안녕하세요, SPEED님! 우선 답변 정말 감사드립니다.
1, 2. 정제하려고 하는 단백질의 reference를 찾아보니, 여기서도 Microcon YM-30 apparatus라고 하는 것을 사용하여 elution sample 500 uL를 pooling하고 농축했다고 합니다!
그럼 말씀해주신 것처럼 해당 stable하지 않고, 어떤 조건에서도 침전이 일어나서 그런 것이겠죠..?
3. 제가 정제하고 있는 단백질의 ion stability는 일단 알려진 바가 없네요... 😢
4. 말씀해주신 것처럼 비슷한 실험을 해보았었는데, 저는 크게 의미있는 결과가 나오진 않았어서요.. 혹시 제 protocol을 확인해주실 수 있으실까요?
저는 elution sample을 NaCl과 imidazole의 농도를 다르게 하여 제작한 다양한 buffer와 섞은 후에 4'C에서 어느정도 incubation 후, centrifuge를 진행해서 sup을 따 bradford assay를 진행하여 확인해보았습니다.