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AA
(비회원)
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2023.06.08 16:23
과제인가요? 단백질 파괴 최소화요
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레벨1
애기비누
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2023.06.08 17:45
단백질은 열로 변성되기 쉽기 때문에 얼음을 이용합니다
단백질 추출할 때 온도를 낮춰주는 이유는 주로 Protease의 활성을 줄이기 위함으로 생각됩니다. 단백질을 분해하는 효소의 활성은 온도에 dependent 한 경우가 대부분입니다. 높은 온도에서는 단백질의 변성도 생길 수 있지만 단백질을 뽑을 때 주로 room temp에 노출되기에 50도 이상의 높은 온도는 주어지지 않기에 단백질의 변성보다는 단백질 분해 효소의 활성을 떨어트려 제가 뽑고자 하는 단백질을 온전하게 뽑기 위함으로 생각됩니다. 특히 단백질을 뽑을 땐 PMSF나 다양한 protease의 inhibitor mixture를 반드시 사용합니다. 뿐만아니라 protease는 2가 metal 을 cofactor로 사용하기에 EDTA를 처리하여 이를 방지하기도 합니다. 혹 질문에 대한 도움이 되었길 바랍니다.
