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60 pi dish DNA transfection

레벨3 쿵쿠따리쿵쿠따 (대학원생)

안녕하세요, 석사 과정을 밟고 있는 학생 입니다.

늘 6 well에다가 Trasnfection을 위해 seeding을 해주었는데 이번엔 처음으로 60 pi dish에 seeding을 하게 되었습니다.

다름이 아니라, reverse transfection으로 48h 진행 예정입니다.

내일(토) seeding 및 transfection->월요일에 harvest

이 단계로 할 예정인데 cell seeding을 어느정도 해야할 지 감이 안 잡혀 여쭤봅니다!!! 월요일에 100% confluency를 원하면 토요일에 어느정도 양의 cell을 깔아야 할까요 ㅜㅜ?

cell은 293T cell 사용 중이고, 6well 할 때는 24h transfection(ex, 일요일에 transfection후 월요일에 harvest) 진행으로 1개의 well 당 0.6*10^5으로 진행 하였습니다..!

조언 부탁드립니다 ㅜ

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답변 1

셀 마다 좀 차이가 있기는 하지만 surface area로 대충 계산이 가능합니다.

https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/cell-culture/cell-culture-plastics/cell-culture-plates.html

https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/150460#/150460

surface area로 계산을 해보면 대략 2배 정도 됩니다.