western 실험시 streptavidin-HRP 사용에 관해 질문이 있습니다. | 실험 Q&A > 커뮤니티

Q western 실험시 streptavidin-HRP 사용에 관해 질문이 있습니다.

레벨03 열심히 하자 (대학원생)

안녕하세요

biotinylation된 단백질을 western으로 detection하려고합니다.

저는 streptavidin 1차 안티바디를 쓰고 웨스턴을 하려고했는데

streptavidin 자체에 HRP가 달린 제품도 있더라구요

이 제품사용시에는 1차-2차 안티바디 반응없이

transfer가 끝난 membrane을 streptavidin-HRP으로 incubation을 해주고 바로 ECL과 반응하면 되나요?

만약에 이 방식이 맞다면 원래 쓰는 antigen-antibody보다 과정이 줄어들어 편할 것 같긴한데 효율도 좋을지 여쭤보고자 글을 써봅니다.

Mol. Biol.-Protein > Western Blot

A 답변 4

사용가능합니다.

답변 감사드립니다. 그러면 transfer가 끝난 membrane을 streptavidin-HRP으로 incubation을 해주고 바로 ECL과 반응하면 될까요?

- membrane washing을 1~2회 한 후 진행하면 될 겁니다.

넵

biotin이 붙은 1차 항체를 먼저 membrane에 붙여주고,

streptavidin-HRP를 2차 항체로 membrane에 붙여준 뒤,

ECL를 뿌려 확인하시면 됩니다

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(일반인)

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