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Q 갑자기 HPLC peak가 앞당겨지고 area도 낮습니다.
레벨03 Brady (대학원생)
Waters HPLC/UV 장비 사용 중입니다.
압력도 일정하게 유지되는데
RT가 기존의 4분에서 3분으로 당겨지고, area도 기존에 비해 30%정도 감소했네요..
컬럼 때문인가 싶어 다른 학생의 컬럼으로 다른 물질을 분석했는데, 똑같이 3분 대에 나오고 area도 감소합니다.
peak 모양은 양호합니다.
압력이 정상인데 이런 현상은 또 처음이네요..
원인이 뭘까요??
Chemical biology > Analysis
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A 답변 5
RT 변화는 일단 이동상 유량&비율 이 일정한지 GRADIENT PROFILE 확인 해 보심이
isocratic으로 ACN : DW = 8 :2로 맞췄었는데
RT를 늦추려고 이동상 비율을 바꿔도 동일한 RT에서 나오네요... 어떤 비율에서도 동일한 RT가 나오는게 가능한지...
비율이 다르면 RT 같을 수 가 없습니다
아마 컬럼 안정화 가 덜 되어서 그런 것 겉은 데 비율 바꾸고 충분히(30분이상,1ML/MIN 에서)
안정화 된후에 확인 하심이
답변 감사드립니다.
저 또한 RT가 같을 수 없다는 데 동의하지만 결과가 이렇네요..ㅠㅠ
안정화도 평소처럼 했는데도 이렇구요 ㅠㅠ
정말 미스테리합니다ㅠ
펌프문제라면 압력이 들쑥날쑥 할테고..
다 정상처럼 보이는데 peak랑 area만 달라졌네요..
flow를 한번 느리게 해볼까 생각중입니다.
flow rate check요함
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