실험 Q&A Mol. Biol.-Protein > Western Blot
웨스턴 Housekeeping gene이 일정한 band로 안나와요ㅠㅠ
레벨1 핑광이 (대학원생)
저는 지금 석박통합 1학차 학생입니다.
웨스턴블랏을 하는데 실험을 거듭할수록 더 결과가 안좋아지는 것 같아요ㅠ
밴드가 한줄로 나와야되는데 두개 밴드가 잡힌다던지 막 뭉개져서 보인다던지 하기도하고 무엇보다 b-actin양이 일정하게 안나오네요...
정량을 하려면 b-actin 양이 일정해야하는데 매번 정량하면서도 찝찝합니다.
pipetting 하고 sample loading 했고 일정하게 안들어갈까봐 피펫 눈금이 돌아가고있지 않은지 로딩 할때마다 확인했어요ㅠㅠ
좀 더 일정하게 band가 나오게끔 하려면 뭘 더 해봐야할까요.. BCA assay부터 다시 하는중이긴한데 이제는 저를 못믿겠습니다..
#western blot
#housekeeping gene
#b-actin