불안정한 단백질 샘플 얻는 법 | 답변 > 실험 Q&A > 커뮤니티

실험 Q&A Mol. Biol.-Protein > Western Blot

불안정한 단백질 샘플 얻는 법

레벨1 킹짱프 (대학원생)

안녕하세요, 석사 1학기 차에 WB으로 애를 먹고 있어서 질문 드립니다.

제가 WB으로 보려고 하는 단백질이 turnover가 잘되는 매우 불안정한 단백질이어서, WB을 했다 하면 원하는 크기의 band가 아닌 그보다 더 작은 isoform의 밴드가 잡힙니다.

단백질을 얻는 과정은 mouse의 눈에서 bleeding을 하여 lymphoprep이라는 kit를 이용하여 뽑고 있으며, bleeding을 제외하고 kit를 사용하여 RIPA를 넣기 전까지의 과정이 대략 1시간 30분 정도 소요됩니다.

혹시 이렇게 turnover가 잘 되는 단백질의 경우, 따로 샘플을 만드는 방법이 따로 있을까요?

신고하기0

실험Q&A를 통해 여러분의 지식을 나누어 주세요. 답변을 등록하시려면 로그인 해주세요.

본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.

답변 1

protein의 degradation이 너무 빠르다면 protease inhibitor를 사용해보심이 어떨까요?