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BioLab 정래동 교수
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 카테고리: 전체 > Immunology > etc.
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Q. FACS cancer cell line compensation
보통 면역세포에서 여러 개의 항체를 보려고 FACS할때 compensation을 진행하는데, cancer cell line으로 FACS를 할 경우 교수님 말씀으로 어떤 이유 때문에 compensation을 할 수가 없다고 하는데요. 이러면 compesation을 못하는 만큼 각각 따로 해줘서 FACS tube가 너무 많이 나오게 돼요ㅠㅠ.. 혹시 암세포 FACS 할때 compensation 하는 방법이나 해결책이 있을까요?
회원작성글 개똥이야  |  08.11
Q. Prism survival 그래프 값 수정
prism program을 이용하여 survival 그래프를 그리고 있는데요. 50%에서 끝나는데, y축 값 0 까지 line을 어떻게 만드는지 아시는분 계신가요? 이것저것 눌러봐도 잘 안되서 올리게 되었습니다. ex. 파란선 그룹은 28일에 모두 죽었으니까 20과 40 사이에 파란색 라인이 생겼으면 합니다. 통계프로그램이라서 그런지 단순하게 data  부분에 0을 추가하면 제가 원하는 그래프를 못얻더라구요.ㅠ   이 프로그램을 조금이라도 아시는 분들은 답변 해주시면 정말 많은 도움이 될 것 같습니다. 미리 감사합니다!   아래 그래프 처럼 하고싶습니다 .
회원작성글 I아니  |  08.03
Q. NK92 cytotoxicity 데이터 해석 부탁드립니다ㅠㅠ
calcein 이용했구요 target은 K562 입니다 원래 10:1에서 60-70%는 나와야하는데 값이 왜이렇게 낮게 잡혔을까요 실험 결과에 대한 고찰을 써야하는데 어떤 부분이 문제였는지 감이 안잡혀요ㅠ
회원작성글 카리나  |  08.03
Q. 마우스에 LPS 주사 후 죽는 것에 대해 질문드립니다.
염증모델 실험위해 쥐에게 LPS를 i.t 주사하고 있는데  예비 실험에서 건강에 문제 없이 충분히 생존 가능한 농도 확인하고 실험을 진행하였는데 본 실험 들어오니 갑자기 쥐들이 자꾸 죽기 시작하네요   마취제로는 Avertin 사용 중이고 LPS 농도도 다른 문헌과 비교했을 때 그리 높지 않은, 오히려 낮은 편인 농도로 주사 중입니다. 죽은 쥐들 해부했을 때 복숙 차있는 등 염증성 지표가 보여 아마 급성으로 염증이 심하게 올라와 죽은거 같은데   지금 생각으로는 Avertin이 초기 염증 반응을 강화시킨다는 문헌이 있어 마취제로 Avertin을 사용하여 이런 일이 발생한 것인가 싶은데 혹시 Avertin 사용하는 연구실에 계신 분 있으시면 비슷한 일이 있으셨는지 여쭤보고 싶습니다. 
회원작성글 1q3e5t7u!  |  07.30
Q. 염증 관련 세포실험
암이나 염증 관련 세포실험할 때 종종 세포를 키운 후 세포에서 나온 물질이 있는 media에 다시 세포를 키우는 경우가 있는데 이를 실험적 명칭으로 뭐라고 하나요? 그리고 이러한 실험을 왜 하는 건가요? 
회원작성글 SoliDeo  |  07.27
Q. cytokine assay 분석 의뢰 업체 추천 좀 부탁드립니다!
안녕하세요. 이번에 Multiplex cytokine assay 를 진행하려고 합니다. 외주 업체에 맡겨서 진행할까 하는데, 혹시 많이 사용하시는 업체가 있을까요?  제가 찾아본 곳으로는 래비스고마, 코스모진택 과 같은 업체가 있고, 웅비메디텍에서도 Luminex 분석을 하는 것 같습니다. 많이 사용하시고, 분석을 잘 하는 업체가 있다면 추천해주시면 감사하겠습니다!!
회원작성글 cp2c  |  07.26
Q. FACS Foxp3 buffer
안녕하세요.  FACS 관련하여 질문드리고 싶습니다. permeabilization 단계에서 Foxp3 buffer 를 사용하게 되는데 이 단계부터 상온에서 incubation 을 해야하는 이유를 잘 모르겠습니다.  바쁘시겠지만 알려주신다면 정말 감사드리겠습니다.
회원작성글 나의라임오렌지나무  |  07.25
Q. IHC-DAB 염색이 이상합니다ㅠㅠ 첨부파일
안녕하세요 초보 대학원생입니다.   xenograft tumor로 IHC DAB를 진행하는데 갑자기 염색이 너무 이상하게 되서요ㅠㅠ  첨부한 사진처럼 너무 진하게 나오는데 DAB 발색이 너무 진해서 그런걸까요 다른 문제일까요...ㅠㅠ   조직은 oct compound로 얼려서 cryosection으로 진행하였습니다.   HIF-1a, CD31을 염색하였는데 모든 슬라이드가 저러는데 문제점이 무엇일까요ㅠㅠㅠ
회원작성글 avocado  |  07.21
Q. NK92와 분화시킨 NK의 차이
NK92와 제대혈에서 직접 분화시킨 NK의 차이는 뭐죠 media도 다르던데 둘의 차이가 궁금합니다ㅠㅠ  
회원작성글 카리나  |  07.13
Q. FACS 분석시 세포 믹스 ?
사람조직에서 세포 추출 후 Facs 분석 예정인데요 안티바디는 3가지 사용하려고 하고 Facs 분석의 목적은 과연 이 조직에서 추출한 세포가  우리가 생각한 그 세포가 맞냐 아니냐 확인만 하려는건데요 분석에 필요한 세포 수가 250만 정도는 있어야 하고   보통 당일 나온 조직받아서 실험해보면  세포가 적게는 80만 많게는 500만까지 추출되는데 대부분이 150만 정도 밖에 안나와요 아무래도 분석 당일 세포 수가 부족할 것 같은데 같은 사람에서 나온 세포가 아니어도 될까요? 같은 부위 조직인데 A라는 사람과 B라는 사람에서 나온 세포 서로 섞어도 될까요?    
회원작성글 allison  |  07.07
Q. 면역 관문 억제제 질문입니다
생명 2 정규학습 외 남는 시간에 재미삼아 발표를 해보려 하는데요 면역 항암법 주제로 발표해보고 싶어서 면역관문억제제 개념이나 기능 정도 까지는 조사가 되는데 구체적으로 anti-PD-1이나 anti-PD-L1이 PD-1와 PD-L1에 들러 붙는 자세한 원리를 조사하기가 힘들어서 질문합니다 쉽게 좀 알려주시면 진짜 감사하고 아니면 고딩수준에서 쉽게 조사할 수 있는 곳 링크라도 걸어주시면 감사하겠습니다
회원작성글 nonchemist  |  07.06
Q. Jove 동영상 부탁드립니다.. ㅜㅜ
https://www.jove.com/kr/v/58490/unraveling-key-players-humoral-immunity-advanced-optimized-lymphocyte   안녕하세요 선배님들! 갓입학한 석사 새내기입니다. 다름이 아니라 세포 분리 실험을 진행하면서 프로토콜 및 동영상 보고 실험해보려 하는데 학교 IP 가 구독이 되어있지 않다고 해서 못보고 있는 실정입니다 ㅜㅜ  혹시 PDF 파일이나 동영상 파일 보내주실 수 있으신 분 계시면 부탁드려도 될까요! 감사합니다..
회원작성글 공대생15  |  07.04
Q. annexin v에 관한 질문입니다 첨부파일
안녕하세요 저는 고마바이오텍의 Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit 제품을 사용하려고 하는데 protocal 문의드립니다  분석하고자 하는 세포를 약1x106cells/ml로 준비한다. 0.5ml의 세포 현탁(5x105cell/ml)을 microtube로 옮긴다. 1000 x g로 5분간 상온에서 원심 분리하여 배양액을 제거한다. 차가운 PBS 0.5ml로 세포를 부드럽게 풀어준다. 1000 x g로 5분간 상온에서 원심 분리하여 PBS를 제거한다. 차가운 1x binding buffer 0.5ml로 세포를 부드럽게 풀어준다. 1.25ul의 annexin V-FITC를 가한다. 반응물에 빛을 차단하고 상온에서 15분 반응시킨다. 1000 x g로 5분간 상온에서 원심 분리하여 상층액을 제거한다. 차가운 1x binding buffer 0.5ml로 세포를 부드럽게 풀어준다. 10ul의 propidium iodide를가한다. 반응물을 빛을 차단하고 냉장 보관한다 (4℃) 빠른 시간 내에 유세포분석 (flow cytometry)또는 형광현미경으로 분석 한다.   7. .25ul의 annexin V-FITC 양을 늘려도 될까요? compensation 하니 fitc가 너무 적게 잡혀서요 annexin v 다른 키트는 1:1 비율로 pi fitc 넣는 것 같아서요 
회원작성글 힘들다  |  06.25
Q. Balb/c mouse 안구 하얗게 변하는 것
안녕하세요! 동물실험을 하다가 궁금한 점이 있어서 이렇게 질문하게 되었습니다. 마우스 i.p로 마취와 안와채혈을 하고 나면 마우스 눈이 하얗게 변했다가 점차 시간이 지나니까 원래 빨간색으로 돌아오더라구요..혹시 마우스 안구색이 변하는 이유가 있을까요?
회원작성글 rlatmddus  |  06.22
투표완료 western blot 실험 단계 중에서 blocking 전 후로 washing 하시나요, 안 하시나요?
진행 2022.06.18~06.22  |  참여자 107명  |  댓글 4
Q. [western blot] Ponceau 염색 후 band 안 나오는 이유 첨부파일
Western blot 과정 중 transfer 후에 ponceau 용액에 membrane을 담궈서 band 확인할 때 band가 안뜨는데 왜 그런지 아시는 분 있나요? 폰슈에서 안나오고, 마지막 detection까지 해도 band가 보이지 않습니다..transfer가 끝난 membrane을 보면 marker는 잘 묻어나는 걸 보면 transfer과정에서 큰 문제는 없었던것 같은데 왜 그럴까요?ㅜㅜㅜ Protein 양=10ug 정도 PVDF membrane (Methanol로 적셔서 활성화 시킴) transfer 조건= 100 V, 60 min (-) Sponge-filter paper-gel-PVDF membrane-filter paper-sponge (+)
회원작성글 experiment  |  06.08
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