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세포의 약물 처리 시 DMSO와 희석 농도 비율,,,

레벨2 밍도비 (대학원생)

등록일 2023.05.19 19:20:22
조회1261

선생님 안녕하세요

전 이번 신입생 1년차 입니다ㅠ

아무리 찾아도 답이 나오지 않아 이렇게 질문 올립니다.

저는 현재 약물을 세포에 treat하기 위해 농도 계산을 하고 있습니다.

약물은 파우더 형태로 5mg을 주문했고 DMSO 0.1411ml로 녹이면 100mM stock을 만들 수 있다고 data sheet에 나와있었습니다.

이 100mM stock으로 최종 농도 15uM을 처리하려고 하는데 계산이 맞는지 확인해주세요!!
10ul of 100mM(약 1000ul)+990ul DMSO=1000uM 로 중간 stock을 만든 후,

Treat 할 농도 2uM, 5uM, 10uM, 15uM로 잡고 계산한다면 배지 3ml(60pi) 기준 6ul, 15ul, 30ul, 45ul을 중간 stock에서 따서 넣으면 된다는 계산이 나왔습니다.

하지만, DMSO를 생각했을 때, 45ul를 넣으면 1.5%가 되니 독성땜에 좋지 않다고 들었는데,, 더 좋은 방법으로 희석 농도를 잡고 실험을 할 방법이 있을까요?

첨에 10mM으로 stock만들어 계산했는데 넘 양이 적어 처리할 때 loss가 많을 것 같아 100mM로 바꿨는데 이렇게 하는게 맞는건지 궁금합니다!!!

답변 부탁드립니다ㅠㅜㅜ

#약물 희석
#DMSO

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답변 6

답변등록

레벨8 SPEED
2023.05.19 22:49

처리 농도 별 stock을 다르게 해서 처리하세요.

레벨1 커피땅콩
2023.05.20 09:50

저라면 DMSO stock을 10mM로 만들 것 같아요~ 15uM까지 치신다면...

레벨2 밍도비 (대학원생)
2023.05.21 13:29

Speed님,

농도별로 stock을 다르게 만든다는 말이 2uM에 처리할 때 사용할 stock을 따로 준비하고 15uM 처리할 때 사용한 stock을 따로 따로 준비하란 말씀이신가요...?

레벨2 밍도비 (대학원생)
2023.05.21 13:32

커피 땅콩님,

첨에 stock을 10mM로 생각했는데 2uM 처리할때 3ml배지 기준 넣는 양이 0.6ul이고 15uM 기준 4.5ul이여서 너무 적은 양을 따는 거라 실험에 실수가 있을까봐 일부러 더 많은 양을 잡을 수 있게 농도를 잡았는데,,, 10mM을 중간 stock을 해서라도 실험 실수를 줄일 수 있는 방법이 있을까요??

10mM으로 했을 때, DMSO 농도도 적어서 괜찮다고 생각했는데,, 양때문에 걱정이 돼서요ㅜㅠ

레벨1 커피땅콩
2023.05.26 07:18

채택답변
질문자가 채택한 답변입니다.

10mM짜리 stock을 함께 처리할때 media에 희석시켜서 사용하시면 됩니다. 10mM 스탁 만들고, 10M 스탁을 media나 DMSO에 한번 더 10배 희석 시켜야죠 ㅎㅎ 0.6ul는 제대로 처리한지도 확인하기 힘듭니다.

레벨2 밍도비 (대학원생)
2023.06.02 17:54

커피 땅콩님,

답변 감사합니다!!

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