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HPLC washing

레벨5 썬캣 (대학생)

등록일 2023.06.02 12:40:59
조회1081

컬럼x.jpg (다운로드 : 95) 첨부파일다운로드

HPLC를 장시간 사용 안하고 있다가, 한 번 워싱을 하려고 하는데 100% MeOH로 2-3 min/L 로 30 - 1시간 정도 흘려 보내려고 합니다.

이 때 몇 가지 궁금증이 있습니다.

1. 사용할 100% MeOH가 HPLC grade 인데 0.45 um 필터로 한번 여과 후 sonication도 20분 정도 하고 washing 해도 될까요?

아니면 여과, sonication 없이 바로 사용해도 될까요?

2. sonication 할 때 뚜껑은 열어야 하나요?

3. purge valve를 닫고 흘려 보내야 하나요? (현재 컬럼은 끼워놓지 않은 상태 입니다.)

#HPLC washing

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답변 1

답변등록

kyle22 (비회원)
2023.06.02 15:15

채택답변
질문자가 채택한 답변입니다.

1. 사용할 100% MeOH가 HPLC grade 인데 0.45 um 필터로 한번 여과 후 sonication도 20분 정도 하고 washing 해도 될까요? 아니면 여과, sonication 없이 바로 사용해도 될까요?

A) salt가 포함되지 않는 pure한 MeOH기에 여과를 따로 거치지 않아도 상관은 없으나, 이동상 사용에 보통 filteration 과정을 거치니 찝찝하시면 해도 좋습니다. Sonication은 보편적으로 라인에 gas로 인한 보이드 볼륨을 없애기 위해 이동상의 gas를 제거해주기 위해 하므로 하는것이 좋습니다. (요즘 기기는 보통 degassing 파트가 따로 있긴 하나 보편적으로 sonication 하는 것이 좋습니다.)

2. sonication 할 때 뚜껑은 열어야 하나요?

A) 기체를 내보내는 과정이므로 뚜껑을 열어두셔야 합니다. 보편적으로 MeOH 자체가 휘발성이 있고, 이물질 유입을 방지하기 위해 뚜껑을 열고 위에 올려놓은 상태로 탈기합니다.

3. purge valve를 닫고 흘려 보내야 하나요? (현재 컬럼은 끼워놓지 않은 상태 입니다.)

A) 라인 세척이 목적일 시 purge valve를 열어놓으면 컬럼 라인까지 세척이 어렵겠죠? 닫고 한번, 열고 한번 하시면 되겠네요.

추가로, 컬럼과 연결되는 부분은 (라인 끝단) 이물질이 많이 낄 수 있으니 라인을 조금 컷팅하고 사용하시면 좋습니다.

답변이 도움이 되었으면 좋겠네요. 화이팅 !

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