안녕하세요    CXCR4 expression 을 확인하기 위해 FACS를 진행하려고 합니다. target cell line 은 mouse cell line 이고  1차 ab는 CXCR4 Polyclonal Antibody host:Rabbit / isotype: IgG  human,mouse,rat  2차 ab는 F(ab')2-Goat anti-Mouse IgG (H+L) Secondary Antibody, PE, eBioscience™    이렇게 사용하면 되나요?   negative ctrl 은 2차 ab만 붙이면 될까요?

여러 antibody를 구매하다 보니 제품의 용량을 표기할 때 대부분의 경우 ug 등 질량 단위로 판매 하는 것 같은데 가끔 tests라는 단위로 판매한는 경우가 있더라구요. 혹시 이게 무엇을 의미하는지 알려주시면 감사하겠습니다.

LLNA관하여 질문드립니다. 시험원리는 여러가지로 공부하게되어 많이 알게 되었는데, 투여부위가 왜 귀에 투여하는지 궁금합니다. 림프구야 몸에 다른곳에도 있으며, 다른부위에 해도 상관없다고 판단되는데 제가 놓치고 있는 부분이 있다면 말씀해주시면 감사하겠습니다. 

Luciferase를 FACS로 확인 해보신분 있으실까요 ? 

분류는 무시하고 봐주시면 감사하겠습니다!!       1 LB 액체 배지에 배양이 가능하나요?  대장균 전용 배지로 알고 있는데, 바실러스 튜링겐시스를 배양 할 수 있는지 또 다른 구하기 쉬운 배지 중 바실러스 튜링겐시스를 배양 할 수 있는 배지가 있는지 알려주세요! LB 배지로 배양을 하여 실험을 한 사례나 LB 배지 사용이 가능하다는 내용이 담긴 논문 같은 출처도 알려주시면 너무너무 감사하겠습니다.   2. PC Broth (액체상태의 Plate Count 배지로서, 대부분의 세균을 배양하는데 사용) 배지에서도 바실러스 튜링겐시스 배양이 가능할까요??   어디에서 더 잘되는지 둘 다 어느 정도 잘 되는지 알려주시면 감사하겠습니다.   3. 또한 생물자원센터에서 바실러스 튜링겐시스와 백강균을 동결 건조 상태로 분양 받으려고 하는데 활성화 시켜 배양하는 방법도 알려주시면 감사하겠습니다ㅠㅠ 한 가지 질문이라도 답변해주실 수 있다면 꼭 답변해주세요. 또한 가능하다면 답변의 근거가 되는 논문이나 책과 같은 출처도 알려주시면 정말 감사하겠습니다.  

nanogold rapid kit제작에 관련하여 각종Buffer에 들어가는 조성(EDTA,Tween등)이나 Membrane에 분주하는 항체들과 섞어주는 용액들(tsurcose,PBS,)등 의 역할에 대해 공부를 할 수 있는 논문이나 사이트등이 있을까요...

실험에 관한 질문은 아니지만 여기다 질문남겨 봅니다. 검색해도 찾을수가 없네요.   바이러스 자체에도 면역체계가 있는지요? CRISPR-Cap9가 미생물의 면역체계이고 antibody 등은 mammalian 의 면역체계인데, 바이러스는 이러한 면역체계가 없을까요? mutation 자체가 면역체계이다.. 라고 이해하고 넘어갈 수 있겠지만, 혹시나 싶은 마음에 질문남겨 봅니다. 작은 힌트라도 미리 감사드립니다.

항체의 구조와 정제 원리를 이해하고, Protein A-친화 크로마토그래피를 통한 항체 분자(IgG)의 정제 기술을 익힌다.  세포주에서 배지로 분비된 항체 분자를 모아서, protein A-친화 크로마토그래피를 통해 순수 정제한다.   정제한 항체의 농도를 280 nm에서의 흡광도를 통해 측정하고, SDS-PAGE를 통해 정제한 항체의 순수도를 판단한다.     실험을 진행했는대 서론이나 고찰을 쓸게없어서 뭘쓰면 좋을지 여쭤봅니다. affinity chromatography 를 이용해서 쓸라고하는대 쓸게없더라고요 뭘써야좋을까요 ?  IgG 에대해서도 뭘쓰면 좋을까요 ? 고수님들 도와주세요 ㅠ

안녕하세요 ㅠㅠ  먼저 이런 질문 올리게 됨에 정말 면목없는 일인 것 같지만 그래도 아실 분이 있으실거 같기도 하여 질문드립니다... 지인( 아직 학부생)이 과제를 해서 논문을 찾아보다가 캡쳐를 하고 그랬는데 이 논문에 대해서 캡쳐는 했는데 어떤 논문인지 표시하는걸 까먹었다고, 제목을 모른다고 해서 같이 찾아주던 중이었습니다.  저도 pubmed, 구글 스칼라 등에 문장 단위로 골라서 검색을 당연히 해보고 질문드리는거구요... 하루 정도 시간 날 때 찾아보았는데 나오지 않아서 혹시나 하고 질문드립니다 ㅠㅠ   분야는 immunology - CD25가 Treg cell의 바이오마커로서~~ 이런 것 내용 같습니다.   

IHC 또는 IF 관련하여 제가 말한 시험법이 가능한지 고수분들 답변 부탁드립니다 일단 목적은 항체-his tag 시료가 종양 조직 내부에 penetration했는지 확인하기 위함입니다. 1. 종양 xenograft model mice에 항체-his tag 시료를 정맥 또는 IP 주사 2. 시간별로 종양 조직을 고정하여 section 3. 항체-his tag를 capture하기 위해 his-tag-형광 항체 반응 --> confocal 확인 또는 3-1 항체 his tag를 capture하기 위해 his tag 항체 반응(primary) --> his tag 항체와 결합하는 secondary-HRP 항체 반응 --> DAB 반응 --> 현미경 확인 이렇게 진행하려고 하는데,  종양 조직에 penetration된 항체 detection을 일반 confocal 또는 ELISA 보듯이 하려고 하는데.... 될까 모르겠습니다...ㅠㅠ 혹시 해보신 적 있으신 분들 경험 공유좀 부탁드립니다!!

안녕하세요 9월 입학 예정으로 미리 일하고 있는 인턴입니다! 신생랩이라.. 인턴인데도 가르침 받지 못하고 강하게 크고 있어요ㅠ   항체는 왜 이렇게 고가의 실험재료일까요... 혹시 여기서 항체 소분해서 맞교환 하셨다던가  저렴하게 판매하는거 보신 분 있으실까요?ㅠㅠ 넘나 비쌈.. 진짜....   M1, M2 macrophage marker (IL-6 등) 위주로 찾고 있습니다..

안녕하세요. 다른 전공을 하다 면역학에 뜻이 생겨 들어왔는데, 나름 공부하고 찾아보고 해도 해결되지 않는 궁금증들이 너무 많습니다. 도와주세요!   human sample에서) 1차 항체로 mouse anti-human, rabbit anti-human을 같이 붙였을 때, 2차 항체로 goat anti-mouse, goat anti-rabbit을 같이 써도 되나요? 아니면 2차 항체의 host도 다른 것으로 쓰는게 좋나요? 이유가 있을까요?   mouse sample에서) 1차 항체로 mouse anti-CD를 붙이고, 2차 항체로 goat anti-mouse를 써도 되나요? 1차 항체는 monoclonal이니 mouse sample에다가 mouse 유래 항체를 붙여도 될 것 같은데, 2차 항체는 polyclonal이니까 anti-mouse를 쓰면 sample도 잡아버릴 수 있지 않을까 걱정이 됩니다. 이는 실험을 해봐야 아는 것일까요? 만약 background가 안 잡히면, 이는 논문에 써도 되는 항체일까요?   감사합니다.

안녕하세요 최근에 solubility test로 단백질의 folding과 inclusion body에 관해 공부중입니다. 대장균에서 발현하는 단백질이 soluble한가 insoluble한가를 연구중인데 이 단백질이 나중에 항원으로 쓰이려면 왜 soluble해야 한가요? folding 때문이라고만 생각되는데 정확하게 solubility test를 하는 이유를 모르겠어요...

면역세포를 stimulation하는 antibody가 있고 Depletion하는 antibody가 있는데 무슨차이인가요?? 예를들어 t cell을 culture하는데 anti cd3가 발려있는 culture plate를 사용합니다 이경우 t cell stimulation용이라 하더군요 그런데 in vivo 상에서 nk를 depletion할때 anti-nk1.1을 사용한답니다 그렇다면 어떤때는 stimulation이고 어떤때는 depletion인가요 Anti nk1.1이 발린 culture plate에서 nk cell을 키우면 다 죽는다는건가요 stimulation된다는 건가요 각각의 작용원리가 다른듯한데 구조상 차이가 있는걸까요 어떤 원리의 차이에 의함인지 궁금합니다

FACS antibody staining 과정에서 dead cell staining을 먼저 한 뒤 surface staining을 하고 나서 fixation, intracellular staining을 하는 것으로 알고 있습니다. 그런데 왜 순서를 꼭 이렇게 해야하는 건가요??

Polyclonal antibody를 구매할지 monoclonal antibody를 구매할지 선택 기준같은게 있나요?