[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보 회원가입   로그인
BRIC홈 실험
한국애질런트
배너광고안내
이전
다음
스폰서배너광고 안내  배너1 배너2 배너3 배너4
BioLab 정래동 교수
전체보기 안전점검 LABox
 카테고리: 전체 > Molecular Biology-DNA
Mol. Biol.-DNA Mol. Biol.-RNA Mol. Biol.-Protein Immunology
Cell Biology Microbiology Plant Biology Laboratory Animals
Omics Chemical biology Bioinformatics Laboratory Equipments
Buffer/Reagent Bioethics Etc.
카테고리 전체보기펼치기
질문/투표/프로토콜 등록
Q. 전기영동 gel에 증류수 사용
전기영동 실험에서 gel의 농도를 맞출 때 TAE buffer가 아닌 증류수로 맞추면 결과를 보기 어렵나요?
회원작성글 시원한쥬스  |  08.18
Q. DNA 전기영동하는데, gel이 자꾸 위에만 밝게 나오네..
DNA 전기영동하고 있습니다. Red safe사용하고 있고요, 기계도 최신버전으로 구매한지 얼마 되지 않았습니다. 3번을 해봤는데 아래같이 계속 위에 부분만 밝게 나오고, 막상 DNA부분은 너무 어둡게 detection되네요.. 도움 부탁드리겠습니다!
회원작성글 라뛔한  |  08.18
Q. PCR 관련 조언 부탁드립니다.
안녕하세요. PCR 관련해서 조언을 얻고자 글 올립니다. 다른 DNA plasmid 몇 가지를 동일한 조건으로 PCR을 진행하였는데 다 비슷한 부분에서 band 가 생깁니다.... 원하는 부위의 band가 맞긴한데 나오면 안되는 샘플에서도 band가 나오니, 실험의 결과를 믿기가 어려워 조언 구합니다. 왜 이런 결과가 나타나는건지 아시는 분 있으시면 댓글 부탁드립니다. ㅠ.ㅠ 감사합니다.   동일한 primer F,R (농도 : 100pmol) / 5x PCR Master Mix (rTaq) / DW 를 사용했고, PCR 온도는 서치하면 나오는 기본적인 protocol 에 명시되어 있는 온도로 지정했습니다. (Tm 값은 primer 보다 5도 낮게 진행하였습니다.) * 1, 2, 3 모두 다 다른 샘플입니다.... 1, 3 은 원하는 band가 맞는데 2는 아예 band가 나오면 안된다고 생각했는데 나온거라 1, 3의 결과도 믿을 수 없는 상황입니다....ㅜㅜ    
회원작성글 실험알못  |  08.18
Q. electroporation 실험용 G+ competent cell Washing용액 질문입니다 첨부파일
electroporation을 하기위해서 G+ lactococcus lactis competent cell을 제조하고있는데요.  제가 찾은 프로토콜에서 '0.5M sucrose with 10% glycerol'로 washing하라고 나와있는데 각각 오토클레이브 돌리고 0.5M sucrose와 10% glycerol을 얼만큼 pelet에 넣어서 resuspend하는지 이해가 가지 않습니다ㅜ (파일 첨부하였습니다)   그리고 G+프로토콜 찾아보면  - 0.5M sucrose만 사용해서 CC만드는 방법 -10% glycerol만 사용해서 CC만드는 방법 - 0.5M sucrose와  10% glycerol 같이 사용해서 CC만드는 방법 이렇게 크게 세가지 인것같은데, 그냥 방법이 3가지인것인지   아니면 Staphylococcus는 0.5M sucrose로 사용, TSB로 키운 CELL은 10% glycerol만 사용 이런식으로 균주별, medium별로 분류되는것인지도 궁금합니다.
회원작성글 PORI  |  08.18
Q. DNA Extraction buffer 조성의 해석
안녕하세요   Cell에서 Cytosolic 미토콘드리아 DNA를 분리하려고 한 논문의 버퍼조성을보고 있습니다..   논문 내용은 그대로 적어드리면 Buffer A (100 mM Tris.HCL, pH 8.5, 5 mM EDTA, pH 8.0, 0.2% SDS, 200 mM NaCl, 100 ug/mL proteinase K)   Buffer B (150 mM NaCl, 50 mM Hepes (pH 7.4), and 25 ug/mL digitonin)   이렇게 되어있고 저는 이 두개버퍼를 만들어야 합니다   그런데 제가 이해하기로는 최종 버퍼의 조성이 저러저러하다라고 보고 최종 볼륨에서 저 농도에 맞게 만들면 되겠구나 생각했는데요  pH가 여러개네요... 제가 가진 Tris, EDTA, Hepes는 모두 가루시약입니다.. 가루시약제품 자체의 pH를 말하는것인가요..?
회원작성글 ELFAMA  |  08.18
Q. real time pcr ct값이 이상합니다 도와주세요
안녕하세요 실험 햇병아리 대학원생 입니다! GAPDH 의 경우 어느 sample이든 CT값이 15-16정도 나오지만 target gene의 경우 scr sample은 CT값이 28, siRNA를 treat한 sample들은 CT값이 25정도 나와서 siRNA을 쳤는데도 불구하고 efficency가 내려가지 않고 오히려 올라가는 상황을 보입니다ㅠㅠ시약을 바꿔도 Sample을 다시 뽑아도 같은 결과가 나옵니다ㅠㅠㅠ 이유를 아시는분 있을까요? 도와주세요ㅠㅠㅠㅠ
회원작성글 살려주세요  |  08.18
Q. dCT? ddCT?
qRT-PCR 결과 해석할 때 dCT, ddCT 방법 이해가 조금 어려워서 문의드립니다. 찾아보니까  delta CT 는 target CT - housekeeping CT 라고 하는데 2^-dCT 는 그러면 housekeeping gene 대비 target 하는 gene의 발현량만을 구하는 건가요? dCT 에 마이너스가 붙는 이유는 무엇인가요...? 그리고 ddCT 방법을 쓰는 목적도 알고 싶습니다..  
회원작성글 hazzy  |  08.17
Q. 희석하는법 도와주세요 급합니다
안녕하세요. 아직 희석 농도 구하는게 익숙치 않아서 질문 드려요ㅠ 도와주세요.. 두가지 상황이 있습니다. 1. 12개의 서로 다른 100마이크로몰 샘플을 섞어서 2마이크로몰 500마이크로리터를 만들려고 합니다. 2. 5개의 서로 다른 100마이크로몰 샘플을 섞어서 2마이크로몰 500마이크로리터를 만들려고 합니다. 샘플과 DW를 몇씩 넣어야 하는지 이해시켜주세요..ㅠㅠ  
회원작성글 도와줘욤흑흑  |  08.17
Q. dsRNA RT-PCR하려고 하는데 denaturation 단계가 궁금합니다.
제가 따라하려고 했던 논문에서는 dsRNA를 RT-PCR시에 Random hexamer + dsRNA mixture 를 95도에서 5분 정도 denaturation 후에 RT-PCR mixture (random hexamer 제외)를 넣고이후 과정을 진행하면 된다고 적혀있었는데요. 찾아보니까 또 다른데서는 dsRNA만 denaturation 후에 RT-PCR mixture를 넣으면 된다고 적혀있더라구요.  그런데 qPCR시, ct값에서 denaturation에 따른 차이가 나타나지 않아서요.. 제가 denaturation을 잘못하는건지 궁금해서 이렇게 여쭤봅니다. dsRNA를 RT-PCR시에 denaturation 단계를 어떻게 진행해야 하나요??
회원작성글 soor  |  08.17
Q. 전기영동 loading dye
  안녕하세요. 비전공자입니다. pcr 진행 후 전기영동을 진행하는데 로딩다이 끌림이 발생해서 바꿀려고 합니다. 혹시 브랜드마다 차이가 있을까요?   현재 바이오팩트 100bp 로딩다이를 이용하고 있습니다. 
회원작성글 닭튀기는꼬꼬  |  08.17
Q. 마우스 프라이머 제작
마우스 strain을 genotyping을 할려고 하는데 프라이머를 기존에 알려져 있거나 혹은 어떤 부분에서 프라이머를 작성해야하는지요. 제가 가지고 있는 mouse strain을 정확히 알지는 못하지만 mcherry and GFP가 포함되었다고 합니다.
회원작성글 kingston  |  08.17
Q. Aptamer SELEX 관련
이제 막 대학교 입학한 생명과학 초짜입니다ㅜㅜ RNA Aptamer 관련해서 관심이 생겨 조금 알아보는 중에 aptamer를 SELEX 하려면 우선 DNA library가 있어야 그걸로 RNA로 전사시켜서 압타머를 선별하는 걸로 대충 이해했는데 여기서 DNA library는 어떻게 얻는 건가요? 아무 세균에서 RNA 추출해서 cDNA 합성시킨 후에 sequencing 하면 되는 건가요..?
회원작성글 bb0  |  08.16
Q. PCR nonspecific band 외
안녕하세요? 실험 중 궁금한 것이 생겨 질문드립니다. PCR 진행 후 Gel을 Run 했을 때 나오는 Nonspecific bands을 발견하였습니다만, 이것들이 문제가 되는 근본적인 이유가 무엇인지 궁금해졌습니다. (Nonspecific bands의 존재가 Primer의 Design이나 Temperature setting의 문제를 시사할지도 모른다는 것은 이해했습니다.) 만약 원하는 Amplification target이 명확하게 잘 보인다면, 이를 elusion하여 사용하는 추후의 실험 과정(Cloning)에서 Target과 멀리 떨어진, 상관 없어 보이는 Nonspecific bands는 어떤 영향을 줄 수 있을까요?  
회원작성글 팡피링  |  08.15
Q. Miniprep 한 벡터 transformation이 안됩니다.
pDS132 계열 벡터를 S17-1 λ pir에 transformation하려 하는데.. 이 벡터에 cat이랑 nptI 유전자를 넣었습니다.. 이 벡터를 DH5a λ pir 에 transformation 했을 때, colony가 잘 떴지만, S17에서는 하나도 뜨지 않았습니다.. (heat shock transformation 하였습니다) C-cell 문제인가 싶어서 pRK415 벡터를 시험삼아 transformation 했는데 콜로니 잘 나왔구요.. 1. Km 100, Cm 20 plate 를 사용중인데 혹시 S17이 두 항생제에 민감한지.. 2. Heat shock이 잘 안되어서.. Electroporation을 하려 하는데 이 방법으로 콜로니 얻을 수 있는지 여쭤봅니다.
회원작성글 창의적인사람  |  08.15
Q. 시퀀싱 주문 실수
석사 한학기차 신입 대학원생입니다. 시퀀싱을 보내는데 Pcr product와 프라이머를 동봉하여 보냈습니다 Basic seq이었고 샘플 농도와 프라이머 또한 넉넉하게 보냈습니다 그런데 결과를 확인 했는데 평소 보던 결과와 달라 확인해 보니... 샘플 종류를 pcr product 가 아닌 plasmid로 선택 하여 주문을 했더군요.. 이럴 경우 시퀀싱을 다시 보내야 하는 거겠죠.. 처음엔 샘플 농도가 너무 낮아서 그런거라는 생각이 들었는데 다시 확인해보니 아니더군요.. Pcr product의 경우 결과 확인할때 snap gene 에서 보면 forward, reverse 시작점이 정해져 있는데 그게 아닌 결과가 나와서... Plasmid seq은 보내 본적도 없어서 어떻게 봐야 할지 모르겠습니다.. 혹시 이 경우 law 데이터에서 시작점 설정을 다시 하면 데이터를 볼수 있을까요.. 혹시 이런 경험이 있으신 분이 있는지..ㅠㅠ 다시 시퀀싱을 보내는 방법 밖에 없는지 어떻게 해야 하는지 모르겠습니다..ㅠㅠ
회원작성글 Ehqtf  |  08.13
Q. pcr 관련
  안녕하세요. 분자쪽은 아무것도 모르지만 실험을 진행하게 된 예비 대학원생 입니다.!! 제가 DNA까지는 뽑았는데 PCR을 진행하려 여러 프로토콜을 찾아봤는데 궁금한게 있어서 질문합니다.  master mix 2x 가 있으면 프라이머(F,R), 주형DNA,뉴클리아제프리워터 만 있으면 되는거 맞나요?   만약 맞다면 마스터 믹스는 2X그대로 사용하는게 아닌 몇배 희석해서 사용해야하나요?  
회원작성글 닭튀기는꼬꼬  |  08.12
이전  1 02 03 04 05 06 07 08 09 10  다음
공지사항
2020년 실험 Q&A 우수 참여자 선정 안내.
실험Q&A 게시판 편집기 변경
실험관련연재
세오 연재중실전 실험 프로토콜 101
세오 (필명) (Cincinnati Children’s Hospital Medical Center)
곽민준 연재중랩노트
곽민준 (POSTECH 생명과학과)
신코 연재중분석장비 이야기
분석장비 탐험가 (필명) ((주)신코)
박은총 연재마감후배에게 주고 싶은 면역학 노트
박은총(Duke University)
Mr.S 연재마감의학계의 Spectaculum: 임상시험
Mr. S (필명) (연세대학교)
에스프리 연재마감실험을 해봅시다
에스프리 (필명)
이제욱 연재마감생명과학자 기초체력 다지기
이제욱 (오송첨단의료산업진흥재단, 신약개발지원센터)
금주의 인기Q&A
Bradford Protein 단백질 정량하는법 [15]
실험용 항우울제 구매 방법 [1]
cell differentiation media change cell l... [1]
전기영동 loading dye [5]
초파리 무게가 궁금합니다. [1]
western blot 밴드가 점묘화처럼 찍혀나오는 문제 [2]
갑자기 생장이 느려진 박테리아......왜그럴까요ㅠ [2]
PCR 관련 조언 부탁드립니다. [4]
real time pcr ct값이 이상합니다 도와주세요 [3]
agar 배지 냉장보관 어떻게 하는게 맞나요? [3]
최근답변자 우수답변자
올챙이CD4+T

대왕개구리SPEED

알라뛔한

앞다리oneday

알롤로야놀자

알살려주세요

올챙이PORI

알실험알못

꽃개구리느림보

꽃개구리TX

꽃개구리bio

개구리절대교주

개구리닥눈삼

대왕개구리안재진

개구리cslee

개구리A'ANE

위로가기
실험 홈  |  실험FAQ
 |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의
트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS
써모피셔사이언티픽 광고