠ  

사람조직에서 세포 추출 후 Facs 분석 예정인데요 안티바디는 3가지 사용하려고 하고 Facs 분석의 목적은 과연 이 조직에서 추출한 세포가  우리가 생각한 그 세포가 맞냐 아니냐 확인만 하려는건데요 분석에 필요한 세포 수가 250만 정도는 있어야 하고   보통 당일 나온 조직받아서 실험해보면  세포가 적게는 80만 많게는 500만까지 추출되는데 대부분이 150만 정도 밖에 안나와요 아무래도 분석 당일 세포 수가 부족할 것 같은데 같은 사람에서 나온 세포가 아니어도 될까요? 같은 부위 조직인데 A라는 사람과 B라는 사람에서 나온 세포 서로 섞어도 될까요?