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COLO205 spheroid live/dead assay (invitrogen) 결과가 이상합니다!
레벨1 motherscoffee (대학생)
현재 체외 세포 배양 지지체 이용하여 세포를 키우고있는 대학원생입니다.
연구실에서는 1 mm의 두께를 가지는 직육면체 모양의 지지체를 이용하여 cancer cell spheroid를 키우고 있는데요.
최근에 invitrogen사의 live/dead imaging kit를 이용한 염색 결과가 조금 의아하여 질문 남깁니다.
방법은 아래와 같습니다.
staining solution : RPMI 1640을 1:1로 섞은 후
지지체를 넣어줍니다. (1.5 mL 튜브)
15분 incubation 후 PBS로 washing 후 이미징합니다.
사진을 보면, 세포가 live/dead 모두 염색된 경우가 있는 이미지가 얻어집니다. 세포 실험으로 경험이 많은 선배님 있으시면 답변 부탁드립니다!