HepG2/Huh7 cell과 관련하여 질문드립니다 | 답변 > 실험 Q&A > 커뮤니티

Q HepG2/Huh7 cell과 관련하여 질문드립니다

레벨01 Choip (대학원생)

23.03.22 09:33
조회2709

안녕하세요.

처음으로 Hepatocyte cell을 사용하여 실험을 하고있습니다.

2월에 한국세포주은행에서 세포를 받아 배양하여 늘린다음, 10^6 정도로 CELLBANKER^® 2를 사용하여 stock을 만들었습니다.

20일 월요일에 만들어뒀던 stock을 풀었는데요, 3일이 지난 지금도 cell이 잘 자라지 않아 질문 드립니다ㅜㅜ HepG2는 10% MEM, Huh7은 10% RPMI1640을 사용하고 있습니다.

보통 stock을 풀었을 때 하루 정도가 지나면 다 붙어서 자랐던 것 같은데 이 세포들은 왜 이럴까요ㅜㅜ HepG2와 Huh7 둘 다 대부분이 떠있고 바닥에 붙어있는 세포들은 적습니다. 그리고 붙어있는 세포들에서도 morphology가 나오지 않고 있습니다. 그냥 동글동글한 애들이 붙어있어요.

대체 뭐가 문제인 것인지 알려주세요ㅜㅜ세포가 너무 안자라요ㅜㅜ

Cell Biology > Cell Culture

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A 답변 6

레벨08 SPEED heart
23.03.22 09:35

- 현재 배양중인 cell 사진있나요?

답변리플

레벨01 셀렉바이오 (비회원)
23.03.22 10:50

안녕하세요 셀렉바이오 학술지원 담당자입니다.

보통 cell stock은 3x10^6 ~ 1x10^7 cells/vial로 banking을 하고

thawing 후 약 80%를 가진다고 생각합니다. 또한 약 3일이내에 recovery가 되곤 하며 빠르게 안정되기 위해서는 thawing 직후에는 density를 높여서 seeding하는 것이 viability에 도움을 줍니다.

혹은 세포 오염(mycoplasma)등일 수 있으니 cure가 필요할 수 있습니다!

HepG2 / Huh7등 저렴하고 최적화된 배지 혹은 mycoplasma 치료제, 다른 모든 시약 관련 질문은 언제든지 order@selecbio.com 으로 문의주세요^^ 항상 친절히 답변드리겠습니다.

답변리플

레벨08 SPEED heart
23.03.22 11:43

- 실험 Q&A에는 실험에 대한 내용만 하면 됩니다.

- 회사 광고는 Bio마켓에 하세요.

답변리플

레벨05 아이이이잉
23.03.22 16:04

HepG2 와 Huh7을 많이 키워봤지만 하루이상 지나는동안 재대로 붙지 않고 동글동글한 morphology를 가지는건 확실히 정상이 아니네요.

freezing 하는과정에 문제가 있었거나 freezing후 보관하는 동안 온도변화등의 데미지가 있었을 확률이 있습니다.

답변리플

레벨01 셀렉바이오 (비회원)
23.03.23 13:54

SPEED님께,

학술답변도 SPEED님이 답변주시는 것만큼 석사 연구원출신 직원이 성심성의껏 답변해드리고 있습니다.

더불어 필요한 시약을 구매하실수도 있으니 추후 문의를 달라고 말씀드리는 것 뿐입니다.

질문외에 내용은 광고드리고 있지 않으니 염려하지 않으셔도 될것같습니다.

답변리플

레벨01 Choip
23.03.24 17:31
질문자

답변 정말 감사드립니다ㅜㅜ 제가 학회에 와있어서 답변이 늦었습니다. 배양중인 세포 사진은 찍어둔게 없습니다ㅜㅜ 정말 작고 동글동글한 상태 그대로여서 가망이 없다고 판단, 제가 학회를 오기 전에 디쉬를 모두 버렸습니다ㅜㅜ 아이이이잉님께서 말씀해주신 대로 stock을 만드는 과정에서 문제가 있었던 것 같아요ㅜㅜ 만들어둔 stock 중 두개를 풀어봤지만 전부 세포가 자라지 않고 그 상태 그대로였습니다... 월요일에 다른 stock을 또 풀어보려고 합니다만, 그것도 같은 결과일거란 생각이 듭니다ㅜㅜㅜ 그 말인 즉슨 새로 분양받는 수밖에 없다는 말이겠지요...ㅜㅜㅜ