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Q agarose gel 적정 voltage

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레벨05 BBluee (일반인)

  • 23.03.21 09:23
  • 조회1901

cloning하는중에 clone size확인하려고 agarose gel에 샘플 loading후

voltage는 어느정도로 하는지요?

빨리 달리기 위해 200V는 너무 빠른가요?

사이즈에 따라 적정 전압이 있는지 궁급합니다

감사합니다.

Mol. Biol.-DNA > Gene Cloning

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답변등록

A 답변 5

  • 레벨01 123 (비회원)
  • 23.03.21 09:57

150으로 쓰고는 있습니다만

200이 된다고 드라마틱하게 빠르게 끝나진 않을겁니다.

150도 열이 많이 나니 200 올려놓고 기기 앞에서 문제는 없는지 보면서 해보세요

  • 레벨08 강시
  • 23.03.21 12:00

젤탱크의 두 전극 사이의 거리에 따라서 전압을 조정하면 됩니다.

두 전극 사이의 거리가 20cm 짜리와 40cm 짜리에 같은 200V 를 걸면 실제 가해지는 전압은 각각 1V/cm와 0.5V/cm 가 됩니다.

경험상 0.5V/cm 정도가 적당한 것 같아요. 급하면 buffer 의 온도가 올라가지 않는 조건이라면 1V/cm 이상 올려도 되지요.

  • 레벨05 BBluee
  • 23.03.21 14:30
  • 질문자

강시님 감사합니다.

두 전극  거리가 25cm 정도 200V 를 걸면 빨리 젤이 내려가는데

15분 정도면 사이즈는 확인이 되네요.

근데 30분정도 달리면 버퍼 온도가 좀 올라가긴하는데 혹시 dna에 변성이라도 생기게 

될까요? 타겟 젤을 elution해야 할 경우 버퍼온도 상승에 따른 부작용이 있을까요?

 

 

  • 레벨05 실험조아
  • 23.03.21 14:54

buffer가 뜨끈뜨끈할 정도면 DNA에도 기기에도 좋을리 없고

증발도 많이 되서 buffer 농도도 농축되어 진해지고

그럼 더 빨리 뜨끈뜨끈해 질겁니다.

  • 레벨08 강시
  • 23.03.21 15:02

buffer 온도가 올라가면 buffer를 바꿔서 사용하세요.

새로만든 걸로.

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