실전에서 M.O.I 정하고 감염시키려는데, 행동절차가 맞는지 확인부탁드립니다 | 답변 > 실험 Q&A > 커뮤니티

Q 실전에서 M.O.I 정하고 감염시키려는데, 행동절차가 맞는지 확인부탁드립니다

레벨04 답답한아이 (대학원생)

석사1학기차 초보입니다. 다양한 M.O.I(0.01, 0.1, 1, 10)으로

세균에 파지를 감염시키는 실험을 해야하는데, 공책에 끄적인 절차가

맞는지, 다들 이렇게 하는지 확인을 받아보고 싶습니다...

주위에 조언을 해줄 사람도 없어서...ㅠ

특정 상황을 가정하여 적어보겠습니다. 이렇게 행동을 하는 것이 맞는지...

조언부탁드립니다

1) M. O. I 란, 간단히 말해서 '바이러스 수 ÷ 세포수' 이므로

분자에 바이러스 수(PFU/ml), 분모에 세균 수(CFU/ml)를 구해야 한다.

이를 위해,

이중층 한천법으로는 PFU를 구하고,

또다른 plate의 TSA에는 위에 세균을 뿌리고 CFU를 구한다.

2) 1)의 결과, 10^5로 약분하였더니

분자는 75, 분모는 83이 나와서,

M.O.I가 약 0.903이 나왔다.

0.9라 치고, 이것을 보기 좋게 1로 보정하기 위해서는

1ml에 들어있는 바이러스의 숫자(분자)가 1.11배 더 많아져야 한다.

따라서 1ml 내 바이러스 농도를 1.11배 더 짙게하여 바이러스 용액을 만든다.

M.O.I가 이제 1이 되었으므로,

3) 위에서 1.11배를 더 짙게 만든 바이러스 용액을 기준으로 삼아서

바이러스의 용액을 x10 해주면 M.O.I가 10이 되는거고, 반대로 x 1/10 해주면

0.1이 된다

맞나요?

그니까, PFU와 CFU 값이 최대한 서로 같은 값이 되도록 분자나 분모 둘 중 하나를 건드려서(농도를 증가시키던가, 농도를 희석시키던가) 최대한 M.O.I를 1과 가깝게 만든 뒤,

이걸 기준으로 다시 0.1이든 0.01이든 10이든 100이든

만드는건가요?

ㅠㅠ

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