ELISA와 WESTERN BLOT SAMPLING 조건이 꼭 같아야하나요? | 답변 > 실험 Q&A > 커뮤니티

실험 Q&A Mol. Biol.-Protein > Western Blot

ELISA와 WESTERN BLOT SAMPLING 조건이 꼭 같아야하나요?

레벨2 sjsj3636 (대학원생)

안녕하세요!

저는 효능평가를 진행중인 석사생인데요!

제가 ELISA 데이터는 뽑았는데 기전쪽을 WESTERN BLOT을 수행해야돼서요!

제가 관련 논문들을 봤을때는 ELISA와 WESTERN에서 SAMPLING 조건이 다른 것을 꽤 봤는데요,,(WESTERN도 기전쪽과 염증분자들의 sampling 조건이 다른 논문들도 꽤 있었구요!)

그런데 저희 실험실에서는 완전히 같은 조건으로 상층액으로는 ELISA, Pellet으로는 WESTERN을 보시더라고요,

그리고 한 분은 elisa와 western의 sampling 조건은 무조건 똑같아야된다고 조작이라고 하시는데,, 정말 꼭 그런건가요? 그렇다면 제가 본 논문들은 다 조작인가요?,,,,,,

ELISA 데이터는 Sampling 을 4시간 자극 후 물질처리를 24시간 해주었습니다. 그런데 phospho-nf-kb를 보려고 같은 조건의 pellet으로 western을 수행했을때 전혀 나오지 않더라구요,,

그래서 이번에 조건을 다시 잡아보려고 물질을 24시간 pre-treat한 후에, 자극을 30min, 1hr, 2hr, 4hr, 6hr을 하여 pellet을 모아볼 예정인데 너무 ELISA의 조건과는 달라지는 것 같아서 걱정이 돼서 여쭤봅니다,,

ELISA와 WESTERN BLOT Sampling 조건이 무조건 똑같아야되나요?

그리고 달라도 된다고 했을때, 저처럼 너무 달라지면 논문쓸 때 곤란할까요?

걱정됩니다ㅠㅠ 전문가분들 답글 기다리겠습니다ㅠㅠㅠㅠ

신고하기0

실험Q&A를 통해 여러분의 지식을 나누어 주세요. 답변을 등록하시려면 로그인 해주세요.

본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.

답변 1

ELISA와 WB을 이용해서 보고자 하는 내용이 다를 때에는 조건이 달라질 수밖에 없을 텐데요...

ESLIA를 이용해서 보고 싶은 현상도 phospho-nf-kb일까요?