실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
Agarose electrophoresis band 모양
레벨2 가랑비처럼 (대학생)
- 등록일 2023.05.29 18:06:44
- 조회1030
1번이 DNA ladder, 제일 오른쪽은 TDW, WT, KO 순이고 실험 수업에서 전기영동한 결과입니다
보통 전기영동을 돌리게되면 ㅡ자 모양이나 U자 모양이 정상인데 n자 모양이 나타나서 당황스럽습니다 ㅠ
그리고 DNA ladder도 잘 안 나타났습니다 무슨 문제일까요?
mouse tail에서 DNA extract 후 조교들이 PCR하여 증폭시켰고 저희는 loading만 하였습니다
DNA size marker는 4ul, sample들은 각 10ul, 얇게 나타난 band는 well이 아닌 well 밖에 loading하는 바람에 남은 양 가지고 loading하여 얇게 나왔습니다
(1. 조교가 gel을 미리 만들어 오긴 했지만 보관 상태가 양호했습니다 TAE buffer를 부어 wrap에 싼 상태에서 가져와 gel의 문제는 아닐 것 같습니다만 , gel 문제도 있지 않나 싶습니다/ 1% gel: 0.3g, 30ml, safepinky(EtBr 대체) 사용
2. 전기영동 기기 자체도 아닐 것 같습니다. 새로 꺼내어 실험을 진행하였습니다 전원을 누른 상태에서 뚜껑 덮히면 알아서 loading 되는 고정적인 전압을 주는 그런 기기입니다
3. TAE buffer는 0.5X buffer를 사용했는데 제가 생각하기엔 buffer도 문제 가능성이 보입니다)
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