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Q seeding 문제

레벨01 yuza (대학원생)

안녕하세요, 석사과정생입니다.

현재 seeding 문제 때문에 고민을 하고있습니다.

3T3-L1 cell이나, HaCaT cell 모두 seeding 문제에서 원하는 결과가 나오지 않습니다.

6well plate에 5x10^4으로 깔았지만, 다른 사람이랑 비교했을 때 seeding 된 cell 수가 차이가 많아 보입니다.

아래 사진은 HaCaT cell 로 다른 사람과 비교 실험한 6well(5x10^4)사진입니다.

정상적인 6well plate (5x10^4)

문제의 6well plate (본인)

제가 생각했을 때, (1) counting 단계에서의 문제 (2) seeding 단계에서의 문제

이 둘 중 하나인걸로 예측이 됩니다.

이 두 단계에서의 문제를 해결하려면 어떻게 해봐야 할까요?

제가 어느 부분에서 놓치고 있는지 잘 모르겠습니다

Cell Biology > Cell Culture

A 답변 2

사진으로 위에는 세포가 대부분 가라앉아있고 아래는 좀 떠있어서 초점이 달라서 차이나 보일 수도 있습니다.

세포가 자리잡고 다리를 다 뻣은 상태로 비교해보세요. 가장자리에 뭉치거나 쏠리지는 않았는지도 확인해보시구요.

cell counting 오차도 있고 원래 사람마다 조금씩 달라욤.

자신만의 기준을 찾고 그 기준이 일괄되면 괜찮다고 봅니다.

뭉치거나 쏠리지는 않는데, 한 플레이트에서 60~70% 까지 차는 기간이 5일에서 7일은 걸립니다 ㅠ

2일 뒤에 sample 처리를 해야하는데 이 문제가 풀리지 않아서요!

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(일반인)

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