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Q 얼고 녹고 했던 식물 DNA추출 노하우 있으신 분 있나요

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레벨01 아이씨 모르겠다고 (대학생)

  • 21.10.05 14:32
  • 조회1681

키트도 써보고 CTAB도 써봤는데 뽑고 사진찍고 나노드랍 해보면 희미하게 깨져서만 나오네요... 해외에서 들여오던 도중 잠깐 냉동고 전원이 나가서 녹았던 샘플 입니다. 지금은 냉동실에 잠들어있어요 비슷한 경험 있으신 분께서 관련하여 첨언해주셨으면 좋겠어서 질문 올립니다

Plant Biology > Plant DNA RNA Isolation

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A 답변 5

  • 레벨08 SPEED heart
  • 21.10.05 14:39

- 잠깐 냉동고 전원이 나가서 녹았던 샘플 입니다.

: -18도 정도에서 냉동했던 시료인가요?

 

- 구체적으로 어떤 방법으로 추출했나요?

  • 레벨01 아이씨 모르겠다고
  • 21.10.05 14:48
  • 질문자

-20도에서 보관했었습니다(일본~한국 이라 얼마 안걸렸어요)

Favor prep 식물용, Cene all Exgene 식물용 SVmini 둘 다 프로토콜 그대로 사용해보고 CTAB할 때는 40분정도 배양해서 사용했습니다

  • 채택된 답변입니다.
  • 레벨08 SPEED heart
  • 21.10.05 14:53

사용한 protocol은 사용가능한 방법이니 방법의 문제는 아닙니다.

실제로 했던 protocol에서 문제점을 찾아야 합니다.

 

DNA가 분해되어 나오 더라도 양은 어느정도 나오는 것이 정상입니다. 

  • 레벨05 A'ANE
  • 21.10.05 17:12

DNA면 잠깐 녹았던 정도로는 아주 샘플에 손상이 있던가 하진 않을겁니다.

 

실제로 DNA추출했던 프로토콜 자체를 개선하던가 

 

혹은 Plant DNA 추출키트같은걸 사용해보시는게 좋을 듯 하네요,

 

추가로 샘플 운송시 핵산integrity 손상여부가 걱정되신다면 DNA RNA shield(http://www.kyongshin.com/productview.php?pd_id=84) 같은 핵산보존용액을 사용하시면 좋습니다. 

  • 레벨05 202020
  • 21.10.06 01:07
RNA도 아니고 DNA는 쉽게 변성되지 않습니다. Paper에 dry시켜 배송하기도 하는데 실험방법에 문제가 있는거같네요

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