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고수님들 ELISA 실험 도와주세요!

레벨2 minchodan (대학생)

Thermofisher ELISA kit로 진행하는데요.

프로토콜대로 standard를 만들어서 흡광을 찍었는데,

OD 값이 0.9~0.95 정도 나오는게 맞다는데 ,,

동일한 실험 3번 진행했는데도 0.45~0.5 나오네요.

standard를 DW에 10~30min 정도 희석하라는데,, 보통 10분 정도 희석했는데,,

희석이 잘 안되고, 잘 안 섞인 건지,,,,,

이럴 경우엔 보통 뭐가 문제일까요?

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답변 3

질문에 자세한 내용이 없어 정확히 답을 하긴 힘들지만, 우선 스탠다드 커브는 제대로 나오셨는지 확인해 보셨는지요?

어떤 것에 대해 실험을 진행하시는지는 모르겠으나, 흡광도 값이 중요한 것이 아니라 제일 중요한 것이 스탠다드 커브가 제대로 나와야 하고, 보고자하는 샘플이 그 스탠다드 커브 레인지 안에 드는지가 중요합니다.

윗분께서 standard curve 이야기를 해주셨으니 저는 wavelength 체크를 해보시라고

말씀드리고 싶네요~

Standard curve는 잘 그려졌고, R=0.99나왔습니다.