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transcription factor에 대한 IF assay
레벨1 mol min (일반인)
- 등록일 2022.11.10 20:08:07
- 조회1138
안녕하세요
transcription factor에 대한 IF 수행중입니다.
target protein은 NFATc2(NFAT1)이구요 inactivation 상태에서 cytosol에 존재하고 activation 되면 핵으로 이동하는데
이것을 관찰하고자 IF를 수행 했습니다.
그런데 이상하게 모든 세포에서 핵이 진하게 염색이 되는 문제가 있어서 어떻게 troubleshooting을 해야할 지 몰라 질문 남깁니다.
fixing은 4% paraformaldehide로 10min 하고, PBS wash 후에 0.2% triton X-100 5min간 수행합니다.
그래서 cytosol에만 존재하는 protein으로 동일하게 실험 해봤더니 마찬가지로 모든 세포 핵에서 검출되네요....
답변부탁드립니다ㅜㅜ
transcription factor에 대한 IF 수행중입니다.
target protein은 NFATc2(NFAT1)이구요 inactivation 상태에서 cytosol에 존재하고 activation 되면 핵으로 이동하는데
이것을 관찰하고자 IF를 수행 했습니다.
그런데 이상하게 모든 세포에서 핵이 진하게 염색이 되는 문제가 있어서 어떻게 troubleshooting을 해야할 지 몰라 질문 남깁니다.
fixing은 4% paraformaldehide로 10min 하고, PBS wash 후에 0.2% triton X-100 5min간 수행합니다.
그래서 cytosol에만 존재하는 protein으로 동일하게 실험 해봤더니 마찬가지로 모든 세포 핵에서 검출되네요....
답변부탁드립니다ㅜㅜ
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