semi-dry transfer 질문 | 실험 Q&A > 커뮤니티

Q semi-dry transfer 질문

레벨05 NOTEnot (대학원생)

안녕하세요. semi-dry 조건 잡을 겸 계속 해보고 있는데요. 오늘 한거는 PVDF 막에 막 줄무늬가 생겼습니다.

혹시 너무 전압이 과해서 그런걸까요?(15V, 60분시행하엿습니다) 아니면 제가 초보라서 PVDF 막 자르다가 말라서 그런건지...

Mol. Biol.-Protein > Western Blot

A 답변 3

멤브레인이 말랐을때 보통 저렇게 말랐던거 같습니다...

간혹 저래요...님 잘못 아닙니다.

Transfer 후 Membrane을 자르거나 글자를 적거나 할 때, 공기 중에 노출되어 마른 경우 저렇게 보입니다.

해당 이슈를 교정하려면, 작은 노하우이지만,

1) 3M 페이퍼 하나와 함께 자르는 것,

2) 쿠킹 호일에 membrane을 놓고 같이 잘라서 마르는 것을 최소화 하는 것

몇 가지가 더 있을 수 있으나, 직접 해보시는게 좋을 듯합니다.

Membrane 마르면, blot 결과에서 background가 회색 빛 혹은 항체 농도에 따라 어둡게 나옵니다.

다시 잘 시행해 보셔요.

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작성자

(일반인)

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