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단백질 보관 방법이 궁금합니다. 웨스턴 실험 단백질!

레벨2 밍도비 (대학원생)

등록일 2023.06.02 18:10:36
조회1177

안녕하세요

대학원 1학기 다니고 있는 대학원생입니다.

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단백질 보관방법에 대해 궁금합니다.
지금까지 세포에서 단백질을 뽑고 -80도에 보관하고 웨스턴을 내릴때마다 꺼내서 사용을 했는데,

단백질 상태가 변한 것 같아 단백질 상태를 좋게 오랫동안 보관하는 방법이 있는지 궁금하여 질문 드립니다.

분명 3주 전에 웨스턴을 내릴때는 잡밴드 하나도 없이 밴드가 일정하게 잘 나타났었는데 3주뒤에 -80도에 보관해둔 단백질을 다시 꺼내어 똑같은 프로토콜로 그대로 웨스턴 실험을 진행하였는데 밴드 밑에 희미하게 잡밴드가 같이 떳습니다. 사진도 함께 첨부하겠습니다. (왼쪽 사진이 3주전에 웨스턴을 내렸던 사진이고 1번 lane이 MSC 2번 lane이 Hela입니다. 오른쪽 사진도 동일하고 3주 후에 웨스턴 내린 사진입니다.

#웨스턴
#단백질
#actin

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답변 4

답변등록

레벨8 SPEED
2023.06.04 14:01

- -80도에 보관 중인 시료는 냉동 후 처음 해동하는 시료인가요?

레벨2 밍도비 (대학원생)
2023.06.05 01:47

Speed님,

아니요! 만들고 나서 웨스턴 내린다고 6~8번은 꺼내서 사용하고 다시 -80도에 넣어뒀습니다.

레벨8 SPEED
2023.06.05 08:02

채택답변
질문자가 채택한 답변입니다.

- -80도가 -20도 보다 보관 중의 stability는 우수하지만 냉동-해동을 반복하면단백질에 따라 정도의 차이는 있지만 분해됩니다.

- WB 시료는 전기영동 sample을 만들어 1번에 모두 사용 할 양으로 소분해서 -80도에 보관하는 것이 재현성 좋게 결과를 만들 수있습니다.

레벨2 밍도비 (대학원생)
2023.06.05 17:29

speed님,

답변 감사합니다.

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