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Raw 264.7 cell에 LPS유도시 세포독성, NO 측정

레벨1 wnsgud0853 (대학원생)

현재 Raw 264.7 cell에 LPS유도시 세포독성, NO 둘다 잇는지 확인중인데 잘안되네여 ㅠ

NO는 당연히 안나오고요 ... MTT시 원래 LPS를 유도하면 세포가 죽어야하는게 정상인데 Control로 standard를 잡았을 때 10, 100, 500, 1000, 5000ug/ml LPS를 유도했을 때 증가하더라고요..

1) 세포와 LPS 둘다 Fresh하지 않아서 일수도 있겠죠?

2) 아무래도 LPS 오염인 것같긴한데.. 이때 LPS를 Fresh하게 만드는 방법이있을 까여.. 그냥 멸균된 증류수에 희석하고 잘된사람도 있다던데..

3) 그리고 LPS 희석시 Clean bench에서 희석을 해도되나여?

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답변 3

- 세포 P/N이 어떻게 되나요?

저의 경우 LPS를 1000ppm농도로 3차 증류수에 희석하여 유리 vial에 냉장보관하여 clean bench 에서 적정농도로 희석하여 사용하고 있어요

유리 vial에 1달 이상 냉장 보관하여 사용하는데 여태 실험하는데 큰 어려움 없었습니다

Passage number 자체는 p25정도됩니다.. 새 Raw264.7 cell은 없더라고요 ㅜㅜ