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발효 실험에서의 U/mL 계산식에 대해 질문드립니다!!

레벨2 알려주세요. (대학생)

Bacillus 속 균주를 곡물 추출물 100mL에 1% 접종하여 일정시간 발효를 진행하였고, sampling하여 unit를 계산 중입니다.

다름이 아니라 U/mL를 계산할 때 효소일때는 실제 반응 volume을 mL로 단위 변환해주면 되는데, 발효일땐 계산이 어떻게 진행되는지 알 수 있을까요?

sampling한 발효액이 반응이 끝난 '조효소-기질 반응액'으로 보는게 맞는데,

머릿 속에는 경우의 수가 두 가지로 나뉩니다.

1. 접종한 1% 균주 1mL를 조효소액으로 본다.

2. 배지와는 다르지만 탄소원, 질소원이 있는 곡물 추출물에서 균주는 생육을 하기 때문에 발효 시에는 100mL 전체가 조효소액으로 보는게 맞다.

문헌 검색에도 명확한 답이 나와있지 않아 감히 질문드려봅니다...

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답변 3

균이 효소, 곡물 추출물이 기질이 되는데 활성 계산하려면 시간, 분해산물 농도가 필요합니다.

amylase 기준으로 DNS법으로 실험한 후 흡광도 측정하여 glucose standard curve에 대입을 통해 glucose 양을 계산했습니다.

그리고 DNS와 반응한 발효액에 함유된 glucose 양을 산출했고,

발효(반응)시간을 나눠 Unit까지 계산했습니다.

U/mL 단위로 도출하려고 하니, 효소 양 즉, 발효액(조효소-기질액)의 기준이 정확히 무엇으로 잡아야 하는지 의문입니다.

앞서 말씀드린 것처럼 곡물 추출물에 접종한 균 배양액 1%인 1mL가 효소 양인지, 아님 발효되면서 균이 생육한 곡물추출물 100mL 전체를 효소 양으로 봐야되는지가 헷갈립니다.

균이 효소, 즉 1ml입니다.