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BCIP/NBT와 ECL로 detection 하는 것에 대한 차이

레벨1 모령 (대학생)

안녕하세요

현재 ALPL관련해서 공부하는 중인데 실험 기법에 의문이 생겨 질문드립니다.

제가 하고자 하는 실험은 ALPL이 각 군에 어느정도 있느지 확인하기 위함으로

western blot으로 BCIP/NBT를 set up하여 그 양을 확인 하려고 합니다.

이 때 BCIP/NBT를 사용하려면 alkaline phosphate가 conjugation된 antibody를 사용해야하는 것을 확인하였습니다.

일반적으로 alpl 1'를 붙이고 2'를 붙여 ECL로 확인하는것과

alkaline phosphatase가 conjugation된 antibody를 이용하여 BICP/NBT로 확인하는것에 어떤 차이가 있는지 궁금합니다.

단지 방법의 차이인지 두 방법에서 보고자 하는 목적이 다른건지 정확한 차이를 잘 모르겠어 질문드립니다.

(논문을 참고하였을 때, 같은 sample에서 일반 western blot으로 진행하였을 때는 band가 나오지 않고,

BCIP/NBT로 진행하였을 때, band가 뜨는 figure를 확인 한 바 있고 논문에서 BCIP/NBT로 진행하였을 때

activity 한 ALPL을 detection 할 수 있다라는 내용을 확인한 바 있으나 정확히 이해가 가지 않아 질문드립니다ㅠ)

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