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TLC관련 문의!! 부탁드려요

레벨2 김소현이다 (대학원생)

등록일 2023.01.30 10:30:55
조회1651

두 곰팡이를 co-culture 한 배양액중에 tannic acid가 생성되었는지 확인하기 위한 목적으로 TLC실험을 진행하였습니다. 우선 tannic acid의 분자량은 1,701.19g/mol입니다. 아세톤으로 추출을 진행하였으며 농축한뒤 첫번째 이동상(CH3 Cl: ethyl acetate: formic acid=5:4:1)으로 tlc를 내려보았더니 거의 전개가 되지 않은것을 볼수있었다.그래서 이동상을 바꾸어 보았다. upload_image

두번째 이동상은 에틸 아세테이트: 포름산: 아세톤: DW= 100: 11: 11: 27를 이용하였으며 그 결과 이전보다는 전개가 되었지만 실리카겔의 위쪽까지 전개되지는 않았다. upload_image

맨 왼쪽은 dw에 희석한 standard tannic acid이고 맨 오른쪽은 acetone에 희석한 tannic acid 이다.

질문사항은 1. 두개의 standard 중 어떤 용매에 희석한 standard가 더 적합한지? 2.sample이 전개되지 않은 이유가 이동상이 적합하지 않아서 인지, 분자량이 커서 인지 아니면 제가 따로 정제 과정을 거치지 않았기 때문인지 궁금합니다.

3.스탠다드와 샘플이 다른 속도로 전개된 이유에 대해서도 궁금합니다

4. 스탠다드의 농도 설정을 어떻게 해야될지 궁금합니다.

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답변 3

답변등록

레벨8 SPEED
2023.01.30 10:45

STD는 물, 아세톤 상관이 없습니다.

STD 농도가 어떻게 되나요?

sample에 tannic acid가 없는것 같습니다.

전반적으로 TLC 상태가 안좋기 때문에 개선을 해야할것 같습니다.

레벨2 김소현이다 (대학원생)
2023.01.30 12:40

스태다드의 농도는 0.1g/ml입니다. 빨간색으로 표시된 부분에서 스탠다드는 밴드같은게 보이고, 샘플은 정확한 밴드는 보이지 않지만 파란색으로 전개된 형상은 나타나는데 tannic acid가 없다고 판단하신 근거가 궁금합니다!!

레벨8 SPEED
2023.01.30 13:26

- STD와 위치가 다르고

- spot의 색이 다름. 색이 다르면 다른 물질.

STD 양은 1/5정도 줄여도 될것 같습니다.

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